Phylogenetic studies were conducted to evaluate the taxonomic relationships among 28 taxa, including 2 outgroups of Korean Campanulaceae, using atpB, atpB-rbcL, atpF-H, matK, rbcL, rpl16, rpoC1 and trnL-F regions sequences in chloroplast DNA. The combined analyses of eight chloroplast DNA regions suggest that Codonopsis and Platycodon basally branches within the phylogenetic tree; Wahlenbergia distinguished an independent clade; Campanula forms a clade; Peracarpa and Asyneuma clade is a sister to the Adenophora-Hanabusaya clade; Hanabusaya is placed within the section Remotiflorae of Adenophora; Adenophora form a clade. Our present results support the generic level, although discordance remained at the infrageneric groups such as section and series based on morphological characteristics in the genus Adenophora.
Avian trichomoniasis caused by Trichomonas gallinae is a serious protozoan disease worldwide. The domestic pigeon (Columba livia domestica) is the main host for T. gallinae and plays an important role in the spread of the disease. Based on the internal transcribed spacers of nuclear ribosomal DNA of this parasite, a pair of primers (TgF2/TgR2) was designed and used to develop a PCR assay for the diagnosis of T. gallinae infection in domestic pigeons. This approach allowed the identification of T. gallinae, and no amplicons were produced when using DNA from other common avian pathogens. The minimum amount of DNA detectable by the specific PCR assay developed in this study was 15 pg. Clinical samples from Guangzhou, China, were examined using this PCR assay and a standard microscopy method, and their molecular characteristics were determined by phylogenetic analysis. All of the T. gallinae-positive samples detected by microscopic examination were also detected as positive by the PCR assay. Most of the samples identified as negative by microscopic examination were detected as T. gallinae positive by the PCR assay and were confirmed by sequencing. The positive samples of T. gallinae collected from Guangzhou, China, were identified as T. gallinae genotype B by sequencing and phylogenetic analyses, providing relevant data for studying the ecology and population genetic structures of trichomonads and for the prevention and control of the diseases they cause.
Background: Species in the heterokont genus Synura are colonial and have silica scales whose ultrastructural characteristics are used for classification. We examined the ultrastructure of silica scales and molecular data (nuclear SSU rDNA and LSU rDNA, and plastid rbcL sequences) to better understand the taxonomy and phylogeny within the section Petersenianae of genus Synura. In addition, we report the first finding of newly recorded Synura species from Korea. Results: We identified all species by examination of scale ultrastructure using scanning and transmission electron microscopy (SEM and TEM). Three newly recorded species from Korea, Synura americana, Synura conopea, and Synura truttae were described based on morphological characters, such as cell size, scale shape, scale size, keel shape, number of struts, distance between struts, degree of interconnections between struts, size of base plate pores, keel pores, base plate hole, and posterior rim. The scales of the newly recorded species, which belong to the section Petersenianae, have a well-developed keel and a characteristic number of struts on the base plate. We performed molecular phylogenetic analyses based on sequence data from three genes in 32 strains (including three outgroup species). The results provided strong statistical support that the section Petersenianae was monophyletic, and that all taxa within this section had well-developed keels and a defined number of struts on the base plate. Conclusions: The phylogenetic tree based on sequence data of three genes was congruent with the data on scale ultrastructure. The resulting phylogenetic tree strongly supported the existence of the section Petersenianae. In addition, we propose newly recorded Synura species from Korea based on phylogenetic analyses and morphological characters: S. americana, S. conopea, and S. truttae.
Objective: This study was conducted to investigate the basic information on genetic structure and characteristics of Korean Native chickens (NC) and foreign breeds through the analysis of the pure chicken populations and commercial chicken lines of the Hanhyup Company which are popular in the NC market, using the 20 microsatellite markers. Methods: In this study, the genetic diversity and phylogenetic relationships of 445 NC from five different breeds (NC, Leghorn [LH], Cornish [CS], Rhode Island Red [RIR], and Hanhyup [HH] commercial line) were investigated by performing genotyping using 20 microsatellite markers. Results: The highest genetic distance was observed between RIR and LH (18.9%), whereas the lowest genetic distance was observed between HH and NC (2.7%). In the principal coordinates analysis (PCoA) illustrated by the first component, LH was clearly separated from the other groups. The correspondence analysis showed close relationship among individuals belonging to the NC, CS, and HH lines. From the STRUCTURE program, the presence of 5 clusters was detected and it was found that the proportion of membership in the different clusters was almost comparable among the breeds with the exception of one breed (HH), although it was highest in LH (0.987) and lowest in CS (0.578). For the cluster 1 it was high in HH (0.582) and in CS (0.368), while for the cluster 4 it was relatively higher in HH (0.392) than other breeds. Conclusion: Our study showed useful genetic diversity and phylogenetic relationship data that can be utilized for NC breeding and development by the commercial chicken industry to meet consumer demands.
A portion of ribosomal internal transcribed spacer (ITS) 2 was sequenced from the samples of Pseudo nitzschia (P. deticatissima, P. multiseries, P. pungens and P. subfraudulenta) to investigate the genetic characteristics by measuring tile magnitude of genetic diversity and the degree of similarity coefficient using random amplified polymorphic DNAs (RAPD)-PCR patterns. The phylogenetic trees inferred from the genetic distance analyses showed the placement of P. delicatissima formed a quite long distance from p. P. multiseries, P. pungens, and even P. subfraudulenta. The phylogenetic tree from RAPD patterns showed that P. multiseries and P. pungens had dissimilarity coefficient of 0.31, while P. delicatissima and three species of Pseudo-nitzschia had that of 0.81. It is likely thought that the genetic position of P. delicatissima formed far from P. multiseries, P. punges, and P. subfraudulenta. These results imply that ITS2 region is expected to support a useful molecular characters for recognizing at the species level and for even discriminating P. multiseries from P. pungens. RAPD method also will be used to differentiate the species of Pseudo-nitzschia in a short time.
The nucleotide sequences of the internal transcribed spacer regions (ITS1 and ITS2) of ribosomal DNA (rDNA), and the 5.85 rRNA gene, have been determined for 13 strains of dinoflagellates in order to analyze the phylo-genetic relationship. The DNA sequences contained considerable variation in the ITS regions, but little in the 5.85 rDNA. In addition, the ITS1 was more variable than the ITS2 in all species examined. The nucleotide length of this region varied from 519 bp to 596 bp depending on the taxa. The investigated taxa were divided into three large groups based on the ITS length, i. e., a group with short ITS region (A. fraterculus and Alexandrium sp.), a with ITS region group (P. micans, P. minimum and P. triestinum) and a with ITS region group (G. impudicum, C. polykrikoides, G. sanguineum, G. catenatum and H. triquetra). The relationship between nucleotide length of ITS1 and that of ITS2 was negative, whereas G+C content and nucleotide length showed positive correlation. In phylogenetic analyses producing NJ trees, the topology was similar cluster and clearly divided the taxa into three groups based on 5.8S rDNA that were similar to those based on morphological characteristics. In particular, G. impudicum was more closely related to G. catenatum than to C. polykrikoides using phylogenetic analysis. From this study, we chew that the length of ITS region contributes to discriminate Korean harmful algal species and ITS analysis is a useful method for resolving the systematic relationships of dinoflagellates.
Phylogenetic relationships in Korean watermelons were evaluated by genetic similarity coefficients using 15 SSR(simple sequence repeat), 14 SCAR(sequence characterized amplified region) and 14 CAPS(sequence characterized amplified region) markers. The SSR markers were selected from previously reported melon and watermelon SSRs through testing polymorphisms within a set of commercial $F_1$ varieties. The SCAR and CAPS markers were developed from polymorphic AFLP(amplified fragment length polymorphism) markers between inbred lines 'BN4001' and 'BN4002'. From the AFLP analysis, 105 polymorphic fragments were identified between the inbred lines using 1,440 primer combinations of EcoRI+CNNN and XbaI+ANNN. Based on the sequencing data of these polymorphic fragments, we synthesized sequence specific primer pairs and detected clear and reliable polymorphisms in 27 primer pairs by indels(insertion/deletion) or RFLP(restriction fragment length polymorphism). A total of 43 sequence-based PCR markers were obtained and polymorphic information content(PIC) was analyzed to measure the informativeness of each marker in watermelon varieties. The average PIC value of SCAR markers was 0.41, which was similar to that of SSR markers. Genetic diversity was also estimated by using these markers to assess the phylogenetic relationships among commercial varieties of watermelon. These markers differentiated 26 Korean watermelon varieties into two major phylogenetic groups, but this grouping was not significantly correlated with their morphological and physiological characteristics. The mean genetic similarity was 66% within the complete set of 26 commercial varieties. In addition, these sequence-based PCR markers were reliable and useful to identify cultivars and genotypes of watermelon.
Porcine epidemic diarrhea virus(PED), a member of Coronaviridea, is the etiological agent of enteropathogenic diarrhea in swine. The purpose of this study was to investigate genetic characteristic of PEDV isolated in Korea. Nucleocapsid(N) gene and membrane (M) gene of recent Korean PEDV strains isolated in 2001 were amplified, cloned, sequenced and analyzed. N gene of seven Korean PEDV field isolates bad 94.5% to 99.4% nucleotide and 92.4% to 99.4% amino acid sequence homology each other. Nucleotide and amino acid sequences of Korean field PEDVs were different from published foreign PEDVs, showing 95.1% to 98.0% nucleotide and 93.5% to 97.6% amino acid sequence homology. By phylogenetic tree analysis on based nucleotide sequences, PEDVs were clustered into four groups. By phylogenetic tree analysis based on amino acid sequences. PEDVs were clustered into five groups. M gene of our Korean PEDV field isolates had 99.6% to 100% nucleotide and 98.7% to 100% amino acid sequence homology each other. Nuclotide and amino acid sequences of Korean field PEDVs were different from published foreign PEDVs, showing 98.5% to 98.8% nucleotide and 97.3% to 97.8% amino acid sequence homology. By phylogenetic tree analysis based on nucleotide and amino acid sequences, PEDVs were clustered into two groups which were Korean PEDV isolate group and foreign PEDV isolate group.
The phylogenetic tree displayed the presence of five groups in the Phellinus genus, which were distinguished based on their morphology. Most of the p. linteus appeared a cluster which was highly significant with the exception of P. linteus KACC 500122 and KACC 500411. They formed the sister taxa of P 1inteus where P. baumii, Phellinus sp. MPNU 7003, MPNU 7007, and MPNU 7010 had similar morphological characteristics. Also, P. nigricans IMSNU 32024 and P. pini var, carniformans IMSNU 32031 were grouped in the same cluster with P. igniarius KCTC 6227, KCTC 6228, and P. chrysoloma KCTC 6225 extracted from the Gen-Bank database. P. torulosus IMSNU 32028 and Phellinus sp. MPNU 7011 formed a closed group, however, these species had a distant taxa when compared with the other Phellinus species. The nucleotide sequences of the internal transcribed spacer (ITS) regions of ribosomal DNA (rDNA) including the 5.85 rDNA were determined from 24 strains of the Phellinus genus in order to analyze their phylogenetic relationship. These fungi were divided into two basic groups based on their ITS length, however, this grouping was different from that based on their morphological characteristics. Although various ITS sequences were ambiguously aligned, conserved sites were also identified. Accordingly, a neighbor-joining tree was constructed using the nucleotide sequence data of the conserved sites of the ITS regions and the 5.8S rDNA.
In this study, we aimed to characterize fungal samples from necrotic lesions on collar regions observed in different sweetpotato growing regions during 2015 and 2016 in Korea. Sclerotia appeared on the root zone soil surface, and white dense mycelia were observed. At the later stages of infection, mother roots quickly rotted, and large areas of the plants were destroyed. The disease occurrence was monitored at 45 and 84 farms, and 11.8% and 6.8% of the land areas were found to be infected in 2015 and 2016, respectively. Fungi were isolated from disease samples, and 36 strains were preserved. Based on the cultural and morphological characteristics of colonies, the isolates resembled the reference strain of Sclerotium rolfsii. Representative strains were identified as S. rolfsii (teleomorph: Athelia rolfsii) based on phylogenetic analysis of the internal transcribed spacer and large subunit genes along with morphological observations. To test the pathogenicity, sweetpotato storage roots were inoculated with different S. rolfsii strains. 'Yulmi' variety displayed the highest disease incidence, whereas 'Pungwonmi' resulted in the least. These findings suggested that morphological characteristics and molecular phylogenetic analysis were useful for identification of S. rolfsii.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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