This work deals with different extraction media and reaction mixtures on photosystem II activity of Spinach chloroplasts. The photoreduction rate of ferricyanide and DPIP by intact chloroplasts which extracted with four kinds of extraction media; S-Tris-N pH 7.2, 8.0, S-Tricine-N pH 7.2, 8.0, was measured in five kinds of reaction mixtures; S-Tris-N pH 7.2, 8.0, S-Tricine-N pH 7.2, 8.0, 0.05 M-Tris pH 7.2. The extraction medium which shows the highest photoreduction rate was S-Tris-N at pH 7.2 and S-Tricine-N at pH 8.0. As to the reaciton mixture, S-Tricine-N pH 8.0 showed the highest rate. On the complex effects of extraction media and reaction mixtures, the highest photordeuction rate of Hill oxidant by intact chloroplasts was obtained by S-Tris-N pH 7.2 extraction medium and S-Tricine-N pH 8.0 reaction mixture. The second highest activity was obtained by S-Tricine-N pH 8.0 extraction medium and reaction mixture.
As sunlight not always optimized for every terrestrial plant in terms of light quality, quantity and duration, some plants suffer detrimental effects of sunlight exposure under certain conditions. Photoinhibition of photosynthesis is a typical phenomenon representing harmful light effects, commonly observed in many photosynthetic organisms. It is generally accepted that functional, structural loss of photosystem II complex(PSII) is the primary event of photoinhibition. Accumulating data also suggest that singlet oxygen($^1$O$_2$) is the main toxic species directly involved in it. There are two different views on the specific site and mechanism of $^1$O$_2$ production in the photosynthetic membrane. One of them favors the PSII reaction center, where the primary charge pairs recombination occurs as a prerequisite for the generation of $^1$O$_2$, and the other inclines to photosensitized $^1$O$_2$ formation by a substance located outside PSII. This article describes how we, as the advocators of the latter concept, have arrived at the conclusion that $^1$O$_2$ immediately involved in PSII photodamage is largely generated from the Rieske center of the cytochrome b$_{6}$/f complex and diffuses into PSII, attacking the reaction center subunits.s.
In this study the disassembly process of chlorophyII (ChI)protein complexes of a stay-green mutant (ore10 of Arabidopsis thaliana) was investigated during the dark incubation of detached leaves. During this dark-induced senescence (DIS), the Chi loss was delayed in the mutant, while the photochemical efficiency of photosystem II (PSII) or Fv/Fm was accelerated when compared with the wild type (WT) leaves. This indicates that the decrease in Fv/Fm is a separate process and not causally-linked to the degradation of Chi during DIS of Arabidopsis leaves. In the native green gel electrophoresis of the Chi-protein complexes, which was combined with an additional twodimensional SDS-PAGE analysis, the delayed senescence of this mutant was characterized by the appearance of an aggregate at 1 d or 2 d, as well as very stable light harvesting complex II (LHCII) trimers until 5 d after the start of DIS. The polypeptide composition of the aggregates varied during the whole DIS at 5 d. Dl protein appeared to be missing in the aggregates. This result supports the idea of a faster depletion of functional PSH in the mutants compared with WT, as suggested by the earlier reduction of Fv/Fm and the stable Chl a/b ratio in the mutants. At 5 d, the WT leaves also often showed aggregates, but the polypeptide composition was different from those of ore10. The results presented suggest that the formation of aggregates, or stable LHCII trimers in the stay-green mutants, is a way to structurally protect Chi-protein complexes from serious proteolytic degradation. Detailed disassembly processes of Chi-protein complexes in WT and ore10 mutants are discussed.
인삼의 엽소현상과 광계 II(photosystem II)의 광수확 엽록소-단백질 복합체(LHCP II)의 광에너지 분배 기작과의 관계를 구명코저 LHCP II의 인산화에 따른 형광 quenching과 광량별 인산화 정도, 그리고 단백질 조성을 조사하였다. 인삼은 DCMU의 존재 하에서 photosystem II의 형광발생량이 양지식물인 콩에 비해 많았으며, 인간화에 따른 형광 quenching율도 현저히 높았다. 또한, 강광(25k1ux 이상)에서 인삼은 인산화에 따른 형광 quenching율이 콩에 비해서 2배정도 높다는 사실을 확인하였다. 엽록소-단백질 복합체(CP-complex)의 조성비율 및 LHCP II를 구성하고 있는 단백질의 앙과 수적인 면에서 비교식물과 큰 차이를 나타내었는데, 24~29kD 범위에서 인삼은 25, 26, 27kD의 major 밴드와 24, 25.3, 28.3kD의 minor밴드로 구성되어 있었으며 광량에 의존적으로 인산화가 증가하는 인삼의 LHCP II 단백질은 24kD 이었다.
Effects of HgCl$_2$-treatment on electron transport, chlorophyll a fluorescence and its quenching were studied using isolated barley (Hordeum vulgare L. cv. Albori) chloroplasts. Depending on the concentration of HgCI$_2$, photosynthetic oxygen-evolving activities of photosystem II (PS II) were greatly inhibited, whereas those of photosystem I (PS I) were slightly decreased. The inhibitory effects of HgCl$_2$ on the oxygen-evolving activity was partially restored by the addition of hydroxyamine, suggesting the primary inhibition site by HgCl$_2$2-treatment is close to the oxidizing site of PS tl associated with water-splitting complex. Addition of 50 $\mu$M HgCI$_2$ decreased both photochemical and nonphotochemical quenching of chlorophyll fluorescence. Especially, energy dependent quenching (qE) was completely disappeared by HgCl$_2$-treatment as observed by NH$_4$CI treatment. In the presence of HgCI$_2$, F'o level during illumination was also increased. These results suggest that pH gradient across thylakoid membrane can not be formed in the presence of 0 $\mu$M HgCl$_2$. In addition, antenna pigment composition might be altered by HgCl$_2$-treatment.
Effects of light on leaf senescence of Phseolus vulgaris were investigated by measuring the disassembly of chlorophyll-protein complexes in detached leaves which had been kept in the dark or under light. The loss of chlorophyll accompanied by degradation of chlorophyll- protein complexes. PSI (photosystem I) complex containing LHCI (light harvesting complex of PSI) apoproteins was rapidly decreased after the early stage of dark-induced senescence. RC(reaction center)-Cores was slightly increased until 4 d and slowly decreased thereafter. As disassembly of LHCII trimer progressed after the late stage of senescence, there was a steady increase in the relative amount of SC(small complex)-2 containing LHCII monomer. On the other hand, white and red light adaptation caused the structural stability of chlorophyll-protein complexes during dark-induced senescence. Particularly, red light was more effective in the retardation of LHCII breakdown than white light, whereas white light was slightly effect in protecting the disassembly of PSI complex compared to red light. These results suggest, therefore, that light may be a regulatory factor for stability of chlorophyll-protein complexes in the senescent leaves.
Park, Jimin;Lee, Jung-Ho;Park, Yong-Sun;Jin, Kyoungsuk;Nam, Ki Tae
한국진공학회:학술대회논문집
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한국진공학회 2013년도 제45회 하계 정기학술대회 초록집
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pp.91-91
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2013
Imagine a world where we could biomanufacture hybrid nanomaterials having atomic-scale resolution over functionality and architecture. Toward this vision, a fundamental challenge in materials science is how to design and synthesize protein-like material that can be fully self-assembled and exhibit information-specific process. In an ongoing effort to extend the fundamental understanding of protein structure to non-natural systems, we have designed a class of short peptides to fold like proteins and assemble into defined nanostructures. In this talk, I will talk about new strategies to drive the self-assembled structures designing sequence of peptide. I will also discuss about the specific interaction between proteins and inorganics that can be used for the development of new hybrid solar energy devices. Splitting water into hydrogen and oxygen is one of the promising pathways for solar to energy convertsion and storage system. The oxygen evolution reaction (OER) has been regarded as a major bottleneck in the overall water splitting process due to the slow transfer rate of four electrons and the high activation energy barrier for O-O bond formation. In nature, there is a water oxidation complex (WOC) in photosystem II (PSII) comprised of the earthabundant elements Mn and Ca. The WOC in photosystem II, in the form of a cubical CaMn4O5 cluster, efficiently catalyzes water oxidation under neutral conditions with extremely low overpotential (~160 mV) and a high TOF number. The cluster is stabilized by a surrounding redox-active peptide ligand, and undergo successive changes in oxidation state by PCET (proton-coupled electron transfer) reaction with the peptide ligand. It is fundamental challenge to achieve a level of structural complexity and functionality that rivals that seen in the cubane Mn4CaO5 cluster and surrounding peptide in nature. In this presentation, I will present a new strategy to mimic the natural photosystem. The approach is based on the atomically defined assembly based on the short redox-active peptide sequences. Additionally, I will show a newly identified manganese based compound that is very close to manganese clusters in photosystem II.
Changes in weed floras and development of plant resistance to herbicides seemed to be closely related with increased and repeated use of herbicides. Herbicide use increased from 5% of the total consumption of pesticide in 1950 to 45% in 1976 in world basis. About 200 herbicides have been introduced to agriculture so as to control about 206 weed species which have been recorded important to human beings. In Korea, there was about 351 times in increased use of herbicides from 1966 to 1982. Interspecific selection by herbicide is mainly responsible for changes in weed floras and resulted in varying tolerance or susceptibility to herbicides, together with the changes of agricultural practices. The present trend toward continuous cereal cultivation throughout world will lead to type of changes in weed floras favorable to therophyte which can survive under unfavorable conditions as seeds rather than the types of geophyte which can survive unfavorable seasons as buds placed below soil surface. However, geophyte such as Sagitaria pygmaea, and Scirpus jurtcoides, and Cyperus rotundus and Cynodon dactylon in temperate warm climate become severe paddy weeds, presumably because of the removal of annual weeds by herbicides. Since differential tolerance to 2,4-D was firstly reported in Agrostis stolofera, about 30 species of weeds in 18 genera are presently known to have developed resistance to triazine herbicides. Resistance of weed biotypes to triazine herbicide is not mainly due to limited absorption and translocation or to the difference in metabolism, but is the result of biochemical changes at the site of metabolic activity, such as a loss of herbicide affinity for triazine binding site in the photosystem II complex of the chloroplast membrane. Genetical study showed that plastid resistance to triazine was wholly inherited through cytoplasmic DNA in the case of Brassica campestris. Plant tissue culture method can be utilized as an alternate mean of herbicide screening and development of resistance variants to herbicides as suggested by Chaleff and Parsons. In this purpose, one should be certain that the primary target process is operational in cell culture. Further, there are a variety of obstacles in doing this type of research, particularly development of resistance source and it's regeneration because cultured cells and whole plants represent different developmental state.
Glyphosate를 토마토의 동화산물 공급부위에 처리하였을 때, 제초제결합 단백질인 QB 단백질을 Escherichia coli 내에서 ${\alpha}$-galactosidase가 발현되기 위해 lac Z 유전자의 3' 말단에 cloning된 시금치 psb A 유전자에 의해 발현되는 hybrid 단백질에 대한 항체를 형성시킨 후 이것을 이용하여 immunoblotting을 실시하였다. G1yphosate는 thylakoid 막의 Photosystem II내에 있는 D1 단백질의 붕괴에 영향을 주었다. LHC II 복합체내의 D1 단백질의 기능 이상은 glyphosate 의 다면발현적 효과였다.
The formation of chlorophyll-protein complexes (CP-complexes) during the greening of rape cotyledons (Brassica napus cv. Yongdang) was investigated by the SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The total chlorophyll content and Chl a/b ratio were also determined. In addition, the effects of dark treatment on the CP-complex patterns during greening have been examined with respect to their photosynthetic electron transport activity. Greening has brought about the increasein total chlorophyll content and the decrease in Chl a/b ratio, but there have been no changes in Chl a/b ratio after 24 hrs of greening. The light-harvesting chlorophyll a/b-protein complex (LHCP-complex0 was predominant during the initial greening period. Thereafter, the amout of chlorophyll a-protein complex (CP I-complex) was gradually increased. Twenty-four-hr dark treatment immediately after illumination for 6 hrs and 12 hrs resulted in the increase of the Chl a/b ration and the CP I complex, otherwise the decrease of the LHCP-complex. The LHCP/CP I ratio was gradually decreased with further greening, and appeared no change after 48 hrs illumination. The investigation of the photosynthetic electron transport activity indicated that photosystem (PS) II activity (H2Olongrightarrowp-PD*+FeCy**) did not change, but the activity of PS I was increased suddenly due to the dark treatment. The data suggests that the increase of CP I-complex may result in that of P-700, that is, the increase of PS I activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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