Nakamura, Chikashi;Hasegawa, Miki;Shimada, Kazumi;Shirai, Makoto;Miyake, Jun
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제5권6호
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pp.413-417
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2000
In this study, a direct detection system for triazine derivative herbicides was developed using the photosynthetic reaction center (RC) from the purple bacterium, Rhodobacter sphaeroides, and surface plasmon resonance (SPR) apparatus. The histidine-tagged RCs were immobilized on an SPR gold chip using nickel-nitrilotriacetic acid groups as a binder for one of the triazine herbicide, atrazine. The SPR responses were proportional to the sample concentrations of atrazine in the range 0.1-1 $\mu\textrm{g}$/mL. The sensitivity of the direct detection of atrazine using the RC-assembled sensor chip was higher than that using the antibody-immobilized chip. The other types of herbicides, DCMU or MCPP, were not detected with such high sensitivity. The results indicated the high binding selectivity of the RC complex.
Various mutants either lacking or having decreased levels of light-harvesting complexes and reaction center complex were obtained with a high frequency by an increased formation of poly-3-hydroxybutyrate (PHB) in Rhodobacter sphaeroides. One of the photosynthesis-defective mutants, PY-17, which was devoid of any of the light-harvesting complexes (B800-850, B875) as well as the reaction center complex, was analyzed further. The mutant showed substantial transcription of the puhA, pufKBALMX, and pucBAC operons coding for the structural proteins of the photosynthetic complexes although each of the activities was lower than that of the wild type. Translation of the pufKBALMX and pucBAC operons were also active in the mutant although with activities different from the corresponding one of the wild type. From these results the mutation appears to exert its effect at the post-translational level of the photosynthetic complex assembly. Complementation of the photosynthesis-defective phenotype of the mutant was achieved with an about 12-kb DNA region containing the puhA gene. The relationship between the formation of PHB and photosynthetic complexes is discussed.
As sunlight not always optimized for every terrestrial plant in terms of light quality, quantity and duration, some plants suffer detrimental effects of sunlight exposure under certain conditions. Photoinhibition of photosynthesis is a typical phenomenon representing harmful light effects, commonly observed in many photosynthetic organisms. It is generally accepted that functional, structural loss of photosystem II complex(PSII) is the primary event of photoinhibition. Accumulating data also suggest that singlet oxygen($^1$O$_2$) is the main toxic species directly involved in it. There are two different views on the specific site and mechanism of $^1$O$_2$ production in the photosynthetic membrane. One of them favors the PSII reaction center, where the primary charge pairs recombination occurs as a prerequisite for the generation of $^1$O$_2$, and the other inclines to photosensitized $^1$O$_2$ formation by a substance located outside PSII. This article describes how we, as the advocators of the latter concept, have arrived at the conclusion that $^1$O$_2$ immediately involved in PSII photodamage is largely generated from the Rieske center of the cytochrome b$_{6}$/f complex and diffuses into PSII, attacking the reaction center subunits.s.
내음성정도가 서로 다른 두 수종 먼나무와 붓순나무를 대상으로 높은 광도조건인 자연상태와 낮은 광도 조건인 비음 처리구로 나누어, 두 수종간의 적응 반응을 비교하였다. 두 수종의 묘목을 처리구에서 각각 1년간 비음처리하였을 때, 엽록소함량과 광합성계, 엽육세포내 $CO_2$농도, 수분이용효율의 특성을 조사하였다. 엽록소 함량은 두 수종모두 자연조건(full sunlight)일 때, 비음처리구에 비하여 낮은 엽록소 함량들(Chl a, Chl b, Chl a+b)을 나타냈으며, 붓순나무에서 특히 자연조건과 비음 처리구간의 엽록소 함량의 차이가 크게 나타났다. 한편, 중용수인 먼나무는 PPFD $1000\;{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ 이상 일 때, 자연조건(full sunlight)에서 높은 광합성율과 높은 수분이용효율을 보였지만, PPFD $1000\;{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ 이하에서는 비음처리구에서 자연조건에 비해 더 높은 광합성율과, 수분이용효율을 나타냈다. 이에 반해 붓순나무는 모든 광도에서 비음처리를 하지 않은 묘목이 비음처리를 한 묘목에 비해 낮은 광합성율과 수분이용효율을 나타냈다. 먼나무가 탄력적으로 광도변화에 따라 유동성 있는 반응을 보이는 것에 비해 내음성이 강한 붓순나무는 광환경 변화에 따른 민감성이 낮게 나타나는 것을 알 수 있었다.
The effects of elevated atmospheric $CO_2$ on growth and photosynthesis of soybean (Glycine max Merr.) were investigated to predict its productivity under elevated $CO_2$ levels in the future. Soybean grown for 6 weeks showed significant increase in vegetative growth, based on plant height, leaf characteristics (area, length, and width), and the SPAD-502 chlorophyll meter value (SPAD value) under elevated $CO_2$ conditions ($800{\mu}mol/mol$) compared to ambient $CO_2$ conditions ($400{\mu}mol/mol$). Under elevated $CO_2$ conditions, the photosynthetic rate (A) increased although photosystem II (PS II) photochemical activity ($F_v/F_m$) decreased. The maximum photosynthetic rate ($A_{max}$) was higher under elevated $CO_2$ conditions than under ambient $CO_2$ conditions, whereas the maximum electron transport rate ($J_{max}$) was lower under elevated $CO_2$ conditions compared to ambient $CO_2$ conditions. The optimal temperature for photosynthesis shifted significantly by approximately $3^{\circ}C$ under the elevated $CO_2$ conditions. With the increase in temperature, the photosynthetic rate increased below the optimal temperature (approximately $30^{\circ}C$) and decreased above the optimal temperature, whereas the dark respiration rate ($R_d$) increased continuously regardless of the optimal temperature. The difference in photosynthetic rate between ambient and elevated $CO_2$ conditions was greatest near the optimal temperature. These results indicate that future increases in $CO_2$ will increase productivity by increasing the photosynthetic rate, although it may cause damage to the PS II reaction center as suggested by decreases in $F_v/F_m$, in soybean.
Forest-grown American ginseng (Panax quinquefolius L.) is exposed to daily and seasonal light variations. Our goal was to determine the effect of understory light changes on the maximum quantum yield of photosystem II, expressed as $F_v/F_m$, and photosynthetic pigment composition of two-year-old plants. Understory light photon flux density and sunfleck durations were characterized using hemispherical canopy photography. Our results showed that understory light significantly affected the $F_v/F_m$ of American ginseng, especially during the initial development of the plants when light levels were the highest, averaging 28 mol $m^{-2}d^{-1}$. Associated with low $F_v/F_m$ during its initial development, American ginseng had the lowest levels of epoxidation state of the xanthophyll cycle of the season, suggesting an active dissipation of excess light energy absorbed by the chlorophyll pigments. As photon flux density decreased after the deployment of the forest canopy to less than 10 mol $m^{-2}d^{-1}$, chlorophyll a/b decreased suggesting a greater investment in light harvesting pigments to reaction centers in order to absorb the fleeting light energy.
The response of Spirulina (Arthrospira) platensis to high salt stress was investigated by incubating the cells in light of moderate intensity in the presence of 0.8 M NaCl. NaCl caused a decrease in photosystem II (PSII) mediated oxygen evolution activity and increase in photosystem I (PSI) activity and the amount of P700. Similarly maximal efficiency of PSII (Fv/Fm) and variable fluorescence (Fv/Fo) were also declined in salt-stressed cells. Western blot analysis reveal that the inhibition in PSII activity is due to a 40% loss of a thylakoid membrane protein, known as D1, which is located in PSII reaction center. NaCl treatment of cells also resulted in the alterations of other thylakoid membrane proteins: most prominently, a dramatic diminishment of the 47-kDa chlorophyll protein (CP) and 94-kDa protein, and accumulation of a 17-kDa protein band were observed in SDS-PAGE. The changes in 47-kDa and 94-kDa proteins lead to the decreased energy transfer from light harvesting antenna to PSII, which was accompanied by alterations in the chlorophyll fluorescence emission spectra of whole cells and isolated thylakoids. Therefore we conclude that salt stress has various effects on photosynthetic electron transport activities due to the marked alterations in the composition of thylakoid membrane proteins.
Since chlorophyll a and bacteriochlorophyll a are asymmetric molecules, an external ligand can coordinate to the central Mg atom either from the chiorin macrocycle side where the C13$^2$-methoxycarbonyl moiety protrudes (denoting as the 'back' side) or frome the other side (the 'face' side). We investigated which side of the macrocycle is favored for the ligand coordination, by survey of the highly resolved crystal structures of various photosynthetic proteins and theoretical model calculations. It is found that chlorophyll a as well as bacteriochlorophyll a and b in the photosynthetic proteins mostly bind their ligands on the 'back' sides. This finding was confirmed by the theoretical calculations for methyl chlorophyllide a and methyl bacteriochlorophyllide a as models: the 'back' type ligand-(bacterio )chlorophyll complex was more stable than the 'face' type one. The calculations predicted influence of the Cl3$^2$-stereochemistry on the choice of the side of the ligand coordination, which is discussed in relation to the presence of the Cl3$^2$-epimer of chlorophyll a in photosystem I reaction center [I].
Photoinduced electron transport process in nature such as photoelectric conversion and long-range electron transfer in photosynthetic organisms are known to occur not only very efficiently but also unidirectionally through the functional groups of biomolecules. The basic principles in the development of new functional devices can be inspired from the biological systems such as molecular recognition, electron transfer chain, or photosynthetic reaction center. By mimicking the organization of the biological system, molecular electronic devices can be realized $artificially^{1)}$. The nano-fabrication technology of biomolecules was applied to the development of nano-protein chip for simultaneously analyzing many kinds of proteins as a rapid tool for proteome research. The results showed that the self-assembled protein layer had an influence on the sensitivity of the fabricated bio-surface to the target molecules, which would give us a way to fabricate the nano-protein chip with high sensitivity. The results implicate that the biosurface fabrication using self-assembled protein molecules could be successfully applied to the construction of nanoscale bio-photodiode and nano-protein chip based on electrical detection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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