ALA (5-aminolevulinic acid) has been proposed as a tetrapyrrole-dependent photodynamic herbicide by the action of the protoporphyrinogen IX oxidase (Protox IX). A study was conducted to determine photodynamic herbicidal effect of ALA on seedling growth of rice (Oryza sativa L.) and barnyard grass (Echinochloa crus-galli Beauv. var. oryzicola Ohwi) under dry and wet conditions. ALA effect on early plant growth of rice and barnyardgrass was greatly concentration dependant, suggesting that it promotes plant growth at very low concentration and inhibits at high concentration. No significant difference in herbicidal activity of biologically and synthetically produced ALAs on plant lengths of test plants was observed ALA exhibited significant photodynamic activity regardless of PSDIP and its duration. Significant shoot growth inhibition by ALA soaking treatment exhibited apparently, indicating that ALA absorbed through root system was translocated into shoot part of plants. ALA reduced plant heights of rice and barnyardgrass seedlings by 6% and 27%, respectively, showing more tolerant to ALA in rice under wet condition. Leaf thickness was reduced markedly by ALA with increasing of ALA concentration, due to mainly membrane destruction and severe loss of turgidity in mesophyll cells, although the epidermal was little affected. It was observed that photodynamic herbicidal activity of ALA applied by pre-and post-emergence application exhibited differently on plant species, and that the activity of ALA against susceptible plants was highly correlated with growing condition.
5-Aminolevulinic acid (ALA) can be used as a photodynamic herbicide / insecticide and also applied to photodynamic therapy for malignant skin tumor. In this study we developed recombinant E. coli system for the high productivity of ALA and for the on-line monitoring of fusion protein (EGFP::ALAS) by a fluorescence sensor.
The effect of Protox expression site on herbicidal resistance was investigated in wild-type and transgenic rice plants imposed by peroxidizing herbicide oxyfluorfen. The transgenic rice systems involved the plastidal expression of Arabidopsis protoporphyrinogen oxidase (Protox; AP line) and the dual expression of Myxococcus xanthus Protox in chloroplasts and mitochondria (TTS line). The oxyfluorfen-treated TTS4 line showed the lower levels of cellular leakage and malonyldialdehyde and the sustained capacity of 5-aminolevulinic acid synthesis, compared to the oxyfluorfen-treated AP and wild-type lines. During oxyfluorfen action, the TTS4 line had greater herbicide resistance than the AP1 line, indicating that the dual expression of M. xanthus Protox in chloroplasts and mitochondria prevented the accumulation of photodynamic protoporphyrin IX more effectively than the expression of Arabidopsis Protox only in chloroplasts. These results suggest that the ectopic expression of Protox in mitochondria greatly contributes to the herbicidal resistance in rice plants.
ALA is an intermediate in the tetrapyrrole biosynthesis pathway and has extensive applications as a biodegradable herbicide and insecticide as well as medical applications including photodynamic therapy of cancers. For the development of mass production process of ALA it is necessary to on-line monitor some metabolites such as glycine, succinate, LA and ALA. In this study, medium compositions and fermentation conditions were investigated for enhancement of ALA production by recombinant E. coli. A 2-dimensional fluorescence sensor was employed to monitor the bioprocess of ALA production. The monitored data is analyzed using principal component analysis, a powerful tool for multivariate statistical analysis.
ALA is an essential intermediate in the tetrapyrrole biosynthesis pathway and has applications as a biodegradable herbicide and insecticide as well as medical applications including photodynamic therapy of cancers. For the development of mass production process of ALA it is necessary to on-line monitor some metabolites such as glycine, succinate, LA and ALA. In this work, medium compositions, pH conditions, induction and addition of LA were investigated to increase the production of ALA by recombinant E. coli. A 2-dimensional fluorescence sensor was used to monitor the processe and the fluorescence spectra were correlated with on- and off-line data like ALAS, ALAD, cell mass etc.
ALA (5-aminolevulinic acid) has been proposed as a tetrapyrrole-dependent photodynamic herbicide and insecticide by the action of the protoporphyrinogen IX oxidase (Protox IX). The present study was conducted to determine growth responses of plant and insects to ALA, biodegradable biopesticidal substance. In the paddy condition experiment, plant height and shoot fresh weight of barnyardgrass (Echinochloa crus-galli) was more reduced by ALA than rice plants, even though both plant species show great phytotoxicity. Hairy crabgrass (Digitaria sanguinalis), a monocot weed, was more sensitive to ALA at 5mM under upland condition when ALA applied on the foliage, compared with soybean (Glycine max) as a dicot crop. ALA solutions were tested for their insecticidal and larvicidal activities against Spodaptera exigua (Hubner) and Tetranychus urticae Koch. by foliar application and leaf-dipping method. The result showed higher insecticidal activity of ALA at 10mM and its mixture with insecticide luferon against S. exigua. Strongest insecticidal activity against T. urticae was observed from the ALA solution at 10mM 72 days after application. This results show that ALA solution had potent herbicidal and insecticidal activities against agricultural pests even though their activities were lower than those of synthetic pesticides.
The mechanisms of resistance to oxyfluorfen (OF) and paraquat (PQ) were investigated in rice plants. Examination of the concentration dependence of oxyfluorfen- or paraquat-induced increase in conductivity showed that conductivities in the OF- and PQ-treated leaf squares were increased with 0.1 ${\mu}M$ oxyfluorfen and 0.01 ${\mu}M$ paraquat and further increased with higher concentrations. The levels of conductivity were approximately 10-times higher in the PQ-treated plants than in the OF-treated plants, indicating that the PQ-treated plants suffered more severe photodynamic damage than the OF-treated plants. The photooxidative stress caused by foliar application of either 50 ${\mu}M$ oxyfluorfen or 100 ${\mu}M$ paraquat increased the enzyme activities of ascorbate peroxidase and peroxidase 1 day after the herbicide treatments and then further increased their enzyme activities 2 days after the treatments. The activities of catalase began to increase 2 days after the oxyfluorfen and paraquat treatments. These antioxidant enzymes appear to play an essential part of defense mechanisms against oxyfluorfen and paraquat. Our results demonstrate that paraquat caused more severe oxidative stress, as indicated by a greater change in conductivity, thereby resulting in greater increases in antioxidant responses in plants, compared with those of oxyfluorfen.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.5
no.1
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pp.25-32
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1997
The effect of levulinic acid (LA) and biosynthetic precursors of ${\delta}$-aminolevulinic acid (ALA) on the production of extracellular ALA was examined for the cells of soil derived Rhodospirillum rubrum N-1 belonged to the genus Rhodospirillaceae. The extracellular yield of ALA was increased to 23 fold (45 mg/l) from the basal condition (Lascelles' medium without L-glutamate) by successive addition of LA at initial (10 mM) and mid-log stage (30 mM) of cell cultivation. In addition to initial/mid-log mutual supplementations of LA (10 mM/30 mM) and glutamate (30/30 mM), respectively, by means of alternative feeding 10 mM $C_4$-precursors at mid-log phase of culture the extracellular ALA content was reached to 75 mg/l (40 fold).
A photosynthetic bacterium strain KUP-74 producing high amount of S-amino-levulinic acid(ALA) was isolated from soils, which was identified as Rhodocyclus gelatinosus. After 10 days cultivation under anaerobic-light condition at $30^{\circ}C$, 4 Klux and pH 6.8, 5 mg/l of ALA was formed extracellularly. ALA productions were increased up to 8 mg/l and 12 mg/l in cell cultivations either by the addition of 0.5% glycerol (v/v) or 10 mM of glycine and succinic acid, respectively, using Lascelles basal medium eliminated L-glutamic acid. By cultivation in the presence of 30 mM each D,L-glutamic acids and D,L-glutamines the yield of ALA showing a late induction phenomenon was reached the maximum value of 21 mg/l. Different culture times were needed to generate maximum ALA yields by the addition of initial precursors of $C_4$ and $C_5$ pathways in basal medium, as being 107 h and 262 h, respectively. 40 mg/l yield of ALA was observed by cell cultivation with the basal medium containing each 10 mM levulinic acid(LA) and glycine simultaneously.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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