Kim, Se-Kwon;Lee, Baek-Seok;Lee, Jeong-Gun;Seo, Hyung-Joon;Kim, Eun-Ki
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제8권2호
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pp.147-150
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2003
Water toxicity monitoring based on the continuous cultivation of Photobacterium phorphoreum is presented. Normally, after 10 days of operation, a dark variant, which emits no light, appears and dominates the population, resulting in a rapid decrease in bioluminescence. Therefore, to overcome this problem, a fluidized-bed reactor is used in which alginate-immobilized cells are grown and leaking cells are continuously released into the effluent Experimental results revealed that the dominance of dark variants was suppressed inside the immobilized beads, thereby mitigating the rapid loss of bioluminescence. Plus, a high dilution rate (1.2 h$\^$-1/) prevented the occurrence of other microbial contamination in the reactor The concentration and bioluminescence of the released cells were sufficient to measure the water toxicity for more than 4 weeks.
This study assessed the contribution of heavy metals to total toxicity as well as the presence other toxic compounds before and after adding the chemical P to concurrently conducted bioassay tests of Daphnia magna and P. Phosphoreum. The following conclusions were drawn from this study : With excessive EDTA dosage, a toxicity reduction in Microtox would occur due to a metal-comples being formed. Microtox was far less sensitive than D. magna to heavy metal toxicity, but extended exposure time and reagent could increase the sensitivity.
For the demonstration of a novel riboflavin kinase assay method based on the bacterial bioluminescence, partially purified riboflavin kinase was prepared from bovine liver through ammonium sulfate precipitation and DEAE-cellulose ion exchange chromatography. Using bacterial luciferase from Photobacterium phosphoreum and the dithionite reduction method, and easy, safe, and fast assay method was established. The optimal temperature, pH, Km values form riboflavin and ATP of boving liver riboflavin kinase determined with this luminescence method were 35$^{\circ}C$, pH 7, 15.3${\mu}$M and 8.3.${\mu}$M, respectively. The detection limit of FMN produced by riboflavin kinase was in the range of 200 pM to 4${\mu}$M which is comparable to the HPLC-fluorescence detection method, while the detection time for each assay was less than 15 sec compared to the HPLC method which requeires at least 10 min for completion.
The conventional monitoring system for water pollution measurement is quite simple and independent and it has a lot of draw backs such as cost, installation, etc. So, in this paper, we have measured the water pollution system through a bacterial species, photobacterium phosphoreum. A novel integrated monitoring system technology has been developed which could easily dictate and analyze the major water pollutants and its surrounding environment in an accurate way. The system constitutes of bionic technology, information technology and environmental engineering technology. As a result, integrated monitoring system can observe the water pollution and various water environment of the whole country. Also, through the sensors of USN, Zigbee, RFID and middle ware, which can provide service and construct service platform, a properly standardized plan with remarkable service platform has been established through this investigation.
In an attempt to develop a method for rapid and accurate identification of six Vibrio species that are clinically important and most frequently detected in Korea, 16S rDNA restriction fragment length polymorphism (RFLP) of Vibrio type strains, as well as environmental isolates obtained from the Korean coastal area, was analyzed using ten restriction endonucleases. Digestion of the 16S rDNA fragments amplified by polymerase chain reaction (PCR) with the enzymes gave rise to 2~6 restriction patterns for each digestion for 47 Vibrio strains and isolates. An additional 2~3 restriction patterns were observed for five reference species, including Escherichia coli, Aeromonas hydrophila, A. salmonicida, Photobacterium phosphoreum, and Plesiomonas shigelloides. A genetic distance tree based on RFLP of the bacterial species correlated well with that based on 16S rDNA sequences. The very small 16S rDNA sequence difference (0.1%) between V. alginolyticus and V. parahaemolyticus was resolved clearly by RFLP with a genetic distance of more than 2%. RFLP variation within a species was also detected in the cases of V. parahaemolyticus, V. proteolyticus, and V. vulnificus. According to the RFLP analysis, six Vibrio and five reference species were assigned to 12 genotypes. Using three restriction endonucleases to analyze RFLP proved sufficient to identify the six pathogenic Vibrio species.
The purpose of this study is to propose a method of controlling freshwater algae which grows abundantly and forms water bloom in the eutrophic water body with $H_2O_2$. Both laboratory and field methodologies were used. For the laboratory test $H_2O_2$ was injected into the different growth phases of incubated Microcystis aeruginosa and the resulting algae growth control rate was examined. For the field test, $H_2O_2$ was dispersed into a lake. Lake water quality was evaluated using a pre-test and post-test analysis of chlorophyll-a, luminance, transmittance, etc., which allowed a comparative evaluation of water quality change. From the experimental results, the growth of algae can be controlled with the small amount of 1mg/L of $H_2O_2$ at the lag phase of growth. The field test results show that the green colour of lake water was removed completely by the reduction of chlorophyll-a and improved transmittance, luminance, TKN, TP, TOC and SS. These indicators of water quality were improved significantly after $H_2O_2$ injection. Toxicity test results using the lake fish show no evidence of detrimental effect of $H_2O_2$ up to 15mg/L. The results of $EC_{50}$ with P. phosphoreum show that the toxicity of $H_2O_2$ was negligible compared to copper which was commonly used for algae control.
Leachate from municipal solid waste (MSW) landfill, effluent from leachate treatment plant, and ground water sample from a monitoring well near landfill site were tested for an acute toxicity. Microtox toxicity test was used for testing the acute toxicity of leachate and other samples. EC$_{50}$ values which a concentration of pollutant for reducing 50% light output from luminescent bacteria, Photobacterium phosphoreum were determined to assess the toxicity of pollutants as well as the relative toxicity. In addition, characteristics of leachate were studied and compared to those of phenol and pentachlorophenol (PCP) which are typical aquatic toxic pollutants. For leachate, EC$_{50}$ for 30 min incubation was 10.8%, while for phenol and PCP, 46 ppm and 1.2 ppm, respectively. the relative toxicity of treated leachate by in situ aeration with activated sludge was reduced to more than 75% of toxicity of the untreated leachate. Microtox toxicity test was failed to figure out EC$_{50}$ values for groundwater from a monitoring well since the relative toxicity of the unconcentrated sample was too low to estimate EC$_{50}$. Addition of activated carbon to leachate was reduced the relative toxicity. The reduction Pattern of the relative toxicity of leachate by mechanical aeration was similar to that of PCP, but different from that of phenol. These findings suggest that the toxicity of leachate may come from PCP-like toxic compounds rather than phenol-like one. In conclusion, the process of aeration with activated sludge might be very important to reduce the environmental toxicity of leachate. And Microtox test could be a reasonable bioassay for screening and monitoring the environmental toxicity of leachate from municipal solid waste landfill as well as for determining the reduction efficiency of the leachate toxicity by various treatment processes in leachate treatment plant.
발광 박테리아인 Photobacterium species의 lux 오페론에서 발견된 riboflavin 생합성에 관여하는 유전자들(ribI,II,III,IV)의 기능을 조사하였다. 대장균에서 이들 유전자가 포함된 재조합 플라스미드를 발현시켰을 때 상당량의riboflavin이 합성되는 것을 확인하였으며, 또한 이들 유전자들(ribI,II,III,IV)의 기능을 riboflavin에 대하여 종속 영양체인 대장균 돌연변이주(BSV 11,18)를 이용한 유전학적인 방법과 생화학적 방법으로 분석한 결과, 이들은 각각 riboflavin synthase, 3,4-dihydroxy-2-butanone 4-phosphate (DHBP) synthase, lumazine synthase, GTP cyclohydrolase II활성도를 갖는 단백질을 코드하는 것으로 밝혀졌다. 이는Photobacterium species의 riboflavin 유전자 체계가 riboflavin 생합성에 관여하는 모든 5개의 유전자들이 한 오페론에 존재하는 Bacillus subtilis와 주요 riboflavin 유전자들이 분리되어 있는 대장균과는 다른, 중간적인 형태를 갖는다는 것을 나타낸다.
Photobacterium sp. YW2207 was isolated from rainbow trout raised in a fish farm located in Yeongwol-gun, Gangwon Province, South Korea. Based on 16S rRNA sequence analysis and phylogenetic analysis, it was confirmed that Photobacterium sp. YW2207 showed 100% similarity with Photobacterium piscicola and Photobacterium phosphoreum, and 94.6% similarity with P. damselae subsp. damselae. Biochemical analysis revealed that Photobacterium sp. YW2207 is a Gram-negative, motile bacterium with a cell size of 1.5~3×3~5 ㎛. The bacteria were cultured on nutrient agar, brain heart infusion agar, Muller-Hinton agar, tryptic soy agar, and thiosulfate citrate bile sucrose agar with NaCl concentrations ranging from 0 to 2.5%. The API50CHE and API20E tests indicated lower utilization capabilities compared to the P. damselae strains provided in the API database. Furthermore, unlike most Photobacterium species, Photobacterium sp. YW2207 presented negative for catalase test. Results from the flow cytometric measurement indicated that Photobacterium sp. YW2207 exhibited a more diverse distribution of cell sizes and had larger cell sizes compared with P. damselae subsp. damselae. Minimum inhibitory concentration tests showed that Photobacterium sp. YW2207 had low susceptibility to β-Lactam and aminoglycoside antibiotics, while having high susceptibility to tetracycline, doxycycline, and quinolone antibiotics. Pathogenicity on rainbow trout revealed that an immersion of 1×105 CFU/ml did not cause mortality or clinical symptoms.
굴 자숙액 중에 함유되어 있는 정미성분, 당 단백질 동의 유용성분을 이용하고자 자숙액 중에 함유되어 있는 다량의 염을 제거하기 위하여 전기투석에 의한 최적의 탈염조건을 구명하였다. 자숙액 중의 건조중량에 대한 당과 단백질의 함량은 각각 71.25%와 25.05%였으며, 염의 농도와 pH는 각각 10.81%와 5.62였으며, 핵산관련물질 중 정미성분인 IMP의 함량은 $2.15\mu$mole/g이었다. 전기투석에 의한 자숙액의 탈염에 필요한 이온교환막은 분자량 100 Da 이상을 회수할 수 있는 AC-110-400과 300 Da 이상을 회수할 수 있는 AC-220-400을 상호 비교한 결과, 탈염율과 탈염시간의 차이는 거의 없었으며, 당과 단백질의 유실량이 적은 AC-110-400을 사용하는 것이 보다 효율적인 것으로 나타났다. 자숙액의 탈염에 영향을 주는 인자들 중에서 자숙액의 농도는 1% (w/v) 용액에서 탈염시간은 60분이었으며, 농도가 증가함에 따라 탈염시간은 길어졌다. 자숙액의 염농도는 탈염초기에 급격하게 감소하였고, 8% (w/v) 용액에서 240분에서 96%까지 탈염되었다. pH에 따른 자숙액의 탈염은 탈염초기에 거의 비슷한 경향으로 탈염이 진행되었지만, 최종 탈염율에서는 pH 9.0의 알칼리영역보다 pH 4.0의 산성영역에서 탈염율이 높았다. 또한, 자숙액의 부피에 대한 탈염율은 부피가 증가할수록 탈염에 소요되는 시간은 길어졌으며, 투과액의 부피와 종류는 자숙액의 최종 탈염시간 및 탈염율에 거의 영향을 주지 않았다. 자숙액의 탈염은 주로 자숙액의 농도와 pH에 의해 크게 영향을 받았으며, 5%의 자숙액 $1\ell$, pH 5.62에서 전기투석기를 사용하여 효율적인 탈염이 가능하였다.R^2$)가 0.911~0.990 으로 높게 산출되었다. 따라서 1.0%(w/v) CMC 담체가 P. phosphoreum의 biolumincsene에 안정성을 주었으며, 독성물질에 가장 민감하다는 것을 알 수 있었다.후 100.0%로서 안정성이 매우 높았다.ham)이 노화군(Ovx)에 비해 1.22배 정도 높게 나타났고, 각 비타민 투여군 중 Ovx+Vit Erns의 경우 간 조직 중 총 glutathionfid이 가장 높게 나타났다. 간조직 중 reduced-glutathion (GSH)함량과 총 glutathion 량에 대한 oxidized-glutathion (GSSG)의 비율, 또한 Ovx+Vit E 군의 수치가 가장 높게 나 타났다. Vit E가 항산화에 좋은 효과가 있음을 알 수 있었다. 그러나, GPx의 활성 수치는 그 다지 유의 한 변화를 나타내지는 않았다.sed for dragon robe , depending on the number of claws on the dragons. Those with five-clawed dragons were called lung-p'ao, while those with four-clawed dragons were called mang-p'ao(망포). The Court felt compelled to take corrective meausres. It decreeed that Ninisters of State and other officials, who had been bestowed five-clawed lung dragons, must take out one claw. Finally, the sale of ranks and the attendant privilege of
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[게시일 2004년 10월 1일]
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