This study was designed to estimate the ability of squalene treated mice to eliminate systemically infected bacteria and fungi and to elucidate the mechanism. As a result of measuring the ability to remove systemically infected bacteria and fungi, The ability of mice to remove the organism was found to increase in squalene treated mice when compared with control mice. And also the ability of phagocytic cells to produce Reactive Oxygen Intermediate(R.O.I.) increased in squalene treated mice. When the NADPH oxidase activity that make R.O.I. produce was measured, the activity increased in squalene treated mice, too. Therefore the good clearance of live organism in squalene treated mice is likely to relate to phagocytic cell activation. The activation of phagocytic cells might be mediated via the increased production of R.O.I. due to the increase of NADPH oxidase activity.
1,2-benzopyrone can stimulate macrophages to increase the ability of phagocytosis. Peripheral blood polymorphonuclear cells (PMN) and macrophages destroy microbial organisms with reactive oxygen species (ROS), called oxidative burst activity (OBA). This study was undertaken to determine whether 1,2-benzopyrone affects the OBA on the phagocytic response of canine peripheral blood phagocytes. The OBA of phagocytes in the addition or absence of latex beads was analyzed by flow cytometry system using dihydrorhodamine 123 (DHR). The direct treatments of 1,2-benzopyrone have no effect on the OBA of peripheral blood mononuclear cells (PBMC), PMN and monocyte-rich cells regardless of addition of latex beads. When latex beads are added to PMN, the OBA of PMN was remarkably enhanced by culture supernatant from PBMC but not PMN treated with 1,2-benzopyrone. Similary, it was also enhanced by human recombinant (hr) $TNF-\alpha.$ However, when latex beads were not added to PMN, its OBA was not enhanced by culture supernatant from either PBMC or PMN treated with 1,2-benzopyrone. The OBA of latex beads-phagocytized PBMC and monocyte-rich cells was not enhanced by culture supernatant from either PBMC or PMN treated with 1,2-benzopyrone. These results strongly suggested that 1,2-benzopyrone has an immunoenhancing effect on the OBA of PMN when phagocytic response occurred only. This enhanced OBA may be mediated through active humoral substance(s), such as $TNF-\alpha,$ produced by PBMC stimulated with 1,2-benzopyrone.
본 연구에서는 새싹보리 추출물과 솔잎 추출물이 치아우식원인균인 S. mutans에 미치는 항균 및 탐식작용 조절 효과를 알아보고자 하였다. 국내산 새싹보리가루와 솔잎가루의 에탄올 추출물을 이용하며 추출물의 농도에 따른 S. mutans에 대한 항균효과와 탐식작용조절 효과를 확인하였다. 그 결과 S. mutans 집락형성은 새싹보리 추출물에서는 유의적 차이가 나타내지 않았으나, 솔잎 추출물에서는 유의적으로 감소하였다. THP-1 세포의 S. mutans에 대한 탐식작용을 확인한 결과, 새싹보리 추출물에서는 유의적인 차이를 나타내지 않았으나, 솔잎 추출물에서는 면역세포의 탐식작용이 향상되었다. 따라서 솔잎 추출물은 치아우식예방을 위한 소재로 사용될 수 있음을 시사한다.
개 말초혈액 다형핵 백혈구(PMNs)의 탐식능력과 순간산소과소비력 (OBA) 에 대한 fucoidan의 효과를 검토하였다. Fucoidan 그 자체는 PMNs의 탐식능력과 OBA에 직접적인 효과를 보이지 않았다. 그러나 fucoidan으로 배양한 PBMCs의 배양상층액은 PMNs의 탐식능력과 OBA를 농도의존적으로 증가시켰다. 또한, TNF-${\alpha}$에 의한 PMNs의 탐식능력과 OBA의 측정 결과도 fucoidan으로 배양한 PBMCs 배양상층액의 그것과 유사하였다. 이러한 탐식능력과 OBA의 활성은 anti-TNF-${\alpha}$ pAb를 처리했을 때 억제되었다. PBMCs 배양 상층액 속의 TNF-${\alpha}$의 양을 정량한 결과 대조군에 비해 증가되었으며, PBMCs의 TNF-${\alpha}$ mRNA 발현 정도도 fucoidan을 첨가한 경우 증가되었다. 이상의 결과로부터, fucoidan은 개 말초혈액 PMNs의 탐식능력과 OBA에 대하여 면역자극 작용을 가지고 있으며, 이것은 fucoidan의 자극에 의해 PBMCs에서 생산되어 분비되는 가용성 물질인 TNF-${\alpha}$에 의해 나타나는 것으로 사료되었다.
Background: Ginsenoside Rb1, a triterpene saponin, is derived from the Panax ginseng root and has potent antiinflammatory activity. In this study, we determined if Rb1 can increase macrophage phagocytosis and elucidated the underlying mechanisms. Methods: To measure macrophage phagocytosis, mouse peritoneal macrophages or RAW 264.7 cells were cultured with fluorescein isothiocyanate-conjugated Escherichia coli, and the phagocytic index was determined by flow cytometry. Western blot analyses were performed. Results: Ginsenoside Rb1 increased macrophage phagocytosis and phosphorylation of p38 mitogenactivated protein kinase (MAPK), but inhibition of p38 MAPK activity with SB203580 decreased the phagocytic ability of macrophages. Rb1 also increased Akt phosphorylation, which was suppressed by LY294002, a phosphoinositide 3-kinase inhibitor. Rb1-induced Akt phosphorylation was inhibited by SB203580, (5Z)-7-oxozeaenol, and small-interfering RNA (siRNA)-mediated knockdown of $p38{\alpha}$ MAPK in macrophages. However, Rb1-induced p38 MAPK phosphorylation was not blocked by LY294002 or siRNA-mediated knockdown of Akt. The inhibition of Akt activation with siRNA or LY294002 also inhibited the Rb1-induced increase in phagocytosis. Rb1 increased macrophage phagocytosis of IgG-opsonized beads but not unopsonized beads. The phosphorylation of p21 activated kinase 1/2 and actin polymerization induced by IgG-opsonized beads and Rb1 were inhibited by SB203580 and LY294002. Intraperitoneal injection of Rb1 increased phosphorylation of p38 MAPK and Akt and the phagocytosis of bacteria in bronchoalveolar cells. Conclusion: These results suggest that ginsenoside Rb1 enhances the phagocytic capacity of macrophages for bacteria via activation of the p38/Akt pathway. Rb1 may be a useful pharmacological adjuvant for the treatment of bacterial infections in clinically relevant conditions.
Ovotransferrin (OTF), an egg protein known as transferrin family protein, possess strong antimicrobial and antioxidant activity. This is because OTF has two iron binding sites, so it has a strong metal chelating ability. The present study aimed to evaluate the improved immune-enhancing activities of OTF hydrolysates produced using bromelain, pancreatin, and papain. The effects of OTF hydrolysates on the production and secretion of pro-inflammatory mediators in RAW 264.7 macrophages were confirmed. The production of nitric oxide (NO) was evaluated using Griess reagent and the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) were evaluated using quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR). And the production of pro-inflammatory cytokines (tumor necrosis factor [TNF]-α and interleukin [IL]-6) and the phagocytic activity of macrophages were evaluated using an ELISA assay and neutral red uptake assay, respectively. All OTF hydrolysates enhanced NO production by increasing iNOS mRNA expression. Treating RAW 264.7 macrophages with OTF hydrolysates increased the production of pro-inflammatory cytokines and the phagocytic activity. The production of NO and pro-inflammatory cytokines induced by OTF hydrolysates was inhibited by the addition of specific mitogen-activated protein kinase (MAPK) inhibitors. In conclusion, results indicated that all OTF hydrolysates activated RAW 264.7 macrophages by activating MAPK signaling pathway.
Mutua, Mbuvi P.;Steinaa, Lucilla;Shadrack, Muya M.;Muita, Gicheru M.
Journal of Animal Science and Technology
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제57권11호
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pp.40.1-40.7
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2015
Background: Activation of peroxisome proliferator activated receptor gamma ($PPAR{\gamma}$) in the alveolar macrophages (AM) by selective synthetic $PPAR{\gamma}$ ligands, improves the ability of the cells to resolve inflammation. In birds, respiratory macrophages are known as free avian respiratory macrophages (FARM) and show distinct functional differences from AM. The effects of treating FARM with $PPAR{\gamma}$ ligands are unclear. Methods: FARM were harvested by lavage of chicken respiratory tract and their morphology assessed at microscopic level. The effects of $PPAR{\gamma}$ agonists on the FARM in vitro viability, phagocytic capacity and proinflammatory cytokine (TNF-${\alpha}$) production were assessed. Results: FARM had eccentric nucleus and plasma membrane ruffled with filopodial extensions. Ultrastructurally, numerous vesicular bodies presumed to be lysosomes were present. FARM treated with troglitazone, a selective $PPAR{\gamma}$ agonist, had similar in vitro viability with untreated FARM. However, treated FARM co-cultured with polystyrene particles, internalized more particles with a mean volume density of 41 % compared to that of untreated FARM of 21 %. Further, treated FARM significantly decreased LPS-induced TNF-${\alpha}$ production in a dose dependent manner. Conclusion: Results from this study show that $PPAR{\gamma}$ synthetic ligands enhance phagocytic ability of FARM. Further the ligands attenuate production of proinflammatory cytokines in the FARM, suggesting potential therapeutic application of $PPAR{\gamma}$ ligands in the management of respiratory inflammatory disorders in the poultry industry.
Background: The effects of the dietary administration of two heat-inactivated whole bacteria from the Vibrionaceae family, singly or combined, on innate immune response of the rainbow trout were studied. The two bacteria (Pdp11 and 51M6), which were obtained from the skin of rainbow trout, showed in vitro characteristics that suggested they could be considered as potential fish probiotics. Methods: The fish were fed four different diets: control (non-supplemented), or diets supplemented with heat-inactivated bacteria at $10^8$ cfu/g Pdp11, $10^8$ cfu/g 51M6 or with $0.5{\times}10^8$ cfu/g Pdp11 plus $0.5{\times}10^8$ cfu/g 51M6 for 4 weeks. Six fish were sampled at weeks 1, 2, 3 and 4, and then the main humoral (natural haemolytic complement activity and serum peroxidase content) and cellular innate immune responses (leucocyte peroxidase content, phagocytosis, respiratory burst and cytotoxicity) were evaluated. Results: The serum peroxidase content and the natural haemolytic complement activity increased with time, reaching the highest values in the third and fourth weeks of feeding, respectively. The phagocytic ability of specimens fed the mixture of the two inactivated bacteria was significantly higher than in the controls after 2 and 3 weeks of treatment. The same activity increased significantly in rainbow trout fed the Pdp11 diet for 2 weeks or the 51M6 diet for 3 weeks. Respiratory burst activity was unaffected by all the experimental diets at all times assayed. Cytotoxic activity had significantly increased after 3 weeks in fish fed the 51M6 diet. Conclusion: Our results demonstrated the usefulness of incorporating inactivated probiotic bacteria into fish diets.
Since conflicting results have been reported on non-specific immune response in type 1 diabetes, this study evaluates polymorphonuclear neutrophil (PMN) functions in the infection free Long Evan diabetic rats (type 1) by using tests that include: polarization assay, phagocytosis of baker's yeasts (Saccharomyces cerevisiae) and nitroblue tetrazolium (NBT) dye reduction. Polarization assay showed that neutrophils from diabetic rats were significantly activated at the basal level compared to those from the controls (p < 0.001). After PMN activation with N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine (FMLP), control neutrophils were found to be more polarized than those of the diabetic neutrophils and the highest proportions of polarization were found to be 67% and 57% at $10^{-7}\;M$ FMLP, respectively. In the resting state, neutrophils from the diabetic rats reduced significantly more NBT dye than that of the controls (p < 0.001). The percentages of phagocytosis of opsonized yeast cells by the neutrophils from control and diabetic rats were 87% and 61%, respectively and the difference was statistically significant (p < 0.001). Evaluation of the phagocytic efficiency of PMNs revealed that control neutrophils could phagocytose $381{\pm}17$ whereas those from the diabetic rats phagocytosed $282{\pm}16$ yeast cells, and the efficiency of phagocytosis varied significantly (p < 0.001). Further, both the percentages of phagocytosis and the efficiency of phagocytosis by the diabetic neutrophils were inversely related with the levels of their corresponding plasma glucose (p = 0.02; r = -0.498 and p < 0.05; r = -0.43, respectively), which indicated that increased plasma glucose reduced the phagocytic ability of neutrophils. Such relationship was not observed with the control neutrophils. These data clearly indicate that PMN functions are altered in the streptozotocin (STZ) - induced diabetic rats, and hyperglycemia may be the cause for the impairment of their functions leading to many infectious episodes.
Background: Dendritic cells (DCs) playa critical role not only in the initiation of immune responses, but also in the induction of immune tolerance. In an effort to regulate immune responses through the modulation of antigen presenting cell (APC) function of DCs, we searched for and characterized APC function modulators from natural products. Methods: DCs were cultured in the presence of propolis components, WP and CP, and then examined for their ability to present exogenous antigen in association with major histocompatibility complexes (MHC). Results: WP and CP inhibited class I MHC-restricted presentation of exogenous antigen (cross-presentation) in a DC cell line, DC2.4 cells, and DCs generated from bone marrow cells with GM-CSF and IL-4. The inhibitory activity of WP and CP appeared to be due not only to inhibition of phagocytic activity of DCs, but also to suppression of expression of MHC molecules on DCs. We also examined the effects of WP and CP on T cells. Interestingly, WP and CP increased IL-2 production from T cells. Conclusion: These results demonstrate that WP and CP inhibit MHC-restricted presentation of exogenous antigen through down-regulation of phagocytic activity and suppression of expression of MHC molecules on DCs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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