A yellow stripe and bud benting disease of soybean was commonly observed on the field at Suweon area. The causal agent was identified as alfalfa mosaic virus (AMV) by indicator plant reactions, physical properties, serological test and electron microscopy. AMV produced vein clearing, top necrosis, top bent and mottling on the parts of soybean plants. Local lesions were produced on the inoculated leaves of Vigna sesquipedialis, Vicia faba and Tetragonia expansa, while Chenopodium am, anticolor, C. quinoa, Pisum satvium, Petunia hybrida and Nicotiana tabacum 'Bright yellow' were systemically infected. The thermal inactivation point was $60^{\circ}C$, dilution end point was $10^{-3}$, and longevity in vitro was 2 days at room temperature. AMV from soybean was reacted with AMV - antiserum in agar gel diffusion test. Electron microscopy of AMV from soybean exhibited bacilliform particles of 60nm in length.
Bradyrhizobium japonicum spheroplasts were prepared by culturing cells in the presence of glycine, follwed by treatment with lysozyme. The cells were examined by electron microscopy during the formation of spheroplast. Then Ti plasmid from Agrobacterium tumefaciens 15955 was introduced into Bradyrhizobium japonicum by glycine-lysozyme induced spheroplast transformation. After cell wall regeneration, transformants were selected by the ability of utilization of octopine. Transformation were received at a frequency of $1{\times}10^{-7}$. The transformants obtained from spheroplast transformation harbored the introduced Ti plasmid, which was identified by agarose gel electrophoresis. Furthermore, the differences in their gene products were observed between the transformant and the recipient cell by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis. The transformants which still possessed the same ability nodulate soybean (Glycine max.) as that of the original host strain, acquired the ability to induce tumor on Petunia hybrida like Agrobacterium, but formed the small crown galls in size compared to those of Agrobacterium tumefaciens.
Cucurbits including pumpkin (Cucurbita pepo), gourd (Lagenariaa siceraria), cucumber (Cucumis sativus), melon(Cucumis melo) and watermelon(Cucurbita anguria) were diseased with mosaic symptoms. The causal virus was identified as watermelon mosaic virus(WMV). The WMV was transmitted by Myzus persicae Sulzer, and no seed borne virus was found. The virus caused large local lesions on the inoculated leaves of the Chenopodium amaranticolor and mosaic symptom on the upper leaves of Cucumis melo, Cucumis sativus, Lagenaria siceraria, Cucurbita anguria and Cucurbita pepo. There were no symptoms on the inoculated leaves of the Nicotiana tabacum var. Bright yellow, Nicotiana glutinosa, Vigna unguiculata. Petunia hybrida and Datura stramonium. Thermal inactivation point was $55\~65^{\circ}C$, dilution end point was $10^{-4}\;10^{-5}$ and longevity in vitro of the virus was $7\~8$ days. The virus showed positive reaction against watermelon mosaic virus antiserum in microprecipitin tests. The virus particles were flexuous rods in size of 750 nm.
In this study, we have isolated a rice (Oryza sativa L.) glutamate decarboxylase (RicGAD) clone from a root cDNA library, using a partial Arabidopsis thaliana GAD gene as a probe. The rice root cDNA library was constructed with mRNA, which had been derived from the roots of rice seedlings subjected to phosphorus deprivation. Nucleotide sequence analysis indicated that the RicGAD clone was 1,712 bp long, and harbors a complete open reading frame of 505 amino acids. The 505 amino acid sequence deduced from this RicGAD clone exhibited 67.7% and 61.9% identity with OsGAD1 (AB056060) and OsGAD2 (AB056061) in the database, respectively. The 505 amino acid sequence also exhibited 62.9, 64.1, and 64.2% identity to Arabidopsis GAD (U9937), Nicotiana tabacum GAD (AF020425), and Petunia hybrida GAD (L16797), respectively. The RicGAD was found to possess a highly conserved tryptophan residue, but lacks the lysine cluster at the C-proximal position, as well as other stretches of positively charged residues. The GAD sequence was expressed heterologously using the high copy number plasmid, pVUCH. Our activation analysis revealed that the maximal activation of the RicGAD occurred in the presence of both $Ca^{2+}$ and calmodulin. The GAD-encoded 56~58 kDa protein was identified via Western blot analysis, using an anti-GAD monoclonal antibody. The results of our RT-PCR analyses revealed that RicGAD is expressed predominantly in rice roots obtained from rice seedlings grown under phosphorus deprivation conditions, and in non-germinated brown rice, which is known to have a limited phosphorus bioavailability. These results indicate that RicGAD is a $Ca^{2+}$/calmodulin-dependent enzyme, and that RicGAD is expressed primarily under phosphate deprivation conditions.
The mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascade is one of the major and evolutionally conserved signaling pathways and plays pivotal role in the regulation of stress and developmental signals in plants. Here, a novel gene, termed Gossypium hirsutum MAPK (GhMAPK), was isolated from cotton. The full-length cDNA of GhMAPK encodes for a 372 amino acid protein that contains all 11 of the MAPK conserved subdomains and the phosphorylationactivation motif, TEY. Amino acid sequence alignment revealed that GhMAPK shared high identity with group-C MAPK in plants and showed 83~89% similarities with MAPKs from Arabidopsis, apricot, pea, petunia, and tobacco. Southern blot analysis indicated that the GhMAPK belonged to a multygene family in cotton. Two introns were found within the region of genomic sequence. Northern blot analysis revealed that the transcripts of GhMAPK accumulated markedly when the cotton seedlings were subjected to various abiotic stimuli such as wounding, cold (4$^{\circ}C$), or salinity stress; Furthermore, GhMAPK was upregulated by the exogenous signaling molecules, such as salicylic acid (SA) and hydrogen peroxide ($H_2O_2C$), as well as pathogen attacks. These results indicate that the GhMAPK, which has a high degree of identity with group-C plant MAPKs, may also play an important role in response to environmental stresses.
This study aimed to develop carnation cultivars with new coloring system. We used four genes of Petunia hybrida - chalcone synthase (CHS), flavanone 3-hydroxylase (FHT), dihydroflavonol 4-reductase (DFR), and anthocyanidin synthase (ANS) - as probes, in order to isolate four genes from carnations (Dianthus Caryophyllus). The isolated genes were used as probes in order to select mutants out of collected carnations, using Northern blot analysis. The Northern blot analysis revealed 10 DFR mutants - Gumbyul, Eunbyul, Ballatyne, Crystal, Eugenia, Koreno, Imp. White Sim, West Crystal, White Alpine, and White Charotte. Six among the selected 10 cultivarswere excluded from the target cultivars, because Eugenia, Imp. White Sim, and White Alpine were proved to be double mutants of DFR and ANS, Koreno was considered to be a double mutant of DFR and CHS, and Gumbyul and Ballatyne were proved to be double mutants of DFR and CHI (Chalcone isomerase). Consequently, we selected five DFR mutants, including Virginie, which was already selected as a DFR mutant. Finally, we measured DFR activities in order to confirm the selection, and the results showed that all of the five cultivars - Eunbyul, Crystal, West Crystal, White Charotte, and Virginie - had got no DFR activity.
Kim, Mi-Kyeong;Jeong, Rae-Dong;Kwak, Hae-Ryun;Lee, Su-Heon;Kim, Jeong-Soo;Kim, Kook-Hyung;Cha, Byeongjin;Choi, Hong-Soo
The Plant Pathology Journal
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v.30
no.2
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pp.200-207
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2014
A viral disease causing severe mosaic, necrotic, and yellow symptoms on Vigna angularis var. nipponensis was prevalent around Suwon area in Korea. The causal virus was characterized as Cucumber mosaic virus (CMV) on the basis of biological and nucleotide sequence properties of RNAs 1, 2 and 3 and named as CMV-wVa. CMV-wVa isolate caused mosaic symptoms on indicator plants, Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc, Petunia hybrida, and Cucumis sativus. Strikingly, CMV-wVa induced severe mosaic and malformation on Cucurbita pepo, and Solanum lycopersicum. Moreover, it caused necrotic or mosaic symptoms on V. angularis and V. radiate of Fabaceae. Symptoms of necrotic local or pin point were observed on inoculated leaves of V. unguiculata, Vicia fava, Pisum sativum and Phaseolus vulgaris. However, CMV-wVa isolate failed to infect in Glycine max cvs. 'Sorok', 'Sodam' and 'Somyeong'. To assess genetic variation between CMV-wVa and the other known CMV isolates, phylogenetic analysis using 16 complete nucleotide sequences of CMV RNA1, RNA2, and RNA3 including CMV-wVa was performed. CMV-wVa was more closely related to CMV isolates belonging to CMV subgroup I showing about 85.1-100% nucleotide sequences identity to those of subgroup I isolates. This is the first report of CMV as the causal virus infecting wild Vigna angularis var. nipponensis in Korea.
Dihydroflavonol 4-reductase (DFR) is a key enzyme of the flavonoid biosynthesis pathway which catalyses the NADPH-dependent reduction of 2R,3R-trans-dihydroflavonols to leucoanthocyanidins. In this study we describe cloning and expression of the genes encoding the flavonoid-biosynthetic enzyme DFR in Gypsophila paniculata L. Inspection of the 1279 bp long sequence revealed an open reading frame 1063 bp, including a 36 bp 5' leader region and 181 bp 3' untranslated region. Comparison of the coding region of this DFR cDNA sequence including the sequences of Arabidopsis thaliana, Citrus sinensis, Dianthus caryophyllus, Ipomoea batatas, Matthiola incana, Nierembergia sp, Petunia hybrida, Solanum tuberosum, Vitis vinifera reveals an identity higher than 69% at the nucleotide level. The function of this nucleotide sequences was verified by comparison with amino acid sequences of the amino-terminus and tryptic peptides from purified plant enzyme, by northern blotting with mRNA from wild type and mutant plants, by in vitro expression yielding and enzymatically active reductase, as indicated by the small leucopelargonidin peak. Genomic southern blot analysis showed the presence of only one gene for DFR in Gypsophila paniculata.
Tomato russet mite, Aculops lycopersici Massee (Acari. Eriophyidae) was recorded in Korea and their SEM observations, distribution, host range, development on different temperature, and chemical control method were studied. Tomato russet mite is a microscopic animal (134.9 $\mu\textrm{m}$) with 2 pairs of legs which had 4 rays of feathered craw. Infected leaf turn reddish brown, stem loss hair, become shiny or surface cross-cracked, and shoot wilted or shrunk. Surface of fruit around fruit stalk appeared rusted or cross-cracked. It was found in glass greenhouse at Buyeo and Yuseong in Chungnam Province, Pyeongchang in Gangwon Province, and Chilgok and Guryongpo in Gyeongbuk Province. Convolvulus, black nightshade, chinese lanternplant, eggp1ant, morning glory, petunia, potato, pepper, tobacco and tomato were confirmed as a host plant in inoculation test. It could develop at temperature around $15-30^{\circ}C$, it took 6-11 days from eggs to adult, higher temperature shorten its life cycle. Female lived longer than male and it lived as long as 12 days at 25-28"C. Among acaricides tested, fenazaquin and cypermethrin were most effective.tive.
Lee, Su Young;Cheon, Kyeong-Seong;Kim, So Young;Kwon, O Hyeon;Lee, Hye Jin;Kim, Won Hee;Yoo, Bong Sik
Horticultural Science & Technology
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v.34
no.1
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pp.154-162
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2016
The aim of this study was to develop a transgenic petunia with enhanced resistance to sulfur dioxide ($SO_2$) gas by stacking two genes, SOD2 and NDPK2, which are both known to confer resistance to abiotic stresses. The first-generation hybrids ($TF_1$) were obtained through reciprocal crosses between an SOD2-transgenic line SOD2-2-1-1-35($T_4$)[S($T_4$)] and an NDPK2-transgenic line NDPK2-7-1($T_2$)[N7-1($T_2$)]. Approximately 32.1-73.0% of the first-generation hybrids ($TF_1$) carried both SOD2 and NDPK2 genes. These hybrids showed 2.6 and 5.1 times less damage than hybrids carrying only SOD2 or NDPK2 genes, respectively, when they were treated with $SO_2$ gas at 30 ppm. This confirmed that the heterozygous hybrids were more resistant to $SO_2$ than the hybrids carrying either one of the resistance genes. Second-generation hybrids ($TF_2$) were obtained by selfing the $TF_1$ individuals. We confirmed the expression of the stacked genes in the $TF_2$ hybrids by phenotypic observation of their response to $SO_2$ gas at 30 ppm as well as using RT-qPCR and photosynthetic efficiency.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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