The peripheral neutrophil recovery test was conducted to determine the efficacy of CJ-50001, a drug developed in Cheil Jedang R&D center as a recombinant granulocyte-colony stimulating factor (rG-CSF). Grasin was used as control drug. CJ-50001 and Gratin were subcutaneously administered to ${\gamma}$-ray irradiated mice for 21 days at a dose of 10$\mu$g/kg after bone marrow transplantation and the recovery of neutrophil number was examined on the days of 9, 13, 17, and 21 after the drug administration. It was observed that the peripheral neutrophil number of the vehicle control group was recovered to the normal level on the day of 13 after the transplantation whereas the group administered with CJ-50001 and Grasin respectively, showed the normal level of peripheral neutrophil number on 9th day after the bone marrow transplantation. The number of peripheral neutrophils reached the highest level on the 21 st day of drug administration, and was recovered to the normal level on the 4th day after ceasing of the drug administration (on the 25th day of the transplantation). Thus, it was presumed that CJ-50001 showed efficacy similar to Grasin on the peripheral neutrophil recovery after bone marrow transplantation.
CJ-50001 is a recombinant granulocyte-colony stimulating factor (rG-CSF) developed by Cheil Jedang R&D Center. The effects of CJ-50001 on the increase of peripheral neutrophil count following intravenous and subcutaneous single administration at a dose of 20$\mu$g/kg in normal ICR mice and SD rats, respectively, were compared with those of Grasin, a control drug. Both CJ-50001 and Grasin significantly increased the peripheral neutrophil number in four treatment groups and the maximum number of neutrophil was achieved at 12 to 18 h in rats and mice, respectively. The dose dependency test was studied for CJ-50001 only in normal mice by intravenous or subcutaneous administration. When administered i.v or s.c at the various doses in normal mice, CJ-50001 significantly increased the neutrophil number over the dose of 160 ng/kg, compared with the vehicle control group. From these results, it was concluded that CJ-50001 showed efficacy similar to Grasin in the peripheral neutrophil count increase.
Administration of 3 type KGCs [recombinant human granulocyte colony-stimulating factor (rhG-CSF)] to mice with cyclophosphamide (CPA)-induced neutropenia for 4 consecutive days from the day after the CPA dosing (100 mg/kg) resulted in a dose dependent increase in the peripheral blood neutrophil count 6 hours after the final KGC injection. Within the KGC dose range of 0.1 to 40$\mu$g Per mouse Per day, there was a sigmoidal relationship between the logarithm of the dose and the peripheral blood neutrophil count (relative value for neutrophil count of the basal dose) in the treated mice. The sigmoidal relationship of test KGC preparations shows that there is a saturation point in terms of efficacy. Compared with e(fact of KGC-Orange, Green, and Blue, KGC-Orange recovers neutrophils more effectively than the others do.
Anti-neutrophil cytoplasmic antibody (ANCA)-associated vasculitis has been reported in Graves' disease patients treated with antithyroid drugs (ATDs), especially propylthiouracil. ATD-induced ANCA-associated vasculitis usually involved the kidneys followed by the respiratory organs and skin. The treatment of ANCA-associated vasculitis induced by ATDs is to stop ATD therapy immediately, which often leads to an overall good prognosis. We report a case of ANCA-associated vasculitis in the peripheral nerves of the lower extremities in a 66-year-old woman who was treated with methimazole (MMI) for Graves' disease. To our knowledge, this is the third case of peripheral nervous system (PNS) involvement of ATD-induced vasculitis and the first case of PNS vasculitis associated with MMI.
Neutrophil extracellular trap (NET) formation is an immune response for the invasion of microbes. The purpose of this study is to examine the effect of zinc on NET formation of porcine peripheral blood polymorphonuclear cells (PMNs). The NET formation of PMNs was measured by fluorescence microplate reader. The production of tumor necrosis factor (TNF)-α in the culture supernatants from zinc-treated peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Zinc itself did not have no effect on NET formation. However, the NET formation of PMNs was increased by culture supernatants from PBMCs treated with zinc. Also, the NET formation of PMNs was increased by recombinant porcine (rp) TNF-α. The production of TNF-α in PBMCs culture supernatants was shown to increase upon zinc treatments. These NET formations of PMNs increased by either culture supernatant from PBMCs treated with zinc or rpTNF-α were inhibited by treatment of anti-rpTNF-α polyclonal antibody (pAb). These results suggested that zinc has an immunostimulating effect on the NET formation of PMNs, which is mediated by TNF-α released from zinc-treated PBMCs. Therefore, zinc may play an important role for NET formation in the defense of porcine inflammatory diseases.
Changwoo Nahm;Yoonhoi Koo;Taesik Yun;Hakhyun Kim;Byeong-Teck Kang;Mhan-Pyo Yang
한국임상수의학회지
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제40권3호
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pp.175-181
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2023
Fucoidan extracted from brown seaweed has a variety of biological activities. Neutrophil extracellular traps (NETs) formation is an immune response for the invasion of pathogens. Neutrophils release granule protein and chromatin that form extracellular fibers that bind microbes. These NETs degrade virulence factors and kill bacteria. The aim of this study was to investigate the effect of fucoidan on NET formation of porcine peripheral blood polymorphonuclear cells (PMNs). The NET formation was determined by fluorescence emission of propidium iodide (PI) in PMNs by a fluorescence microplate reader. The production of tumor necrosis factor (TNF)-α from peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) was measured by ELISA method. Fucoidan itself did not show any direct effect on NET formation. However, NET formation of PMNs was increased by the culture supernatant from PBMCs treated with fucoidan. The NET formation of PMNs were also enhanced by treatment with recombinant porcine (rp) TNF-α. The ability of culture supernatant from PBMCs treated with fucoidan to increase the NET formation of PMNs was inhibited by addition of goat anti-rp TNF-α polyclonal antibody (pAb) (IgG) prior to the culture. The increase of NET formation by rp TNF-α was also inhibited by goat anti-rp TNF-α pAb (IgG). The level of TNF-α in culture supernatant from PBMCs was increased by treatment with fucoidan. These results suggest that fucoidan increases porcine NET formation, which is mediated by TNF-α produced from PBMCs.
The trophic factor Neuregulin-1 (NRG-1) plays a critical role in the development of the peripheral nervous system and the repair of nerve injuries. The regulation of neutrophil apoptosis by cytokine secretion from structural cells is an important process in inflammatory diseases, including asthma. This study aimed to investigate the relationship between NRG-1 and the alteration of neutrophil apoptosis by the regulation of cytokine release in the human lung epithelial BEAS-2B cells. Tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and interferon-gamma (IFN-γ) induce the increase in the release of interleukin (IL)-6, IL-8, and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1). NRG-1 alone had no effect on the secretion of IL-6, IL-8, and MCP-1. However, co-treatment of TNF-α and IFN-γ with NRG-1 inhibited the secretion of IL-6, IL-8, and MCP-1 that had been increased by TNF-α and IFN-γ. Treatment with NRG-1 did not have a direct effect on neutrophil apoptosis. Co-treatment of TNF-α and IFN-γ with NRG-1 was not effective on suppression of neutrophil apoptosis due to TNF-α and IFN-γ. The supernatant of BEAS-2B cells after co-treatment of TNF-α and IFN-γ with NRG-1 suppressed the inhibition of neutrophil apoptosis that had been caused due to the supernatant treated with TNF-α and IFN-γ. Taken together, NRG-1 has an anti-inflammatory effect in an inflammatory milieu by the regulation of cytokine secretion and neutrophil apoptosis.
Copper deficiency was induced in eight male buffalo calves by adding molybdenum (30 ppm wet basis) to their diet. Copper status was monitored from the liver copper concentration and a level below 30 ppm (DM basis) was considered as deficient. Haemoglobin, haematocrit, total and differential leucocyte numbers were determined. The functions of peripheral neutrophils were assessed by in vitro phagocytosis and killing of Staphylococcus aureus. The effect of molybdenum induced copper deficiency on bone marrow was monitored. The mean total leucocyte count was unaffected whereas a significant fall in neutrophil count coincided with the fall in hepatic copper level to $23.9{\pm}2.69$ ppm. Reduced blood neutrophil numbers was not accompanied by any change in the proportion of different neutrophil precursor cells in bone marrow. It was hypothesised that buffalo calves were more tolerant to dietary molybdenum excess than cattle. It was concluded that neutropenia in molybdenum induced copper deficiency occurred without any effect on their synthesis and maturation process. Bone marrow studies in healthy calves revealed higher percentage of neutrophilic myelocytes and metamyelocytes as compared to cattle.
Sang-chul, Han;Ji-houn, Kang;Sung-mok, Son;Chung-soo, Chung;Chul-young, Lee;Mhan-pyo, Yang
한국임상수의학회지
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제20권4호
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pp.437-442
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2003
CLA를 급여시킨 돼지에 있어 말초 혈액 세포의 변화와 탐식세포의 탐식반응을 조사하였다. 100일령, 평균체 중 80kg인 거세 수퇘지에게 10t-l2c CLA와 CLA mixture를 각각 사료 중에 5% 첨가하여 총 4주간에 걸쳐 자유급여 시켰다. 급여 전 (0주), 급여 2주후, 4주후 그리고 급여 중지 후인 5주차에 각각 혈액세포 수치(PCV 백혈구수 및 백혈구 감별계산치)의 변화와 탐식세포의 탐식활성을 측정하였다. CLA의 급여 따른 PCV의 수치에 있어서는 아무런 변화가 없었다. 그러나 10t-l2c CLA 또는 CLA mixture가 함유된 사료를 급여한 돼지에 있어서 CLA를 급여하지 않은 돼지에 비해 백혈구수 특히 호중구 수가 현저히 증가하였다. 말초혈액 단핵구세포(mononuclear cells; MNC)와 다형핵백혈구(polymorphonuclear cells; PMN)의 탐식능를 유세포분석기로 분석한 결과, 10t-l2c CLA 또는 CLA mixture 급여와 상관없이 MNC와 단구세포들(monocyte-rich cells)의 탐식능에는 변화가 없었다. 그러나 PMN의 탐식 활성은 CLA 무급여 대조돼지들에 비해 CLA 급여군은 2주에서 5주차에 걸쳐 증가된 탐식능를 나타내었다. 이상의 결과로부터 돼지에 CLA 급여는 호중구수 증가와 호중구 탐식능 증가를 유도할 수 있음을 제시하였으며 향후 생체방어 증강을 위해 CLA를 임상적으로 투여할 수 있을 것으로 보인다.
The study was conducted to correlate the periparturient immune status in terms of neutrophil functions and cytokine expression in peripheral blood mononuclear cell culture with impending postpartum reproductive disorders in buffaloes. Forty pregnant buffaloes were observed for occurrence of postpartum reproductive disorders (PRD), i.e., metritis, endometritis and delayed uterine involution etc., during one week prepartum to four weeks postpartum period. A representative number (n = 6) of buffaloes that did not develop any PRD were included in group I (healthy, control), while the animals which experienced PRD were assigned into group II (PRD, n = 8). The blood samples were collected at weekly interval from one week prepartum to four weeks postpartum period considering the day of calving as 'd 0'. Differential leucocytes counts, superoxide and hydrogen peroxide production activity in isolated neutrophils and the mRNA expression profile of cytokines i.e., IL-2, IL-4 and IFN-${\gamma}$ in PBMC culture were studied in all the samples. A higher total leucocytes, neutrophil and band cells count along with impaired neutrophil functions i.e., lowered level of production of superoxide and hydrogen peroxide before parturition and during early postpartum period were observed in buffaloes developing PRD. Further, a lower expression of IL-2, IFN-${\gamma}$ and IL-4 mRNA in PBMC culture was observed at calving in buffaloes that subsequently developed PRD at later postpartum. Thus, suppression in neutrophil function and cytokine expression at prepartum to early postpartum period predisposes the buffaloes to develop postpartum reproductive disorders. Hence, monitoring of neutrophils function and cytokine expression profile would be effective to predict certain reproductive disorders at late pregnancy or immediately after parturition in buffaloes. In future, this may be a novel approach for determining suitable management and therapeutic decisions for prevention of commonly occurring reproductive disorders in farm animals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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