Background and objectives: Salivary hypofunction is one of the common side effects after radioiodine therapy, and its pathophysiology is salivary ductal stenosis resulting from ductal cell injury. This study aimed to develop the functional culture environment of human parotid gland ductal cells in in vitro three-dimensional perfusion culture system. Materials and Methods: We compared plastic dish culture method and three-dimensional culture system containing Matrigel and nanofiber. Morphogenesis of reconstituted salivary structures was assessed by histomorphometry. Functional characteristics were assessed by immunohistochemistry and reverse transcription polymerase chain reaction (aquaporin 5, CK7, CK18, connexin 43, and p21). In addition, we designed the media perfusion culture system and identified higher rate of cell proliferation and expression of connexin 43 in perfusion system comparing to dish. Results: Human parotid ductal cells were well proliferated with the ductal cell characters under environment with Matrigel. In the presence of Matrigel, aquaporin 5, CK18 and connexin 43 were more expressed than 2D dish and 3D nanofiber setting. In the media perfusion culture system, ductal cells in 3D culture media showed higher cells count and connexin 43 expression compared to 2D dish. Conclusion: This in vitro ductal cell perfusion culture system using Matrigel could be used to study for radioiodine induced sialadenitis model in vivo.
Total body perfusion using Rygg-Kyvsgaard Heart-Lung-Machine, Mark IV, Polystan was attempted in the dogs by the hemodilution method with total prime of buffered Hartman's solution and under hypothermia. The first of all, the functions of Rygg--Kyvsgaard Heart-Lung-Machine and the effects of the hemodilution perfusion by buffered Hartman's solution was studied. At the same time the changes of blood pressure, oxygen consumption, and influence on the blood pictures were observed before, during, and in 1-3 days after perfusion. Hemodilution rates were the average 74. 22cc/Kg(the ranges of 67 to 81 cc/Kg) and perfusion flow rates were maintained in the mean 62. 6cc/Kg/min., Although it was possible to check up to 87 cc/ Kg/min. The total body perfusion continued for 60-80 minutes. Hypothermia was employed between $36^{\circ}C$ and $32^{\circ}C$ of the rectal temperature. Arterial pressure was ranged approximately between 68mmHg and 149mmHg, but generally, it was maintained over 80mmHg. Venous pressure was measured between 6.5cm $H_2O$and 11.5cm $H_2O$. Optimum oxygenation can be expected when oxygen flow into the disposable bubble oxygenator was maintained approximately at 3.5 L/min .. Inthis way, the oxygen contents were measured in the mean value of 13.11${\pm}$O.56 vol. % of arterial blood and 8.67+1.08 vol.% of venous blood(P${\pm}$0.86 vol.% in arteriovenous oxygen difference and 2. 97${\pm}$0.62cc/Kg in oxygen consumption were calculated. According to these dates, it is as plain as pikestaff that excellent oxygenation and good tissue perfusion was accomplished. Erythrocyte, hemoglobin and hematocrit were decreased about 38% during extracorporeal circulation and these were not recovered until 1-3 days after perfusion. These decrease was resulted from relatively high degree of hemodilution rate and no blood transfusion to compensate during these experimental studies. The platelets were also decreased about 76% during perfusion, but on the contrary, it was increased progressively after perfusion and in 1-3 days after perfusion was returned to the control level. Leucocyte were also decreased during perfusion, but it was increased progessively after perfusion and in 1-3 days after perfusion exceed the control level. This increase was resulted from postoperative infection of the wound, but its analysis were not changed significantly.
This study compared the permeability of $[^3H]taurine,\;[^3H]phenylalanine,\;and\;[^3H]oxytocin$ through the blood-brain barrier (BBB) in mice and rats with common carotid artery perfusion (CCAP) method that modified internal carotid artery perfusion (ICAP) method. External carotid artery (ECA) was cannulated with coagulating pterygopalatine artery (PPA) in ICAP method, while CCA was cannulated without coagulating PPA in CCAP method. Also, for evaluation of BBB permeability of drugs in mice and rats, we used intravenous injection technique. The results of CCAP method in mice at a perfusion flow-rate of 2 ml/min, the brian volume of distribution $(V_D)$ of $[^{14}C]sucrose,\;[^3H]taurine,\;[^3H]phenylalanine,\;and\;[^3H]oxytocin$ were similar to the result of ICAP method in rats at perfusion flow rate of 4 ml/min. The area under the plasma concentration-time curve and brain uptake of $[^3H]taurine$ by intravenous injection technique, were $65.5{\pm}9.7%ID^*min/ml\;and\;0.515{\pm}0.093%ID/g$, respectively, in mice, and the corresponding values were $8.00{\pm}0.03%ID^*min/ml\;and\;0.052{\pm}0.003%ID/g$ in rats. But the BBB permeability surface-area product of $[^3H]taurine$ was similar between mice and rats. In conclusion, the CCAP method in mice was simple, fast and comparable to ICAP method in rats for drug permeability through the BBB.
Growth kinetics of mammalian cell, Chinese Hamster Ovalry(CHO) was investigated to effectively produce pharmaceutically important Erythropoeitin under perfusion chemostat conditions. Perfusion rate, D is correlated with total viable is to be an essential factor in controlling growth kinetic parameters under this kind of operations. It is also found that the measurement of oxygen uptake rates is a relatively accurate method to understand cell growth, in case that the traditional cell count method is no longer useful due to heavy cell clumpings. True growth yield, Ymax and maintenance coefficient, me associated with mammalian cell growth were estimated as $2.86{\times}10^8$ cells/ g of glucose and 0.0063 g of glucose/ cells/ hr, respectively.
Purpose: The aim of this study is to identify clinical usefulness of Wide Beam Reconstruction (WBR) which is called Xpress.cardiac$^{TM}$ to confirm the agreement between segmental perfusion and regional wall motion in myocardium compared to conventional OSEM method. Materials and Methods: Subjects were separated two groups. First group was composed of 20 normal control group. Second group was composed of 10 patients (abnormal group) who had coronary artery disease. Subjects underwent myocardial perfusion SPECT ($^{201}Tl$ rest and $^{99m}Tc$-MIBI stress). Image acquisition and reconstruction were that rest stage was each step per 30, 15 seconds and stress stage was each step per 25, 13 seconds, OSEM and WBR methods were applied. Segmental perfusion and regional wall motion were applied 20-segment model of QPS, QGS algorithm in AutoQuant. Status of perfusion was composed of 5 point scoring system (0=normal, 1=mild, 2=moderate, 3=severe hypokinesia, 4=dyskinesia). Status of regional wall motion was also composed of 5 point scoring (0=normal, 1=mild, 2=moderate, 3=severe hypokinesia, 4=dyskinesia). We evaluated the agreement between conventional OSEM and WBR through automatic quantification value. Results: The agreement of rest segmental perfusion between conventional OSEM and WBR in normal patients was 99% (396/400, k=0.662, p<0.0001) and one of rest regional wall motion was 83.8% (335/400, k=0.283), the agreement of stress segmental perfusion was 95.8%(383/400, k=0.656), one of stress regional wall motion was 87.3% (349/400, k=0.390). The match rate of rest segmental perfusion in abnormal patients was 83% (166/200, k=0.605, p<0.0001) and one of rest regional wall motion was 55.5% (111/200, k=0.385), the agreement of stress segmental perfusion was 79.5% (159/200, k=0.682), one of stress regional wall motion was 63.5% (127/200, k=0.486). Conclusion: Compared to conventional OSEM, WBR method had a good agreement of segmental perfusion in myocardium in normal and abnormal groups. However regional wall motion showed meaningful low agreement. Although WBR offers high resolution and contrast ratio, it is not useful method for gated myocardial perfusion SPECT.
Positron emission tomogrpahy (PET) represents the most advanced scintigraphic imaging technology. With the increase in availability of PET, the clinical use of PET has grown in medical fields. This can be employed for cardiovascular research as well as for clinical applications in patients with various cardiovascular disease. PET allows non-invasive functional assessment of myocardial perfusion, substrate metabolism and cardiac innervation and receptors as well as gene expression in vivo. PET is regarded as the gold standard for the detection of myocardial viability, and it is the only method available for the quantitative assessment of myocardial blood flow. This review focuses on the clinical applications of myocardial perfusion PET in coronary artery disease.
Purpose: To assess the clinical usefulness of Transfer Insensitive Labeling Technique (TILT) in t evaluation of ischemic cerebrovascular disease. Method: Arterial spin labeling (ASL) is a method of perfusion weighted imaging usin endogenous water as a tracer. To avoid MT-related artifacts, which is common in usual A technique, a transfer insensitive labeling technique (TILT) was used, which globall manipulate macromolecular spins in the same way by both labeling and reference preparatio while free water is labeled in one case and left unchanged in the other. Philips Interal 1.5 T system was used. 40cm FOV and 32 repeated measurements were done because of the wea perfusion signal. 5 slices of supratentorial brain were obtained in 5 patients {MCA infar (n=3), moyamoya disease (n=2)}. We simultaneously obtained contrast enhanced T2*-weighted perfusion MRI and correlate to TILT images.
Many radiopharmaceuticals have been developed and wildy used in the imaging cardiac function. Myocardial perfusion imaging (MPI) is a well established noninvasive method of assessing coronary blood flow and has been widely used in patients diagnosed or suspected with coronary artery diseases. The innovation of radiopharmaceuticals used in the cardiac imaging is one of the most important contributors to the development of nuclear cardiology. Thallium-201 and various technetium-99m agents have been globally used for myocardial perfusion SPEG, and N-13 ammonia (13NH3), rubidium-82 (82Rb), 0-15 water (H2150) for myocardial perfusion PET. As well as the cardiac perfusion studies, new radiopharmaceuticals that visualize fat metabolism or receptors of the sympathetic nervous system have successfully been applied to clinical practice. Useful information can be obtained for diagnosing coronary artery disease, evaluating patients' condition, or assessing therapeutic effects. In this review, we describe the characteristics and clinical usefulness of radiopharmaceuticals used for cardiac SPEG and PET.
An in vitro model providing with a recirculating perfusion apparatus using an isolated canine heart and its autogenous blood, which was prepared for study of myocardial protection method. This apparatus was easily used by quick connect system and maintained well heart function for about 2 hours. The Langendorff perfusion was initiated for a 10 minute period by introducing perfusate at 37` into the aorta from aortic reservoir located 100 cm above the heart. The isolated perfused working canine heart model was a left heart preparation in which oxygenated perfusion medium [at 37K] entered the cannulated left atrium at a constant flow rate [900ml/ min] under 20 mmHg overflow system and was spontaneously ejected[no electrical pacing] via an cannula against a hydrostatic pressure of 80 cm H2O. During this working period, various indices of cardiac function were measured. The cardiac functions were stable for over 2 hours with perfusion of Krebs-Henseleit solution and autologous blood[1:1] mixture in volume and maintained heart rate ]]3-122/bpm peak systolic pressure 109-113 mmHg, cardiac output 900 ml / min and left atrial mean pressure 8-9 mmHg. In this model, the efficiency of myocardia] protection could be easily measured by means of functional, enzymatic, biochemical and ultrastructural assessment. And also, we believe this model to be a useful assessment screening model of recovery state after long duration of myocardial preservation of donor heart without difficult transplantation procedures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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