Chili pepper (Capsicum annuum L.) is an economically important horticultural crop in Korea; however, various diseases, including Phytophthora root rot, anthracnose, powdery mildew, Cucumber mosaic virus (CMV), Pepper mild mottle virus (PMMoV), and Pepper mottle virus (PepMoV), severely affect their productivity and quality. Therefore, pepper varieties with resistance to multiple diseases are highly desired. In this study, we developed 20 SNP type assays for three pepper populations using Fluidigm nanofluidic dynamic arrays. A total of 4,608 data points can be produced with a 192.24 dynamic array consisting of 192 samples and 24 SNP markers. The assays were converted from previously developed sequence-tagged-site (STS) markers and included markers for resistance to Phytophthora root rot (M3-2 and M3-3), anthracnose (CcR9, CA09g12180, CA09g19170, CA12g17210, and CA12g19240), powdery mildew (Ltr4.1-40344, Ltr4.2-56301, and Ltr4.2-585119), bacterial spot (Bs2), CMV (Cmr1-2), PMMoV (L4), and PepMoV (pvr1 and pvr2-123457), as well as for capsaicinoids content (qcap3.1-40134, qcap6.1-299931, qcap6.1-589160, qdhc2.1-1335057, and qdhc2.2-43829). In addition, 11 assays were validated through a comparison with the corresponding data of the STS markers. Furthermore, we successfully applied the assays to commercial $F_1$ cultivars and to our breeding lines. These 20 SNP type assays will be very useful for developing new superior pepper varieties with resistance to multiple diseases and a higher content of capsaicinoids for increased pungency.
Kim, Sang-Dal;Lee, Eun-Tag;Lim, Si-Kyu;Nam, Doo-Hyun;Khang, Yong-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권3호
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pp.415-421
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2003
A bacterium, Pseudomonas fluorescens 2112, that is antagonistic against a red-pepper blight-causing fungus, Phytophthora capsici, was isolated from the local soil of Gyongju, Korea. This strain formed an orange-colored clear halo zone on chrome azurol S (CAS) blue agar, suggesting the production of a siderophore in addition to an antifungal antibiotic. The optimal culture conditions for siderophore production by P. fluorescens 2112 were 30-h cultivation at $25^{\circ}C$ and pH 6.5 in King's B medium. The presence of $20{\mu}g/ml\;of\;Fe^3+$ ion or EDDHA promoted the production of siderophore in King's B medium. The siderophore was purified from culture broth by CM-Sephadex C-25 and Sephadex G-25 column chromatographies. The UV spectra of the purified siderophore was the same as that of pyoverdins or pseudobactins. The molecular mass was 1,958 Da determined by FAB-rlass spectrometer, and the amino acid composition analysis showed that the purified siderophore consisted of glycine/threonine/serine/glutamic acid/alanine/lysine with the molar ratio of 3:2:1:1:1:1, DL-Threo-${\beta}$-hydroxyaspartic acid and $N^{\delta}$-hydroxyornithine, two of the essential constituents of pyoverdin, were also found. The purified siderophore pyoverdin showed strong in vitro and in vivo antagonistic activities against phytophthora blight-causing P. capsici. Especially in an in vivo pot test, the siderophore protected red-pepper Capsicum annum L. very well from the attack of P. capsici. These results indicated that the purified siderophore of P. fluorescens 2112 played a critical role in the biocontrol of the red-pepper blight disease, equivalent to treatment by P.fluorescens 2112 cells.
Bacillus velezensis HKB-1가 표고버섯 수확후배지 퇴비로부터 분리되었으며 고추역병균(Phythopthora capsici), 인삼모잘록병균(Rhizoctonia solani), 고추탄저병균(Collectotrichum coccodes) 및 시들음병(Fusarium oxysporium)의 균사체 성장을 70% 이상 억제하는 항 진균 활성을 보였다. B. velezensis HKB-1은 표고버섯 수확후배지 퇴비 물 추출물과 당밀 1% 첨가배지에서 다른 상업용 세균배지보다 10~100배 더 높은 세균증식률을 보였으며 고추 역병균의 균사체 생장을 90% 억제하였으며 고추생육 촉진효과 및 고추역병에 대하여 70% 이상의 방제효과가 있었다.
1995년부터 1998년까지 75곳의 국내 고추포장들로부터 수집된 433개의 고추역병균 Phytophthora capsici 집단의 교배형 분포 특성에 따른 metalaxyl 감수성을 분석하였다. Metalaxyl $2{\mu}g/ml$ 농도에서 P. capsici 집단의 평균 균사생장 저해율은 68.2%였으며, 저항성균의 발생율은 평균 28.6%였다. 포장단위별로 metalaxyl에 대한 반응을 조사한 결과 A1형 또는 A2형 단일 교배형만 출현한 포장들의 균주들은 서로 비슷한 수준의 감수성을 나타냈으며, 대부분 포장단위별로 약제 감수성이나 저항성 중의 하나로 구분됐다. 그러나 교배형이 혼재하여 분포하는 각 포장단위별 균주들간의 약제에 대한 반응은 단일교배형 포장균주들에 비해 매우 다양했으며, 포장별로 저항성균의 발생비율도 다양했다. 이러한 결과들은 국내에 분포하는 고추역병균 P. capsici 집단의 metalaxyl 약제에 대한 다양한 감수성이 각 포장단위별 A1 : A2교배형 발생비와 매우 밀접한 관계가 있다는 것을 의미한다.
Kim, Tae-Ho;Kim, Yeong-Tae;Byun, Myung-Ok;Shin, Jeong-Sheop;Go, Seoung-Joo
한국식물병리학회:학술대회논문집
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한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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pp.69.1-69
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2003
RSH (relA/spoT homolog) has been known to determine the level of guanosine tetraphosphate (ppGpp) and guanosine pentaphosphate (pppGpp), which are the effector nucleotide of the prokaryotic stringent response and also play a role in antibiotic production and differentiation in Streptomyces species but not a little in eukaryotic organism, especially in plant. Salicylic acid (SA), a critical signal molecule of establishing systemic acquired resistance (SAR), could induce SAR in Pepper (Capcicum annuum) against Phytophthora capsici. And the extent of SAR induction was in proportion to the dosage of SA (or BTH). Suppression subtractive hybridization (SSH), a PCR-based method for cDNA subtraction, was carried out between SA-treated and non-SA-treated pepper leaves to isolate genes which may be responsible for defense signaling against pathogens. Early upregulated gene was selected from reverse northern and kinetics of SSH-genes transcripts in SA-treated pepper leaves upon SA treatment. Full-length cDNA of the gene (PepRSH; Pepper RelA / SpoT homolog) had an open reading frame (ORF) of 2166 bp encoding a protein of 722 amino acids and a significant homology with (p)ppGpp phosphohydrolase or synthetase. Genomic DNA gel blot analysis showed that pepper genome has at least single copy of PepRSH. PepRSH transcripts was very low in untreated pepper leaves but strongly induced by SA and methyljasmonic acid (MeJA), indicating that PepRSH may share common SA and MeJA-mediated signal transduction pathway Functional analysis in E. coli showed PepRSH confers phenotypes associated with (p)ppGpp synthesis through a complementation using active site mutagenesis.
고추의 뿌리에 서식하고 있는 근권미생물을 30여종 분리하여 고추 검은 곰팡이병원균 A. alteranta에 길항하는 미생물을 분리한 결과 분리주 No. J-24 균주가 가장 길항력이 우수하였으며 Bacillus subtilis로 동정되었다. B. subtilis J-24는 검은곰팡이병균(Alternaria alternata)에 대해서는 생육저지 효과가 99%로 나타났으며, 그외 갯빛곰팡이병균(Botrytis cinerea), 역병균(Phytophthora capsici), 잘록병균(Pythium ultimum), 탄저병균(Colletotrichum gloeosporioides), 겹무늬병균(Stemphylium botryosum)에도 생육저지효과를 강하게 나타내었다. 고추 유묘의 생장활력은 미생물제제가 첨가된 상토가 일반 상토 보다 엽면적이 15%, 줄기길이가 12%, 뿌리길이가 12% 증가하였고 전체 건물중이 약 13% 증가하여 고추유묘의 생장활력이 증가되었다.
In this study, antifungal activity of essential oils of Cymbopogon citratus and Ocimum basilicum and two fungicides Mancozeb and Metalaxyl-Mancozeb in six different concentrations were investigated for controlling three species of Phytophthora, including P. capsici, P. drechsleri and P. melonis on pepper, cucumber and melon under in vitro and greenhouse conditions, respectively. Under the in vitro condition, the median effective concen- tration ($EC_{50}$) values (ppm) of plant essential oils and fungicides were measured. In greenhouse, soil infested with Phytophthora species was treated by adding 50 ml of essential oils and fungicides (100 ppm). Disease severity was determined after 28 days. Among two tested plant essential oils, C. citratus had the lowest $EC_{50}$ values for inhibition of the mycelial growth of P. capsici (31.473), P. melonis (33.097) and P. drechsleri (69.112), respectively. The mean $EC_{50}$ values for Metalaxyl-Mancozeb on these pathogens were 20.87, 20.06 and 17.70, respectively. Chemical analysis of plant essential oils by GC-MS showed that, among 42 compounds identified from C. citratus, two compounds ${\beta}$-geranial (${\alpha}$-citral) (39.16%) and z-citral (30.95%) were the most abundant. Under the greenhouse condition, Metalaxyl-Mancozeb caused the greatest reduction in disease severity, 84.2%, 86.8% and 92.1% on melon, cucumber, and pepper, respectively. The C. citratus essential oil reduced disease severity from 47.4% to 60.5% compared to the untreated control ($p{\leq}0.05$). Essential oils of O. basilicum had the lowest effects on the pathogens under in vitro and greenhouse conditions. These results show that essential oils may contribute to the development of new antifungal agents to protect the crops from Phytophthora diseases.
Nam Moon;Lee, Kyoung-Mi;Jang, Kuang-Il;Jeong young Song;Kim, Hong-Gi
한국식물병리학회:학술대회논문집
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한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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pp.117.1-117
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2003
Phytophthora blight, caused by P. capsici, is very important disease of pepper. Many fungicides to control of Phytophthora blight have been developed, but most of fungicides disappeared in short periods. Nowadays dimethomorph was known as one of the most effective to control of this disease. P. capsici isolates from pepper fields were collected and surveyed their growth in dimethomorph amended V8 medium in order to evaluate their fungicides resistance. The fungicide resistant isolates were not founded among them. Most of the sensitive isolates were inhibited perfectly in V8 medium amended with 10ppm dimethomorph. Mutants of P. capsici by dimethomorph, was grown very well in 250ppm. The difference of pathogenicity, colony morphology, drug response, RT-PCR results was identified between sensitive and resistance isolates. This study should be provided a basic information about the occurrence of dimethomorph resistant isolates and genetic changes in P. capsici population.
Pseudomonas aeruginosa strain B5 with antagonistic activity against Phytophthora capsici and Magnaporthe grisea, was isolated from pepper-growing soil. From the culture of P. aeruginosa strain B5 grown on King's medium B, antibiotic substances were purified using XAD-2 column chromatography. XAD-2 eluates inhibited not only the mycelial growth of P. capsid and M. grisea, but also the development of Phytophthora blight on pepper plants. The crude antibiotic substances were further purified by using silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, thin layer chromatography on silica gel plates, and high performance liquid chromatography. Silica gel column chromatogrphy gave good separation of the four antibiotic substances. The pure antibiotics P1, P2, and P3 finally purified by preparative HPLC inhibited the mycelial growth of P. capsici, at concentrations from 7 to 10 $\mu g/ml$. Only P1 and P2 had antifungal activity against M. grisea at 8 $\mu g/ml$. P1 and P3 were highly inhibitory to the mycelial growth of Botryosphaeria dothidea and Botrytis cinerea at relatively low concentrations. However, the three antibiotics had no antifungal activity against Rhizoctonia solani. The chemical structures of these antibiotics are being identified.
불건전 토양과 건전 토양의 환경을 이해하기 위해 자연적으로 역병에 감염되거나 감염되지 않은 고추와 토마토 시설재배지의 비근권토양, 근권토양, 근면을 채취하고 연구하였다. 시료는 경상남도의 시설재배지에서 1999년 4월에 채집되었으며, 진균의 분리는 희석평판법을 이용하였다. 각 작물 별 재배지에서 25 종의 진균이 분리되었으며 건전 시료보다는 감염 시료에서, 근권이나 근면토양보다 비근권토양에서 더 많은 수의 종이 분리되었다. 역병이 감염되지 않은 시료에서만 Trichoderma sp.가 분리되었으며 각 작물의 서식지별로 분리된 진균의 수는 다양하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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