A total of 377 pregnant women, 43 pelvic tumor patients and 80 of multiphysic health center persons as controls were examined by indirect latex agglutination test in order to evaluate Toxoplasma antibody titers at Kang-Nam St. Mary's Hospital in Seoul. Throughout this survey, 1 : 32 or more titers of diluted sera were regarded as positive. 1. The 377 samples of test sera in pregnant women showed negatives in 319 cases (84.6%), 1 : 2 in 44 cases (11.7%), 1:4 in 9 cases (2.4%), 1:8 in 2 cases (0.5%), 1:16 in 1 case (0.3%) and 1 : 32 in 2 cases (0.5%) respectively. 2. The 43 samples of test sera in pelvic tumor patients showed negatives in 29 cases (67.4%), 1:2 in 8 cases(18.6%), 1:4 in 1 case(2.3%), 1:16 in 2 cases (4.7%), 1:32 in 1 case(2.3%) and 1 : 128 in 2 cases (4.7%). 3. The 80 samples of test sera in multiphysic health center persons as controls negatives in 56 cases (70.0%), 1.2 in 19 cases (23.8%), 1:4 in 3 cases (3.8%), 1:8 in 1 case (1.3%) and 1 : 128 in 1 case (1.3%). 4. Among total 420 study cases, 5 cases (1.2%) showed Positives, and they were 2 cases (0.5%) of pregnant women and 3 cases (7.0%) of pelvic tumor patients. 5. One case (1.3%) out of 80 control sera showed positive result.
One hundred and thirteen healed pulmonary tuberculosis patients and 11 patients with other underlying diseases were studied for evidence of pulmonary fungal infection because of persisting hemoptysis or chronic cough. Rediological, mycological and serological investigations revealed that 54 out of 124 patients were evidently infected with one or more species of fungi. A. fumigatus was isolated from 4 out of 70 patients whose sera did not react with antigens from this fungus, while it was isolated from 43 out of 47 serological reactors to this fungus. Chest radiography showed a distinct fungus ball in a cyst of one patient and in a preformed cavity in the lung of 17 healed tuberculosis patients and two other patients. The latter two patients were infected with A.flavus. Two patients, who were under the long period of immunosuppressive therapy, apparently succumbed to invasive aspergillosia due to A.fumigatus. A single or dual infection with A. flavus, A. nidulans, A.nidulans var. latus, C. albicans, and P. boydii were noticed in some patients without mycetomal shadow on chest radiographs. Young mycelial extract (ME) of A.fumigatus detected antibody in 95.8 percent of the sera from patients infected with this fungus, while it was isolated from 43 out of 47 serological reactors to this fungus. Chest radiography showed a distinct fungus ball in a cyst of one patient and in a performed cavity in the lung of 17 healed tuberculosis patients and two other patients. The latter two patients were infected with A. flavus. Two patients, who were under the long period of immunosuppressive therapy, apparently succumbed to invasive aspergillosis due to A.fumigatus. A single or dual infection with A. flavus, A. nidulans, A. niduans var. latus, C. albicans, and P. boydii were noticed in some patients without mycetomal shadow on chest radiographs. Young mycelial extract (ME) of A.fumigatus detected antibody in 95.8 percent of the sera from patients infected with this fungus, while the commercial culture filtrate antigen (GL) yielded 78.7 per cent positive result. Culture filtrate antigen, however, was comparable with ME. There was no single antigen with which all the serum specimens reacted. Fractionation of ME resulted in a loss of some activity although it excluded substances that reacted with C-reactive protein in a loss of some activity although it excluded substances that reacted with C-reactive protein. Most reactive and specific precipitinogens distributed in the fraction (FB) which was precipitable at 75 percent saturation with ammonium sulfate and eluted in a second peak in order from gel-filtration and which contained mostly proteinic components. Glycoproteins or polysaccharides rich fractions (FA and ASI) were relatively less effective in detecting antibody. Demonstration of antibody in the serum from patients using a battery of fungal antigens and of etiologically related fungi from clinical specimens are very useful laboratory procedures for the diagnosis of pulmonary fungal infection which is a common complication of tuberculosis.
The pork meat has been reported as one of the food occurring allergic reactions predominantly to korean. To identify the potential food allergens in pork meat, sera were collected from 25 allergic patients to the pork meat and 10 allergic patients not to pork meat as well as 5 normal subjects after skin prick test and open food challenge test. Crude extracts were prepared by blending raw pork meat in phosphate buffered saline (pH 7.0) and the heat treatment on crude extracts was carried to characterize sensibility of the allergens to heat. ELISA was performed to determine specific IgE antibody levels of allergic patients to pork meat, and resulted in twofold higher mean value than that of tolerated patients. Extracted proteins from pork meat was separated with SDS-PAGE followed by immunoblotting using sera from pork sensitive patients and control subjects, respectively. The IgE binding response to pork meat by immunobots correlated with quantitative specific IgE value of each person. Immunoblots showed four prominent IgE-binding bands (66, 60, 50, 44 kDa) in crude extract, but two bands of those (60, 44 kDa) were heat-labile. These results suggest that most prominent allergens from pork meat are four components(66, 60, 50, 44 kDa) in korean and the heat treatment on allergen is additional parameter to characterize allergen.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.34
no.6
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pp.555-559
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1999
The 38 kDa protein of Mycobacterium tuberculosis, which was known previously as antigen 5, has been extensively used in the serodiagnosis of tuberculosis. In an attempt to develop and evaluate a serodiagnostic test using the antigen, we expressed the 38 kDa protein in BCG and its seroreactivity was compared to that expressed in Escherichia coli. The coding region of the 38 kDa protein was amplified by PCR, and the gene was cloned into a Mycobacterium-E. coli shuttle expression vector pYMC-his and pQE30 expression vector and expressed in BCG and E. coli, respectively. Both recombinant 38 kDa proteins showed strong seroreactivity against pooled serum from tuberculosis patients. There was no significant difference in seroreactivity between the two recombinant antigens in sera from the far advanced tuberculosis patients. However, of 25 tuberculosis patients graded as "minimal" by chest X-ray, 5 (20.0%) were seropositive by r38 kDa expressed in E. coli, while 8 (32.0%) by that expressed in BCG. Likewise, higher seroreactivity by r38 kDa expressed in BCG was found in sera from the moderately advanced tuberculosis. This study thus indicates that the recombinant 38 kDa expressed in BCG is more effective than that expressed in E. coli in detecting antibodies to the native 38 kDa protein of M. tuberculosis in sera from minimally affected tuberculosis patients.
A total of 573 Patients hospitalized in National Seoul Mental Hospital and 76 of healthy Persons as control were examined by indirect latex agglutination test in order to evaluate Toxoplasma antibody titers in mental patients. Throughout this survey, 1:32 or more titers of diluted sera were regarded as positive. 1, The 573 samples of test sera showed negative in 386 cases (67.4%), 1:2 in 93 cases (16.2%), 1:4 in 57 cases (9.9%), 1:8 in 14 cases (2.4%), 1:16 in 12 cases (2.1%), 1:32 in 5 cases (0.9%), 1:64 in 1 case (0.2%), 1:128 in 3cases (0.5%) and 1:256 in 2 cases (0.3%) respecttively, 2. Among total 573 mental patients, 11 cases (1.9%) showed positive, and they were 9 cases 41.8%) of schizophrenia and 2 cases (7.4%) of manic depression. 3. One case (1.3%) out of 76 control sera showed positive result.
Kim, Young-Jung;Hwang, Eung-Soo;Kang, Jae-Seung;Cha, Chang-Yong;Chang, Woo-Hyun;Kim, Yoon-Won;Cho, Min-Ki;Min, Chang-Hong
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.4
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pp.447-453
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1986
To diagnose the typhoid fever rapidly and accurately in clinically suspected patients, the levels of IgG subclass antibody were measured by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). With symptom, blood culture and agglutination test, tested persons were categorized into 6 groups as typhoid fever, FUO, paratyphi A or B, other bacterial infctions, cancers, and control. ELISA was performed on the polyvinyl chloride plates coated with killed whole cell($10^8\;cell/ml$) of S. typhi 0901W by poly-L-lysine applied as binding substance (and polyvinyl chloride as solid phase). The distribution of the level of IgG subclass antibodies in each group was analyzed and compared with other groups. The results obtained were summarized as follow: 1. The optimal dilution of the sera from patients with typhoid fever was 1:160, and those of the sheep anti-human IgG subclass and the peroxidase conjugated rabbit anti-sheep IgG were 1:4000 and 1:5000, respectively. 2. The absorbance levels of IgG subclass in the sera of typhoid fever patients were as follows; a) IgG1 value is $0.439{\pm}0.110$ b) IgG2 value is $0.416{\pm}0.165$ c) IgG3 value is $0.449{\pm}0.145$ d) IgG4 value is $0.525{\pm}0.154$ IgG subclass levels in the sera of typhoid patients were much higher than in control group and patient with paratyphi A or B as well as other infectious diseases. The sensitivity and the specificity in differential diagnosis of typhoid fever and other febrile diseases were 92% and 79% in the assay of IgG1 respectively, whereas those in the assay of IgG2 were 97% and 72%, respectively (above absorbance 0.3). 3. The absorbance levels of IgG subclass in the serial sera of typhiod fever patients tend to decrease to the level of absorbance 0.3 in 10 months from the onset of illness. 4. The order of absorbance levels of IgG subclass in the serum of each group were typhoid fever, paratyphi A or B, other infectious diseases, control and cancer. 5. For the serodiagnosis of typhoid fever against other febrile diseases, the sensitivity and the specificity in the assay of IgG2 activity were 76% and 93% in absorbance 0.4, respectively. 6. In the distribution of the level of each IgG subclass in the sera of FUO patients which were suspected of typhoid fever, the positive rate was ranged from 36% to 82%. This suggest that more than 50% of FUO patients are caused by S. typhi.
The seroepidemiologic studies on antral-ToxopIasma antibody titers were carried out using ELISA and indirect latex agglutination test. Among 899 sera prepared from pregnant women, 39 cases (4.3%) revealed positive reaction and 218 sera from middle school students showed 4 positive reaction (1.8%) by ELISA. By LAT (newly established by National Veterinary Research Institute, Korea), the sera of 7 pregnant women (0.8%) showed positive reaction. When 80 sera showing ≥ 1 :8 by LAT were used for comparing the results obtained from LAT and Toxotest-MT (Eikon Chemical Co., Japans, 7 cases and 8 sera were positive, respectively. All of 11 sera of proven toxoplasmosis patients showed positive reaction in both tests. Overall proportion of agreement between LAT kit and Toxotest-MT was 0.94 (K-index : 0.632, p < 0.01), and LAT was considered to be useful for the screening of toxoplasmosis.
A synthetic peptide was prepared based on the antigenic region of Paragonimus westermani pre-procathepsin L, and its applicability for immunodiagnosis for human paragonimiasis (due to Paragonimus heterotremus) was tested using an ELISA to detect IgG4 antibodies in the sera of patients. Sera from other helminthiases, tuberculosis, and healthy volunteers were used as the references. This peptide-based assay system gave sensitivity, specificity, accuracy, and positive and negative predictive values of 100%, 94.6%, 96.2%, 100%, and 88.9%, respectively. Cross reactivity was frequently seen against the sera of fascioliasis (75%) and hookworm infections (50%). Since differential diagnosis between paragonimiasis and fascioliasis can be easily done by clinical presentation and fascioliasis serology, this cross reaction is not a serious problem. Sera from patients with other parasitoses (0-25%) rarely responded to this synthetic antigen. This synthetic peptide antigen seems to be useful for development of a standardized diagnostic system for paragonimiasis.
Cockroaches have been recognized as a major cause of asthma. Bla g 4 is one of the most important German cockroach allergens. The aim of this study is to investigate IgE reactivity to the recombinant Bla g 4 (rBla g 4) in the sera of allergic patients and identify linear IgE binding epitope. For protein expression, full-length Bla g 4 (EF202172) was divided into 5 overlapping peptide fragments (E1: aa 1-100, E2: aa 34-77, E3: aa 74-117, E4: aa 114-156, and E5: aa 153-182). The full-length and 5 peptide fragments of Bla g 4 was generated by PCR and over-expressed in E. coli BL21 (DE3). The IgE binding reactivities of the full-length and peptide fragments were measured by ELISA using 32 serum samples of cockroach allergy. The sera of 8 patients (25%) reacted with rBla g 4. Four sera (100%) showed IgE-binding reactivity to full-length and peptide fragment 4, and 2 sera (50%) reacted with peptide fragment 2. One (20%) serum reacted with peptide fragment 3. The results of ELISA using overlapping recombinant fragments indicated that the epitope region was located at amino acid sequences 34-73 and 78-113, and major IgE epitope of Bla g 4 was located at amino acid sequences 118-152 of C-terminal. B-cell epitope analysis of German cockroach allergen Bla g 4 could contribute to the strategic development of more specific and potentially efficacious immunotherapy.
Yang, Zhaoshou;Lee, Jihoo;Ahn, Hye-Jin;Chong, Chom-Kyu;Dias, Ronaldo F.;Nam, Ho-Woo
Parasites, Hosts and Diseases
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v.54
no.2
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pp.239-241
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2016
Chikungunya virus (CHIKV), a tropical pathogen, has re-emerged and has massive outbreaks abruptly all over the world. Containing many dominant epitopes, the envelope E2 protein of CHIKV has been explored for the vaccination or diagnosis. In the present study, the antigenicity of a recombinant expressed intrinsically disorder domain (IUD) of E2 was tested for the detection of the antibody against CHIKV through western blot method. The gene of the IUD of E2 was inserted into 2 different vectors and expressed as recombinant GST-E2 and recombinant MBP-E2 fusion protein, respectively. Two kinds of fusion proteins were tested with 30 CHIKV patient sera and 30 normal sera, respectively. Both proteins were detected by 25 patients sera (83.3%) and 1 normal serum (3.3%). This test showed a relatively high sensitivity and very high specificity of the recombinant E2 proteins to be used as diagnostic antigens against CHIKV infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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