Han, Hyojeong;Seo, Hong Seog;Jung, Byung Hwa;Woo, Kyoungja;Yoo, Young Sook;Kang, Min-Jung
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제35권1호
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pp.158-164
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2014
Substance P and neuropeptide Y were discovered as early diagnostic biomarkers of acute myocardial infarction in Korean patients and confirmed using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). We screened 12 peptides from the sera of Korean acute myocardial infarction (AMI) patients and detected 3 peptides (neuropeptide Y, substance P, and N-terminal pro-B-type natriuretic peptide) to be elevated from patients' sera by liquid chromatography mass/mass spectrometry. The elevated concentration of 3 peptides was confirmed by ELISA. The screening results revealed the substance P, neuropeptide Y, and pro-B-type natriuretic peptide (47-76) concentrations were higher in patients' sera than in healthy controls. The sensitivity and specificity of substance P for AMI diagnostic marker were 80% and 83%, respectively, and those of neuropeptide Y were 87% and 90%, respectively compared to healthy controls. These results suggest that substance P and neuropeptide Y could be used as early diagnostic biomarkers in patients with AMI.
We analyzed the concentration of Aspartate Aminotransferase (AST), Alanine Aminotransferase (ALT), Alkaline Phosphatase (ALP), Gamma Glutamyl Transferase (GGT), total protein (TP), albumin, total cholesterol (TC) and triglyceride in sera of patients (n=455) aged 60 years and older with hyperglycemia (${\geq}120mg/dL$ in serum). The average concentration of biochemicals in patient group was compared with those in reference group. Our data showed that the average concentrations of AST and TC in sera of senior patients with hyperglycemia were significantly increased by 27.5% (P<0.05) and 82% (P<0.05) in total group, 38.5% (P<0.05) and 75.0% (P<0.05) in sixty years' group, 16.0% (P<0.05) and 89.7% (P<0.05) in seventy years' group and 27.0% (P<0.05) and 79.5% (P<0.05) in eighty years' group, respectively. Patients with hyperglycemia showed a significant decrease in albumin level by 6.7% (total group, P<0.05), 4.5% (sixty years' group, P<0.05), 8.9% (seventy years' group, P<0.05) and 4.5% (eighty years' group, P<0.05), respectively. In conclusion, the high concentration of glucose in the senior patients with hyperglycemia may be a cause of severe liver function and lipid metabolism disorder.
Among the panel of monoclonal antibodies (mAb) against Toxoplasma gondii, mAb of Tg621 (Tg621) clone blotted 38 kDa protein which localized in the cytoplasm of tachyzoites by immunofluorescence microscopy The protein was not released into the parasitophorous vacuole during or after invasion. The cDNA fragment encoding the protein was obtained by screening a T. gondii cDNA expression library with Tg621. The full length cDNA sequence was completed with 5’-RACE as 1,592 bp, which contained open reading frame of 942 bp. The deduced amino acid sequence of Tg621 consisted of a polypeptide of 313 amino acids, with significant homology to ribosomal P proteins (RPP) of other organisms especially high to those of apicomplexan species. The expressed and purified TgRPP was assayed in western blot with the sera of toxoplasmosis patients and normal sera, which resulted in the 74.0% of positive reactions in toxoplasmosis patients whereas 8.3% in normal group. Therefore, the antibody formation against TgRPP in toxoplasmosis patients was regarded as specific for T. gondii infection and suggested a potential autoantibody.
We purified enolase from Candida albicans KNIH10 strain which was isolated from a clinical specimen in Korea. The purified enolase was used to detect anti-Candida antibodies in sera of patients with invasive candidiasis. For purification of enolase from the crude extract prepared by French pressure at 20,000 PSI, the fast performance liquid chromatography (FPLC) using DEAE-sepharose column was used. The elutes at $0.3{\sim}0.4\;M$ NaCl in FPLC was purified with homogenity in SDS-PAGE and its enzymatic activity was confirmed in sera of invasive candidiasis with candidemia patient by immunoblotting. The purified enolase indicated no signal (100% specificity) in 40 normal human sera and 75% (6/8) sensitivity in sera of candidemic patients with suspicious invasive candidiasis by immunoblotting.
Khalilpour, Akbar;Santhanam, Amutha;Lee, Chun Wei;Saadatnia, Geita;Velusamy, Nagarajan;Osman, Sabariah;Mohamad, Ahmad Munir;Noordin, Rahmah
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제14권3호
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pp.1635-1642
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2013
Helicobacter pylori antigen was prepared from an isolate from a patient with a duodenal ulcer. Serum samples were obtained from culture-positive H. pylori infected patients with duodenal ulcers, gastric ulcers and gastritis (n=30). As controls, three kinds of sera without detectable H. pylori IgG antibodies were used: 30 from healthy individuals without history of gastric disorders, 30 from patients who were seen in the endoscopy clinic but were H. pylori culture negative and 30 from people with other diseases. OFF-GEL electrophoresis, SDS-PAGE and Western blots of individual serum samples were used to identify protein bands with good sensitivity and specificity when probed with the above sera and HRP-conjugated anti-human IgG. Four H. pylori protein bands showed good (${\geq}$ 70%) sensitivity and high specificity (98-100%) towards anti-Helicobacter IgG antibody in culture-positive patients sera and control sera, respectively. The identities of the antigenic proteins were elucidated by mass spectrometry. The relative molecular weights and the identities of the proteins, based on MALDI TOF/TOF, were as follows: CagI (25 kDa), urease G accessory protein (25 kDa), UreB (63 kDa) and proline/pyrroline-5-carboxylate dehydrogenase (118 KDa). These identified proteins, singly and/or in combinations, may be useful for diagnosis of H. pylori infection in patients.
$Digoxin^{(R)}$을 복용하고 있지 않는 각27명의 만성 신부전 환자 및 신생아의 혈청에서 Gammacoat $Digoxin^{(R)}$ kit와 Amerlex Digoxin $RIA^{(R)}$ kit를 이용하여 digoxin과 교차 면역반응을 보이는 내인성 물질(이하 DLI: Digoxin-like Immunoreactivity)을 측정하여 다음의 결과를 얻었다. 1) Gammacoat $Digoxin^{(R)}$ kit로 측정시 27명의 만성 신부전 환자중 12명에서 신생아의 경우는 27명 전원에서 측정 하한치 이상의 DLI가 검출된 반면, Amerlex Digoxin $RIA^{(R)}$ kit로는 1명을 제외한 양 군의 전원에서 DLI가 관찰되지 않았다. 만성 신부전 환자에서 Gammacoat $Digoxin^{(R)}$ kit로 측정된 DLI와 혈청 BUN/Creatinine 값 사이에는 유의한 상관 관계가 없었다. 2) 만성 신부전 환자 및 신생아의 pooled sera에 가한 digoxin의 수거율은 각각 49%, 40%였다. 3) 만선 신부전 환자 및 신생아의 pooled sera에서 측정되는 DLI의 희석 curve는 정상 희석 curve와 다르다고 할 수 없었다. 4) 만성 신부전 환자의 pooled sera에서 측정되는 DLI의 16%, 그리고 신생아의 pooled sera 에서 측정되는 DLI의 20%가 trypsin에 sensitive하였다. 5) 만성 신부전 환자의 pooled sera에서 측정되는 DLI의 56%가, 그리고 신생아의 pooled sera에서 측정되는 DLI의 경우는 전체의 20%미만이 methylene chloride로 추출되었다. 이상에서 만성 신부전 환자 및 신생아의 혈청에서는 방사면역 kit의 증류에 따라 DLI가 검출되며 그 실체를 알기 위해서는 더욱 연구가 필요하다고 할 수 있었다.
The enzyme activities of creatine kinase (CK), its isoenzyme MB (CK-MB) and of lactate dehydrogenase isoenzyme 1 (LD-1) have been used for years in diagnosing patients with chest pain in order to differentiate patients with acute myocardial infarction (AMI) from non-AMI patients. These methods are easy to perform as automated analyses, but they are not specific for cardiac muscle damage. During the early 90's the situation changed. First, creatine kinase ME mass (CK-MB mass) replaced the measurement of CK-MB activity. Subsequently cardiac-specific proteins, troponin T (cTnT) and troponin I (cTnI) appeared and displacing LD-1 analysis. However, troponin concentrations in blood increase only from four to six hours after onset of chest pain. Therefore a rapid marker such as myoglobin, fatty acid binding protein or glycogen phosphorylase BB could be used in early diagnosis of AMI. On the other hand, CK-MB isoforms alone may also be useful in rapid diagnosis of cardiac muscle damage. Myoglobin, CK-MB mass, cTnT and cTnI are nowadays widely used in diagnosing patients with acute chest pain. Myoglobin is not cardiac-specific and therefore requires supplementation with some other analyses such as troponins to support the myoglobin value. Troponins are very highly cardiac-specific. Only the sera of some patients with severe renal failure, which requires hemodialysis, have elevated cTnT and/or cTnI without there being any evidence of cardiac damage. The latest studies have shown that elevated troponin levels in sera of hemodialysis patients point to an increased risk of future cardiac events in a similar manner to the elevated troponin values in sera of patients with unstable angina pectoris. In addition, the bedside tests for cTnT and cTnI alone- or together with myoglobin and CK-ME mass can be used instead of quantitative analyses in the diagnosis of patients with chest pain. These rapid tests are easy to perform and they do not require expensive instrumentation. For the diagnosis of patient with chest pain, routinely myoglobin and CK-ME mass measurements should be performed whenever they are requested (24 h/day) and cTnT or cTnI on admission to the hospital and then 4-6 and 12 hours later and maintained less than 10% in imprecision.
Objectives: Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic autoimmune disease, principally characterized by synovial inflammation of the joints. We previously reported the effect of acupuncture for RA, but the mechanism is still unclear. Various factors such as oxidative stress and angiogenesis were involved in the pathogenesis of RA, and recently, it has also been reported that cytokines also play a major role in RA. Thus, we investigated whether acupuncture could induce any changes in the levels of cytokines including vascular endothelial growth factor (VEGF), angiogenin and epidermal growth factor (EGF) as well as erythrocyte sedimentation rate (ESR), c-reactive protein (CRP), and rheumatoid factor (RF) in the sera of RA patients. Methods: The forty three patients who met the American College of Rheumatology (ACR) criteria for RA recruited. The acupuncture group (n=21) underwent 14 sessions of partially individualized acupuncture treatment for 6 weeks, and the control group had no treatment (n=13) over the same periods. We evaluated ESR, CRP and RF. In addition, to find out the mechanism of acupuncture, we assessed the changes of the cytokine activities using protein cytokine array in the sera of the patients. Results: Acupuncture significantly decreased the levels of ESR and CRP, but RF were not changed after 6-week acupuncture treatments. Moreover, acupuncture reduced the levels of VEGF, angiogenin and EGF in the sera of the patients. Interestingly, they were related with angiogenesis, which is an important process in the pathogenesis of RA. The levels of oncostatin, interleukin(IL)-$1{\alpha}$, IL-8, leptin, monocyte chemotactic protein-1, macrophage-derived chemokine, macrophage inflammatory proteins-1, platelet-derived growth factor BB and RANTES were not changed significantly. Conclusions: The effect of acupuncture for reliving RA symptoms can be partially explained by inhibition of angiogenesis factors in the sera of the RA patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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