In previous study, we have isolated Lactobacillus spp. from healthy human vagina and examined various characteristics such as antimicrobial substance production and exopolysaccharide (EPS) production. It is known that an EPS is an important factor of Lactobacillus spp. to adhere to epithelial cell. We have selected L. paracasei KLB58 having high antimicrobial activity and EPS production. In this study, we performed NTG (1-Methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine) mutagenesis to isolate an EPS deficienct mutant of KLB58 showing high cell surface hydrophobicity (CSll) compared to wild type strain. By monitoring the kinetics of the partition with hexadecane the EPS mutant was found to be far more hydrophobic than the wild type strain ; the CSH of the EPS mutant was 0.5-fold higher than the wild type strain.
Partitioning of human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) was achieved in the aqueous two-phase systems (ATPSs) using a crude extract of transgenic tobacco cell suspension culture. This study examined the effects of polyethylene glycol (PEG) molecular weight and concentration and the effects of sodium phosphate concentration in different PEG/sodium phosphate systems on the partition coefficient, K. The best ATPS system was 5% PEG 8,000/1.6 M sodium phosphate after 2 h of incubation at room temperature. In this system, hGM-CSF was partitioned in the PEG-rich phase with a yield of 57.99% and K$\_$hGM-CSF/ of 8.12. In another system, 3% PEG 10,000/1.6 M sodium phosphate, hGM-CSF was also partitioned primarily in the top phase with a yield of 45.66% and K$\_$hGM-CSF/ of 7.64 after 2 h of incubation at room temperature.
lonophores, uniquely, create specific pathways of ion permeability in model and cell membranes. Calcium-transporting ionophores of microbiological origin, such as A23187 and ionomycin, have been used as experimental tools to elucidate the physiological role of calcium as a second messenger in many cell types. These ionophores are believed to bypass the initial ligand-receptor step in the activation of cells by increasing membrane permeability to calcium. In this report, we shall discuss several naturally occurring substances that share some properties of calcium-ionophores, primarily concentrating on oxidized fatty acids. We have previously demonstrated that oxidized linoteic and arachidonic acids, obtained either by lipoxygenase catalysis or nonenzymatic processes, significantly promote calcium translocation in a two-phase partition model and modulate calcium-transporting function in the isolated sarcoplasmic reticulum vesicles obtained from mammalian hearts. We have also confirmed that calcium-ionophoric properties are due not to their general amphiphilic nature of certain lipids, but to distinct structural characteristics. Although there are some skeptical views on the occurrence of ionophores in higher organisms, increasing evidence suggests that membrane lipids or their derivatives may serve as physiological calcium-ionophores. Abnormal accumulation of lipid peroxidation products(particularly end products), however, may be associated with the general oxidative damages as seen in many pathological conditions.
Network partitioning problem is to partition a network into multiple blocks such that the size of cutset is minimized while keeping the block sizes balanced. Among these, iterative algorithms are regarded as simple and efficient which are based on cell move of Fiduccia and Mattheyses algorithm, Sanchis algorithm, or Kernighan and Lin algorithm. All these algorithms stipulate balanced block size as a constraint that should be satisfied, which makes a cell movement be inefficient. Park and Park introduced a balancing coefficient R by which the block size balance is considered as a part of partitioning cost, not as a constraint. However, Park and Park's algorithm has a square time complexity with respect to the number of cells. In this paper, we proposed Bucket algorithm that has a linear time complexity with respect to the number of cells, while taking advantage of the balancing coefficient. Reducing time complexity is made possible by a simple observation that balancing cost does not vary so much when a cell moves. Bucket data structure is used to maintain partitioning cost efficiently. Experimental results for MCNC test sets show that cutset size of proposed algorithm is 63.33% 92.38% of that of Sanchis algorithm while our algorithm satisfies predefined balancing constraints and acceptable execution time.
The methanol (MeOH) extract of the rhizome of Alpinia officinarum Hance (Zingiberaceae) demonstrated a potent inhibition on the proliferation of cultured human tumor cell lines such as MES-SA (human uterine carcinoma cell line), MESSA/DX5 (multidrug resistant subline of MES-SA), HCT-15 (human colorectal adenocarcinoma cell line), HCT15/CL02 (multidrug resistant subline of HCT15). The MeOH extract was fractionated into four portions by serial solvent partition, ie., methylene chloride (CH2Cl2) soluble part, ethylacetate (EtOAc) soluble part, n-butanol (BuOH) soluble part and remaining water layer. Among them, the $CH_2Cl_2$ soluble part of the extract exhibited a most potent inhibition on the proliferation of tested tumor cell lines. Bioassay-guided fractionation of the $CH_2Cl_2$ soluble part led to the isolation of five diarylheptanoid and two flavonoid constituents, i. e., galangin (1), 7-(4"-hydroxy-3"-methoxyphenyl)-1-phenylhept-4-en-3-one (2), 1,7-diphenyl-5-hydroxy-3-heptanone (3), trans,trans-1-(3'-methoxy-4'-hydroxyphenyl)-7-phenyl-5-ol-4,6-dien-3-heptanone (4), 5-methoxy-7-(4"-hydroxy-3"-methoxyphenyl)-1-phenyl-3-heptanone (5), kaempferide (6), 5-hydroxy-7-(4"-hydroxy-3"-methoxyphenyl)-1-phenyl-3-heptanone (7). Structures of the isolated active components (1 - 7) were established by chemical and spectroscopic means.
Lipid peroxidation means the oxidative degradation of lipids. The process from the cell membrane lipids in an organism is generated by free radicals, and result in cell damage. Phlorotannins, well-known marine brown algal polyphenols, have been utilized in functional food supplements as well as in medicine supplements to serve a variety of purposes. In this study, we assessed the potential anti-lipid peroxidation activity of phlorofucofuroeckol-A (PFF-A), one of the phlorotannins, isolated from Ecklonia cava by centrifugal partition chromatography in 2,2-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)-stimulated Vero cells and zebrafish system. PFF-A showed the strongest scavenging activity against alkyl radicals of all other reactive oxygen species (ROS) and exhibited a strong protective effect against ROS and a significantly strong inhibited of malondialdehyde in AAPH-stimulated Vero cells. The apoptotic bodies and pro-apoptotic proteins Bax and caspase-3, which were induced by AAPH, were strongly inhibited by PFF-A in a dose-dependent manner and expression of Bcl-xL, an anti-apoptotic protein, was induced. In the AAPH-stimulated zebrafish model, additionally PFF-A significantly inhibited ROS and cell death, as well as exhibited a strong protective effect against lipid peroxidation. Therefore, these results suggest that PFF-A has excellent protective effects against ROS and lipid peroxidation induced by AAPH in both an in vitro Vero cell model and an in vivo zebrafish model.
Background: Turmeric ($Curcuma$$longa$) has been shown to possess anti-inflammatory, antioxidant and antitumor properties. However, despite the progress in research with $C.$$longa$, there is still a big lacuna in the information on the active principles and their molecular targets. More particularly very little is known about the role of cell cycle genes $p57^{kip2}$ and Rad9 during chemoprevention by turmeric and its derivatives especially in prostate cancer cell lines. Methods: Accordingly, in this study, we have examined the antitumor effect of several extracts of $C.$$longa$ rhizomes by successive fractionation in clonogenic assays using highly metastatic PC-3M prostate cancer cell line. Results: A mixture of isopropyl alcohol: acetone: water: chloroform: and methanol extract of $C.$$longa$ showed significant bioactivity. Further partition of this extract showed that bioactivity resides in the dichloromethane soluble fraction. Column chromatography of this fraction showed presence of biological activity only in ethyl acetate eluted fraction. HPLC, UV-Vis and Mass spectra studies showed presence three curcuminoids in this fraction besides few unidentified components. Conclusions: From these observations it was concluded that the ethyl acetate fraction showed not only inhibition of colony forming ability of PC-3M cells but also up-regulated cell cycle genes $p57^{kip2}$ and Rad9 and further reduced the migration and invasive ability of prostate cancer cells.
Objective: Interleukin-6 (IL-6) is a T cell-derived B cell stimulating factor which plays an important role in inflammatory diseases. In this study, the pharmacokinetic properties of LMT-28 including physicochemical property, in vitro liver microsomal stability and an in vivo pharmacokinetic study using BALB/c mice were characterized. Methods: LMT-28 has been synthesized and is being developed as a novel therapeutic IL-6 inhibitor. The physicochemical properties and in vitro pharmacokinetic profiles such as liver microsomal stability and Madin-Darby canine kidney (MDCK) cell permeability assay were examined. For in vivo pharmacokinetic studies, pharmacokinetic parameters using BALB/c mice were calculated. Results: The logarithm of the partition coefficient value (LogP; 3.65) and the apparent permeability coefficient values (Papp; 9.7×10-6 cm/s) showed that LMT-28 possesses a moderate-high cell permeability property across MDCK cell monolayers. The plasma protein binding rate of LMT-28 was 92.4% and mostly bound to serum albumin. The metabolic half-life (t1/2) values of LMT-28 were 15.3 min for rat and 21.9 min for human at the concentration 1 μM. The area under the plasma drug concentration-time curve and Cmax after oral administration (5 mg/kg) of LMT-28 were 302±209 h·ng/mL and 137±100 ng/mL, respectively. Conclusion: These data suggest that LMT-28 may have good physicochemical and pharmacokinetic properties and may be a novel oral drug candidate as the first synthetic IL-6 inhibitor to ameliorate mammalian inflammation.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.3
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pp.480-486
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2004
Despite many therapeutic advances in the understanding of the processes in carcinogenesis, overall mortality statistics are unlikely to change until there is reorientation of the concepts for the use of natural products as new anticarcinogenic agents. In this study, we investigated the anticarcinogenic activity, antioxidant and DPPH scavenging activity of Sargassum fulvellum (SF). SF was extracted with methanol, which was further fractionated into five different types: hexane (SFMH), ethylether (SFMEE), ethyl acetate (SFMEA), butanol (SFMB) and aqueous (SFMA) partition layers. We determined the cytotoxic effect of these layers on human cancer cells by MTT assay. Among various partition layers of SF, at starting concentration of 100 $\mu\textrm{g}$/mL, SFMEE showed very high cytotoxicity which were 92, 90 and 84% and kept high throughout 5 concentration levels sparsed by 100 $\mu\textrm{g}$/mL against all three human cancer cell lines: HepG2, HT-29 and HeLa. SFMEA showed a low cytotoxicity at the beginning concentration level, but as the concentration became denser, growth inhibition effect of cancer cell lines started to increase and at 500 $\mu\textrm{g}$/mL, it hit the highest, which were 91, 96 and 98% against the same three cell lines as above. We observed QR induced effect in all fraction layers of SF. SFMEE showed similar tendensy of QR induced effect as did against cytotoxicity. The QR induced effect of SFMEE on HepG2 cells at 25 $\mu\textrm{g}$/mL concentration indicated 3 times higher than the control value of 1.0 and SFMH tended to be concentration-dependent on HepG2 cells. At 100 $\mu\textrm{g}$/mL, the QR induced effects resulted a ratio, which was 2.5 times higher than the control value. In search for antioxidation effects of SF extract and partition layer, the reducing activity on the 1, 1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH) radical scavenging potential was sequentially screened. The SFM has similar antioxidant activity as to BHT and vitamin C groups.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.31
no.1
s.49
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pp.43-49
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2005
Recently, according as people who have sensitive skin increase, we've been giving more importance to the safety of cosmetics. Especially, preservative is known to be one of the main stimuli which cause side-effects of cosmetics. However, there have been few reports describing cell cytotoxicity, skin penetration, oil-aqueous phase partition, anti-microbial activity of preservatives and their correlation with skin irritation. The study is aimed to develop low irritable preservative system with phenoxyethanol, one of the most commonly used preservatives in cosmetics, considering various factors mentioned above. According to our results of cell cytotoxicity against human normal fibroblasts by means of MTT assay, phenoxyethanol showed the lowest cytotoxicity when compared to other preservatives tested (cytotoxicity: pro-pylparaben > butylparaben > ethylparaben > methylparaben > triclosan > phenoxyethanol), but human patch test for assessing shin primary irritation revealed that phenoxyethanol has higher skin irritation than methylparaben and triclosan. We performed in vitro skin penetration test using horizontal Franz diffusion cells with skin membrane prepared from hairless mouse (5 ${\~}$ 8 weeks, male) to evaluate the rate of skin penetration of preservatives. From the results, we found that the higher irritable property of phenoxyethanol in human skin correlates with its predominant permeability (skin penetration: phenoxyethanol > methylparaben > ethylparaben > propylparaben > butylfaraben > triclosan). Therefore, we made an effort to reduce skin permeability of phenoxyethanol and found that not only the rate of skin penetration of phenoxyethanol but also its skin irritation is dramatically reduced in formulas containing oils with low polarity. In the experiments to investigate the effect of oil polarity on the oil-aqueous phase partition of phenoxyethanol, more than $70\%$ of phenoxyethanol was partitioned in aqueous phase in formulas containing oils with low polarity, while about $70 {\~} 90\%$ of phenoxyethanol was partitioned in oil phase in formulas containing oils with high polarity. Also, in aqueous phase phenoxyethanol showed greater anti-microbial activity. Conclusively, it appears that we can develop less toxic preservative system with reduced use dosage of phenox-yethanol and its skin penetration by changing oil composition in formulas.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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