• 대한수의학회지
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• 제45권1호
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• pp.127-130
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• 2005

The objective of present study was to ascertain sex determination for individual identification, parentage control, and sex chromosome anomalies in horse. PCR amplification products of the equine sex determining region of the Y chromosome gene (SRY) and amelogenin gene (AMEL) were detected by using agarose gel electrophoresis. A normal sire and foal II showed 1 SRY band (430 bp) and 3 AMEL (AMELX, AMELY, and AMELX/Y) band, 175 bp, 160 bp, 190 bp, respectively, and a normal dam and foal I showed a single AMELX band (175 bp). These results enables a quick diagnosis for sex determination prior to cytogenetic analysis.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제7권1호
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• pp.27-35
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• 2005

Eighty-five different cultivars of Brassica rapa, B. juncea, B. nap us, B. carinata, B. oleracea and hexaploid Brassica collected from Bangladesh, Japan, China and Denmark were analyzed by SDS-PAGE for seed and leaf protein variations, using esterase, acid phosphatase and peroxidase isozyme analysis. Ten polymorphic bands were identified from seed protein however no identifiable polymorphic band was found in the leaf protein. Polymorphic markers clearly distinguished the different Brassica species as well as yellow sarson (YS) and brown seeded (BS) cultivars of B. rapa. The $F_1$ cross between YS and brown seeded cultivars showed the existance of all poly-morphic bands of the respective parents. The Bangla-deshi and Japanese cultivars of B. rapa differed in the amount of seed protein. In the case of isozyme analysis, esterase showed the highest number of polymorphic bands (13) followed by acid phosphatase (9) and peroxidase (5). These polymorphic markers were very effec-tive for classification of all the species studied in this experiment. In parentage tests using isozymes, the hybridity of intra-and-interspecific crosses of almost all the seedlings could be identified from their respective cross combinations. Esterase polymorphism showed a clear differentiation between YS and BS types of B. rapa. In addition, two esterase polymorphic markers were iden ified to differentiate some cultivars of B. juncea. Segregation patterns in these two esterase bands showed a simple Mendelian monohybrid ratio of 3:1 in $F_2$, 1:1 in test cross and 1:0 in back cross progenies. No polymorphic band was identified to distinguish different cultivars of the same species by acid phosphatase or peroxidase. Polymerase Chain Reaction (PCR) was carried out with seed coat color specific marker of B. juncea. The yellow seeded cultivars produced a strong band at 0.5 kb and weak band 1.2 kb. In the addition of these two specific bands, Japanese yellow-seeded cultivars expressed two more weak bands at 1.0 kb and 1.1 kb. Where the brown seeded cultivars generated a single strong band at 1.1 kb. In segregating population, the yellow seed coat color marker segregated at a ratio 15 (brown) : 1 (yellow), indicating the digenic inheritance pattern of the trait.

• 생명과학회지
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• 제20권3호
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• pp.381-387
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• 2010

농가에 보급된 제주흑우 수정란이식 및 인공수정 생산축의 확인을 위하여 분자유전학적 실험기법을 이용한 개체 추척을 수행하였다. 유전자 marker 체계는 ISAG 권장 MS marker 11종, 예비시험 후 선발된 SAES marker 11종, 흑모색 관련 MC1R과 ASIP 유전자들을 조합하여 분석하였다. 분석결과 부모 정보가 없는 상태에서의 부권 부정율이 국제권장기준보다 높은 수준을 보였으며, 형매간 동일개체출현률은 $5.3{\times}10^{-10}$으로 조사되었다. 친자검정 결과 후보축에 대한 후보 부, 모, 부모 모두가 확인되는 경우는 각각 77.0, 54.0, 40.5%였다. 부-모-자간 trio-mismatch가 전혀 없는 수정란이식 개체는 공급 수정란 대비 14.7%로 확인되었고, 전체 후보축군 중 32.4%는 후보 부와의 mismatch가 없는 인공수정에 의해 생산된 개체들로 판정하였다. ISAG marker들만을 분석한 결과에서는 7두가 동일한 3가지 유전자형 조합을 나타내었으나, ISAG/SAES marker들을 조합했을 때에는 2두에서만 동일 유전자형 조합을 나타내었다. MS와 모색유전자 분석자료를 모두 조합했을 때는 조사된 모든 개체들이 서로 구분되었다. 현재의 제주흑우집단이 소수 핵군에서 인공수정과 수정란이식 등 생명공학 기법으로 육성된 집단이기에 제주흑우집단의 유전적 다양성은 낮게 나타났다. 본 연구는 유전자 개체식별과 혈통관리 체계의 구축을 위해서는 적어도 20개 이상의 MS marker와 모색관련 유전자형 자료가 필수적으로 활용되어야함을 제안하고 있으며, 연구결과는 향후 제주흑우의 분자육종에 있어 유용한 자료가 될 것으로 시사하고 있다.

• 한국어류학회지
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• 제32권4호
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• pp.210-221
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• 2020

1973년 이스라엘 잉어(향어)가 한국에 양식을 위해 도입된 이후 현재까지 품종개량에 대한 연구가 전무한 실정이다. 본 연구는 지속적인 근친교배로 인해 낮아진 국내 이스라엘 잉어의 유전적 다양성을 회복하고, 성장이 빠르고 비늘 개선을 위해 유전적 기반 교잡육종 연구를 수행하였다. 본 연구는 한국의 이스라엘 잉어의 품종개량을 위하여 국내 이스라엘 잉어와 중국의 송푸거울 잉어를 이용하여 4개의 교배구를 설정하여 F1을 생산하였다. 친어의 형태 및 유전학적 거리를 고려하여 교배지침을 설정하였다. 본 연구는 유전적 다양성과 친자분석을 위하여 microsatellite 마커와 유전형 데이터를 활용하였다. 그 결과, 국내 친어의 평균 대립유전자와 기대이형접합율은 8.3과 0.743이며, F1은 13.0과 0.764이었다. 국내 이스라엘 잉어와 중국 송푸거울 잉어의 품종 간 교배를 통하여 국내 이스라엘 잉어보다 F1의 유전적 다양성이 회복되었음을 나타내었다. 한국의 일반 이스라엘 잉어는 17개월에 1.7 kg이었고, 개량된 이스라엘 잉어는 2.2 kg에 도달하였다. 또한, KC(한국×중국) 교배그룹의 비늘수치는 2.52, 친어그룹의 비늘수치는 3.15로 나타나 F1은 친어보다 낮은 비늘수치(0.63)를 나타내었다. 품종개량된 이스라엘 잉어(F1; CK, KC)는 친어그룹 (F0)보다 비늘이 20% 개선되었으며, 일반 이스라엘 잉어에 비해 체중(27%)과 비늘(25%)이 향상되었다. 유전적 데이터를 기반으로 개발된 이스라엘 잉어는 상업성이 좋아 국내 이스라엘 양식업에 크게 기여할 것으로 생각된다.

• 생명과학회지
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• 제18권6호
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• pp.902-906
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• 2008

경주지방에서 사육 중인 경주개(동경이) 51두를 대상으로 8개의 microsatellite marker을 이용하여 DNA형을 분석한 결과 대립 유전자 수는 $4{\sim}12$개(평균 8.5개)로 검출되었으며 Expected heterozygosit와 PIC는 각각 $0.6162{\sim}0.8746$(평균 0.7587)와 $0.5461{\sim}0.8512$(평균 0.7167)으로 나타났고, PEZ3, PEZ6, PEZ12, FHC2054 marker는 PIC가 0.7이상으로 나타났다. 이들 marker는 향후 동경이의 개체식별 및 친자확인에 유용하게 쓰일 수 있다. 공시재료 51두 중 사육가에 의해 혈통이 알려진 5두를 대상으로 microsatellite marker를 이용하여 혈통을 분석한 결과 3두에서 현재 가계도와 일치하지 않았다. 따라서 앞으로 더 많은 연구를 통해서 동경이에 대한 체계적인 혈통 정립이 이루어져야 할 것이다.

• Animal Bioscience
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• 제34권9호
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• pp.1460-1465
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• 2021

Objective: The study aimed to evaluate the diversity of donkey populations by comparing with the diversity of Thoroughbred and Jeju Halla horses; identified breeding backgrounds can contribute to management and conservation of donkeys in South Korea. Methods: A total of 100 horse (50 Thoroughbreds and 50 Jeju Halla horses) and 79 donkeys samples were genotyped with 15 microsatellite markers (AHT4, AHT5, ASB2, ASB17, ASB23, CA425, HMS1, HMS2, HMS3, HMS6, HMS7, HTG4, HTG10, LEX3, and VHL20), to identify genetic diversity and relationships among horses and donkeys. Results: The observed number of alleles per locus ranged from 1 (ASB17, HMS1) to 14 (AHT5), with a mean value of 4.87, 8.00, and 5.87 in Thoroughbreds, Jeju Halla horses, and donkeys, respectively. Of the 15 markers, AHT4, AHT5, ASB23, CA425, HMS2, HMS3, HTG4, HTG10, and LEX3 loci had relatively high polymorphism information content (PIC) values (PIC>0.5) in these three populations. Mean levels of genetic variation were H_E = 0.6721 and H_O = 0.6600 in Thoroughbreds, H_E = 0.7898 and H_O = 0.7100 in Jeju Halla horses, and H_E = 0.5635 and H_O = 0.4861 in donkeys. Of the 15 loci in donkeys, three loci had negative inbreeding coefficients (FIS), with a moderate mean FIS (0.138). The FIS estimate for the HTG4 marker was highest (0.531) and HMS6 marker was lowest (-0.001). The total probability of exclusion value of 15 microsatellite loci was 0.9996 in donkeys. Conclusion: Genetic cluster analysis showed that the genetic relationship among 79 donkeys was generally consistent with pedigree records. Among the three breeds, donkeys and Thoroughbred horses formed clearly different groups, but the group of Jeju Halla horses overlapped with that of Thoroughbred horses, suggesting that the loci would be suitable for donkey parentage testing. Therefore, the results of this study are a valid tool for genetic study and conservation of donkeys.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제44권4호
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• pp.391-398
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• 2002

본 연구는 제주마집단(GroupⅠ, 제주도 축산진흥원 사육, 137두; Group II, 농가사육, 30두)과 더러브렛 품종집단(한국마사회 육성마목장, 43두)을 이용하여 SSCP를 통한 Transferrin exon 13, 15, 16의 다형현상 확인과 각 SSCP 유전자형의 염기서열을 분석하기 위하여 수행하였다. 공시재료에서 SSCP에서 관찰된 band에 의한 분석결과 대립인자는 exon 13, 15 및 16에서 각각 2개(A,B), 3개(A,B,C) 및 3개(A,B,C)가 존재하는 것으로 확인되었다. Transferrin exon 13에서 제주마와 더러브렛 집단 모두 A인자가 매우 높게 분포하고 있음이 확인되었다. exon 15에서는 그룹간의 빈도차를 확인 할 수 있었다. exon 15에서 높게 출현되고 있는 유전자형은 GroupⅠ에서 AB (0.445)형, GroupⅡ에서 AA(0.367)형, 더러브렛 품종에서는 AA(0.767) 유전자형이 가장 높은 빈도로 출현되어 제주마 집단간 또는 품종간에 빈도의 차이를 관찰할 수 있었다. exon 16에서는 GroupⅠ은 A, B, C 인자, GroupⅡ에서는 A 및 B 2종류의 인자형이 확인되었고 더러브렛 품종에서는 A인자형만 검출되었다. exon 16에서도 그룹간에 유전인자의 빈도차를 확인 할 수 있었다. 또한 exon 13, 15 및 16의 조합으로 형성된 개체의 유전자형은 전체 13종류가 출현되었고 이 조합도 그룹간 차이를 확인 할 수 있었다. SSCP 유전자형에 따른 각 인자들에 대한 염기서열을 분석한 결과 exon 13과 16에서 각 1개의 새로운 SNP가 발견되었다. 본 연구결과 제주마 transferrin exon 13, 15, 16은 더러브렛 품종에서와 같이 높은 대립인자의 다형성을 보였으며, 각 Group 간 빈도차를 확인 할 수 있었다.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제58권11호
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• pp.40.1-40.5
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• 2016

Background: Currently about 26,000 horses are breeding in Korea and 57.2% (14,776 horses) of them are breeding in Jeju island. According to the statistics published in 2010, the horses breeding in Jeju island are subdivided into Jeju horse (6.1%), Thoroughbred (18.8%) and Halla horse (75.1%). Halla horses are defined as a crossbreed between Jeju and Thoroughbred horses and are used for horse racing, horse riding and horse meat production. However, little research has been conducted on Halla horses because of the perception of crossbreed and people's weighted interest toward Jeju horses. Method: Using 17 Microsatellite (MS) Markers recommended by International Society for Animal Genetics (ISAG), genomic DNAs were extracted from the hair roots of 3,880 Halla horses breeding in Korea and genetic diversity was identified by genotyping after PCR was performed. Results and conclusion: In average, 10.41 alleles (from 6 alleles in HTG7 to 17 alleles in ASB17) were identified after the analysis using 17 MS Markers. The mean value of $H_{obs}$ was 0.749 with a range from 0.612(HMS1) to 0. 857(ASB2). Also, it was found that $H_{\exp}$ and PIC values were lowest in HMS1 (0.607 and 0.548, respectively), and highest in LEX3(0.859 and 0.843, respectively), and the mean value of $H_{\exp}$ was 0.760 and that of PIC was 0.728. 17 MS markers used in this studies were considered as appropriate markers for the polymorphism analysis of Halla horses. The frequency for the appearance of identical individuals was $5.90{\times}10^{-20}$ when assumed as random mating population and when assumed as half-sib and full-sib population, frequencies were $4.08{\times}10^{-15}$ and $3.56{\times}10^{-8}$, respectively. Based on these results, the 17 MS markers can be used adequately for the Individual Identification and Parentage Verification of Halla horses. Remarkably, allele M and Q of ASB23 marker, G of HMS2 marker, H and L of HTG6 marker, L of HTG7 marker, E of LEX3 marker were the specific alleles unique to Halla horses.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제14권8호
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• pp.1188-1195
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• 2001

A tetraparental chimeric bull was successfully produced by aggregating bovine IVF embryos of F1 (female Holstein${\times}$male Japanese Black) and F1(female Japanese Brown${\times}$male Limousin) and culturing in vitro without the zona pellucida at Yamaguchi Research Station in Japan. In the microsatellite genotyping, 12% (28/228) microsatellite primer sets ware potentially useful for this parentage analysis in the chimeric bull, 78.6% (22/28) of microsatellite present in the chimeric bull were uniquely contributed from the Japanese Black and 21.4% (6/28) from Limousin. This chimeric bull semen was used in producing IVF embryos. The chromosome preparations were made from peripheral lymphocytes. Based on chromosome analysis the Chimera had apparently normal chromosomes (29 acrocentric pairs, one large sub metacentric X chromosome and one small sub metacentric Y chromosome). The proportion of acrosome reacted spermatozoa after 1 h of incubation was higher (p<0.01) with the Chimera than with the Holstein and in Japanese Brown bulls. But did not differ from Japanese Black and Limousin bull sperm. Fertilization rates observed after 5 h of sperm-oocyte incubation with Chimera sperm were higher (p<0.05) than with Japanese Brown and (p<0.01) than with Holstein sperm, but did not differ from Japanese Black and Limousin sperm. The cleavage rates of IVF oocytes inseminated with Chimera sperm were also higher (p<0.001) compared with Holstein, (p<0.01) Japanese Brown and (p<0.05) Limousin, but did not differ from Japanese Black sperm. The blastocyst rates of IVM oocytes inseminated with sperm were higher (p<0.05) than in Limousin, Japanese Brown and Holstein, but did not differ from Japanese Black. Chimeric cattles were produced by aggregation of parthenogenetic (Japanese Brown) and in vitro fertilized (Holstein) bovine embryos at the Yamaguchi Research Station in Japan and by aggregation of parthenogenetic (Red Angus) and in vitro fertilized (Holstein) embryos at the St. Gabriel Research Station in Louisiana. The aggregation rate of the reconstructed demi-embryos cultured in vitro without agar embedding was significantly lower than with agar embedding. The aggregation was also lower when the aggregation resulted from a whole parthenogenetic and IVF-derieved embryos cultured without agar than when cultured with agar. The development rate to blastocysts, however, was not different among the treatment. To verify parthenogenetic and the cells derieved from the male IVF embryos in blastocyst formation, 51 embryos were karyotyped, resulting in 27 embryos having both XX and XY chromosome plates in the same sample, 14 embryos with XY and 10 embryos with XX. The viability and the percentage of zonafree chimeric embryos at 24 h following cryopreservation in EG plus T with 10% PVP were significantly greater than those cryopreserved without PVP. Pregnancies were diagnosed in both stations after the transfer of chimeric blastocysts. Twin male and single chimeric calves were delivered at the Yamaguchi station, with each having both XX and XY chromosomes detected. Three pregnancies resulted from the transfer of 40 chimeric embryos at the Louisiana station. Two pregnancies were Jost prior to 4 months and one phenotypically chimeric viable male born.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제52권2호
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• pp.91-96
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• 2010

본 연구는 돼지고기 원산지 식별에 활용될 수 있는 최적의 SNP marker set을 개발 및 확립하기 위해 수행되었다. 선발된 51개의 SNP marker들의 효율성, 다형성 및 독립성 검증을 실시하였으며 51개의 SNP marker set은 MassARRAY method에 의해서 Multiplex-PCR panel 4개로 디자인 되었으며, 농장별, 생산조합별, 모돈별, 웅돈별로 효과적으로 고유 유전자형 지문분석이 가능하게 제작되었고, 다른형태의 SNP 유전자형 분석 플랫폼에 적용될 수 있는 적절한 마커 갯수이다. 또한 51개의 SNP marker set을 적용하여 모의 실험 및 친자감별확율을 계산하였을 때 무작위 교배 집단(PI), 반형매 교배집단($PI_{half-sib}$)과 전형매 교배집단($PI_{sibs}$)을 통해 모의 실험을 한 결과 $5.63{\times}10^{-33}$, $4.35{\times}10^{-15}$ 그리고 $1.32{\times}10^{-15}$로 분석되었으며 친자확인률에서도 모두 100%에 가까운 확률값을 나타내었다. 따라서 본 연구에서 개발된 SNP marker set을 이용하여 돈육제품의 원산지를 추적에 이용한다면 개별돼지의 고유한 DNA 지문 정보를 생성할 뿐만 아니라, 이를 통하여 모돈과 웅돈을 식별하여 농장원산지를 확인이 가능 할 수 있을 것으로 사료된다. 따라서 국내산 돼지의 생산에서부터 돈육제품으로의 소비까지 이력추적이 가능한 도구로 제공 될 것이다.