• 한국어병학회지
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• 제33권2호
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• pp.177-184
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• 2020

In an attempt to find a feed additive showing an anti-scuticociliate effect, extracts from Citrus unshiu Peel were tested against virulent scuticociliate infection. The most effective anti-scuticociliate killing activity in vitro was observed in the extract squeezed from homogenizing water-soaked dried tangerine peel (DTP). In addition, we have investigated the effect of DTP as a feed additive on growth rate and anti-parasitic activity of olivaceus flounder. DTP extract added diets (0.1, 0.5, 1, and 5%/feed weight) were fed to flounder for 7 days for checking a growth rate and 14 days for a challenging test. As a result, the feed conversion rate was significantly improved only in 1% DPT extract group compared to the control and 0.5% DTP extract fed group showed 100% of survival rate in the challenge test, all of which indicating that DTP extract would be a potential feed additive against scuticociliatosis.

• 한국어병학회지
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• 제6권2호
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• pp.163-175
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• 1993

1. 과산화물가가 90.4mEq/kg인 산화사료를 180일간 투여하여 Ceroid증이 발생한 어류를 1991년 10월 1일부터 11월 4일까지 Ceroid증의 치료실험을 행하였다. 2. 치료하기 위하여 정상사료(POV : 15.5mEq/kg)에 glutathione을 첨가하지 않은 실험군, 10, 20, 30, 40mg/kg/day을 첨가한 실험군 그리고 산화사료(POV : 90.4mEq/kg)만 투여한 대조군에서의 성장을 비교한 결과 대조군 및 무첨가한 실험군에서는 거의 성장이 이루어지지 않았으며, glutathione을 첨가한 모든 실험군에 있어서는 실험군별 차이없이 비슷하게 나타났다. 3. 병리조직학적으로는 glutathione 10, 30mg/kg 첨가한 실험군에서는 투여 7일째부터 ceroid 침착량 및 손상된 조직의 회복상태를 나타나기 시작하여 투여 21일 이후부터는 거의 정상적인 조직상을 나타내었다. glutathione 10mg/kg과 30mg/kg 첨가한 실험군별 조직회복상태는 10mg/kg/day 첨가한 실험군 보다 30mg/kg/day 첨가한 실험군에서가 치료효과가 양호한 것으로 나타났다.

• 한국어병학회지
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• 제24권2호
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• pp.75-84
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• 2011

우리나라 양식 넙치에서 분리한 VHSV (KR'01-1)의 glycoprotein 아미노산 배열을 기초로 단백질 전환 구조상 유연성, 친수성 및 항원성이 높고, 표면에 노출되어 있을 가능성(surface probability)이 높다고 분석되는 3개의 peptide (Gp1, Gp2, Gp3)를 선정하였다. 정제한 바이러스 입자 및 3개의 합성 peptide에 대한 polyclonal 항체를 제작하여 항원성 분석을 실시한 결과, 합성 peptide로 제작한 모든 항혈청은 Western blotting 결과 VHSV의 구조단백질과 특이적으로 결합하는 나타났으며, 이 가운데 Gp1 및 Gp2 합성 peptide에 대한 항혈청은 양식 넙치에서 분리한 VHSV를 중화시키는 것으로 나타나, peptide-based antigen의 이용 가능성을 제시하였다.

• 한국어병학회지
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• 제18권3호
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• pp.205-214
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• 2005

최근 2년간 동해안 지역 넙치 양식장의 양식 넙치에 피해를 일으키는 P. damselae 균을 분리하였으며, 분리된 P. damselae의 16s rRNA 염기 서열은 P. damselae subsp. damselae ATCC 33539와 99%의 상동성을 나타내었다. 분리 균주는 Pedersen et al.(1997)의 biotype과 비교한 결과, biotype No 8과 동일하게 나타났으며, P. damselae subsp. damselae ATCC 33539의 LPS와 동일한 단백질 패턴을 나타내었다. 넙치의 병어로부터 P. damselae와 Vibrio 속 세균의 감염 상태를 조사한 결과, P. damselae가 가장 높은 감염율을 나타내었고, 그 다음으로 V. anguillarum, V. splendidus, V. harveyi와 V. ordalii순으로 감염율이 나타났다.

• 한국어병학회지
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• 제21권3호
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• pp.189-199
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• 2008

This paper aims to compare difference with the in an ability of their resistance and survival against in a non-specific defence mechanism of the olive flounder, between the virulent and the avirulent E. tarda strains. The tested E. tarda strains, we divided into the virulent and the avirulent strain groups on the basis of a value of 50% lethal dose (LD50) for the olive flounder weighed 10.3 g in average. The strains of LD50 101.6~104.2 cfu/fish were grouped as virulent strains, such as KE-1, KE-3, KE-5 and FSW910410. The group of avirulent strains as LD50 exceeded 108.7 cfu/fish were included the strains, SU100 and AL92448. A test was conducted to understand the survival ability of each strain in the mucus of the skin and the intestine of olive flounders. The results showed KE-1, KE-3, KE-5 and FSW910410 were highly to survive between 6 hours and 24 hours in intestine. The survival ability in the bile of olive flounder the number of avirulent strains declined during incubation but the virulent strain showed the number of alive bacteria having sustained or increased. In the test for the survival of bacteria in fresh sera of olive flounder, the virulent strains also had tendency to multiply. Concerning the tested bacteria internalization into the head kidney macrophages and the intracellurar replication in the macrophages of olive flounder. The virulent strains exhibited strong internalization, followed high rate replication. According to the results, virulent strains of E. tarda revealed more ability to resist and survive in the face of humoral and cellular defence factors than avirulent strains.

• 한국어병학회지
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• 제10권2호
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• pp.97-111
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• 1997

1995년 겨울 경북 구룡포에 있는 축제식 양식장에서 사육중이던 넙치(평균 체장 : 31cm, 평균체중 : 300g)에 백점병이 발생하여 대량 폐사를 일으켰다. 감염 넙치로부터 병리조직학적, 원인충의 형태학적 및 생물학적 특성을 조사한 결과, 아가미 및 지느러미의 병리조직학적 검사에서 많은 섬모충들이 상피 하층으로 뚫고 들어감으로써 기생 부위의 상피 세포와 점액 세포가 증식을 일으킨 것을 볼 수 있었고 병어의 지느러미, 체표 및 아가미에서 작은 백점을 나타낸 충체는 기생성 섬모충 Cryptocaryon irritans의 특징을 갖추고 있었다. 그러나 이 충의 증식 방법은 다분열증식법 이외에도 출아와 다분열을 혼합한 또하나의 증식법(혼합 증식법)을 가진 것으로 조사되었으며 수온 $16^{\circ}C$에서는 위와 같은 두가지의 증식 방법이 약 3대 2의 비율로 나타났고 다분열 증식형의 충체는 8~14일만에, 혼합 증식형의 충체는 13~15일 만에 각각 자충을 방출하였다. 수온 $12\sim24^{\circ}C$의 조건에서 염분 농도 범위 $0\sim35\%_{\circ}$를 $5\%_{\circ}$ 간격으로 조절하여 충체의 생존능력을 살펴본 결과 다분열 증식형의 총체는 $12^{\circ}C$에서 $30\%_{\circ}$이하, $16^{\circ}C$에서 $20\%_{\circ}$ 이하, $20^{\circ}C$에서 $15\%_{\circ}$이하 그리고 $24^{\circ}C$에서 $25\%_{\circ}$ 이하에서 각각 폐사된 반면 혼합 증식형의 충체는 $12^{\circ}C$에서 $20\%_{\circ}$ 이하, $16\sim20^{\circ}C$에서 $15\%_{\circ}$ 이하 그리고 $24^{\circ}C$에서 $25\%_{\circ}$ 이하에서 각각 폐사를 나타내어 저수온($12\sim16^{\circ}C$)에서 혼합 증식형의 충체가 다분열 증식형의 충체보다 다소 낮은 염분 농도에서 생존이 가능함을 보여주었다. 수온 $12\sim24^{\circ}C$의 조건에서 탈낭 소요 시간 및 탈낭률은 다분열 증식형의 총체가 $12^{\circ}C$에서 8일 및 30%, $16^{\circ}C$에서 6.5일 및 50%, $20^{\circ}C$에서 5.5일 및 75% 그리고 $24^{\circ}C$에서 7일 및 10%를 나타낸 반면 혼합 증식형의 충체는 $12^{\circ}C$에서 15.5일, $16^{\circ}C$에서 14일 및 76.6%, $20^{\circ}C$에서 12일 및 72.2% 그리고 $24^{\circ}C$에서 10일 및 31.6%를 나타내어 모든 수온 조건에서 혼합 증식형의 충체가 다분열 증식형의 충체 보다 탈낭 소요 시간이 길며 수온 $16^{\circ}C$에서 최고의 탈낭율을 나타내어 저수온에 다소 안정적인 것을 보여주었다.

• 한국어병학회지
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• 제22권3호
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• pp.263-273
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• 2009

우리나라에서 Streptococcus parauberis는 넙치, Paralichthys olivaceus와 강도다리, Platichthys stellatus의 병원체로 보고되는 사례가 증가하고 있다. 본 연구에서는 S. parauberis에 의한 연쇄 구균병의 수온에 대한 영향 (14${^{\circ}C}$ 및 21${^{\circ}C}$)과 넙치에 대한 병원성을 확인하고자 하였다. S. parauberis 생균을 넙치에 $2.0{\times}10^{7}$ cfu/fish의 농도로 복강주사하고 21일간 폐사를 조사하였다. 또한, H&E 염색과 in situ hybridization 방법을 이용하여 감염 정도, 조직 변화 및 세균의 분포를 포함하는 조직병리학적 연구를 수행하였다. 21일간 넙치의 폐사를 관찰한 결과, 14${^{\circ}C}$와 21${^{\circ}C}$에서의 누적폐사율이 각각 16.7%와 50%로 나타났다. 대부분의 경우 S. parauberis에 감염된 넙치는 체색흑화, 무기력, 복수에 의한 가벼운 복부팽만, 비장 종대, 간 충혈 및 각 내부 장기의 퇴색이 관찰되었다. 심장에서는 한계가 명료한 유백색의 결절과 심낭에 불투명한 염증성 삼출물이 차 있었다. 특히, 폐사가 나타나기 시작한 후 모든 실험어에서 심외막염과 심근염이 관찰 되었다. S. parauberis 인위 감염 시, 균의 검출여부나 조직 내에서의 세균 분포 양상을 관찰하기 위하여 수행한 in situ hybridization의 결과, 실험에 사용한 장기들 중 간장, 비장, 신장 및 위에서는 약한 양성 반응을 나타내었으나 심장의 심근에서 가장 강한 양성 반응을 관찰할 수 있었다. 이러한 결과는 S. parauberis가 심근에 심각한 영향을 미쳐서 호흡곤란과 혈액순환에 영향을 미치는 것으로 판단되므로 S. parauberis에 의한 심외막염과 심근염은 넙치의 폐사와 직접적인 관련이 있는 것으로 사료된다.

• 한국어병학회지
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• 제6권2호
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• pp.205-218
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• 1993

On the development of hirame(Paratichtys olivaceus) culture, outbreak of scuticociliata infection was reported to cause severe damage in Japan. To establish effective measures for isolation and cultivation of this ciliate, we tried to culture this pathogenic ciliate using medium for bacteria and fish cell lines in vitro. Scuticociliata from the brain tissues of infected fish was aseptically inoculated to CHSE-214 cells cultured in MEM-10 without antibiotic. Scuticociliata grew well and the number of ciliate reached $10^6\;cells/ml$ at temperatures of $15^{\circ}C$ to $20^{\circ}C$ for 10d. The number of ciliate cultured in the cell lines is 10 times higher than the numbers cultured in the liquid medium alone. This ciliata could be cloned by dilution method. Scuticociliata isolated could grow well on 42 different cell lines that were established from marine fish, warm freshwater fish, and salmonids. This ciliate could be preserved in liquid nitrogen for more than 6 months. Subsequently, we observed the optimal temperature and salinity for growth, and tested the sensitivities of this organism to formaldehyde, flagyl(Metronidazole), Ekuteshin(Combination compound of sulfamonometoxin and ormethoprim), and ozonixation. Optimal temperature for growth was $25^{\circ}C$ and salinity was 1.0 to 1.5%. Washed scuticociliata was killed by formaldehyde at the concentration of 50ppm for 10min, but was not completely killed even at a high concentration of 400ppm for 20min in MEM-5. Flagyl and Ekuteshin can inhibit the growth of scuticociliata at the concentration of 1,000 and $100{\mu}g/ml$ in MEM-10, respectively. More than 99% of this scuticociliata could be killed by ozonization at a dose equivalent to $1.0mg/\ell$ oxidant for 30sec in sea water. Isolated scuticociliata showed the pathogenicity to the cultured hirame by artificial infection(I. P. injection, $10^5\;cells$/fish). The number of scuticociliata in the water could be counted by most probable number(MPN) method using tissue culture, and the minimum detectable number was $1.8\;cells/\ell$. The number in the reservoir tank for water supply to the culture tank was 110 cells/l. After cleaning by elimination of the sediments from of the reservoir tank and disinfected with formaldehyde, number of scuticociliata decreased and was counted less than $1.8\;cells/\ell$ and infection rate of cultured hirame was decreased.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제5권1호
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• pp.64-74
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• 2002

The proper conditions for cold storage of milt in four species of flatfish were investigated. Various diluents were tested for the preservation of marbled sole, brown sole, starry flounder and olive flounder milt at $1\pm0.5^{\circ}C$ for 7 days. The most effective diluent was $1\%$ NaCl for marbled sole and Stein's extender for brown sole, starry flounder and olive flounder. After 7 days of storage in different dilution ratios (milt: diluent), marbled sole milt diluted with 1:3-10 and brown sole, starry flounder and olive flounder milt diluted 1:1-10 maintained good sperm activity index (SAI). SAI was affected by storage volume and presence of antibiotic. SAI was lower after 7 days storage in the volume of 1.5 mL than in 0.5 or 1.0 mL. SAI after 29 days storage was markedly enhanced by addition of antibiotic in marbled sole (400 ppm gentamicin, 400 ppm neomycin, 200-400 ppm streptomycin), brown sole (600 ppm gentamicin), starry flounder (1,000 ppm gentamicin) and olive flounder (200-1,000 ppm gentamicin, 200-400 ppm neomycin, 200-1,000 ppm streptomycin).

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제8권2호
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• pp.56-64
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• 2005

Two distinct CD3 homologue genes, $CD3\gamma/\delta\;and\;CD\varepsilon$, were isolated from a olive flounder leukocyte cDNA library and a BAC library. $CD3\gamma/\delta$ consisted of 961 bp encoding 178 amino acid residues, and $CD3\varepsilon$ consisted of 1006 bp encoding 164 amino acid residues. When compared with other known CD3 peptide sequences, the most conserved region of the two olive flounder CD3 chain peptides are the cytoplasmic domain and the least conserved are the extracellular domain. A phylogenetic analysis based on the deduced amino acid sequence grouped the two olive flounder CD3 sequences with $CD3\varepsilon$ and $CD3\gamma/\delta$, respectively. The olive flounder CD3 cluster (consisting of $CD3\varepsilon\;and\;CD3\gamma/\delta$) spans only 10.4 kb. The $CD3\varepsilon\;and\;CD3\gamma/\delta$ genes are oppositely transcribed only 3.8 kb apart. Both olive flounder CD3 genes have five exons. The two olive flounder CD3 genes were predominantly expressed in PBLs, kidney, spleen, and gills.