4종류의 향신료(allspice, clove, oregano, thyme)를 액체배지에 0~2%(w/v) 첨가하여 멸균한 후 6종류의 식중독세균(Aeromonas hydraphila, Escherichia coli O157:H7, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus 196E, Salmonella typhimurium, Vibrio parahaemolyticus)을 $10^{5}$~$10^{6}$ cells/$m\ell$되게 접종하여 35$^{\circ}C$에서 24시간 배양하였다. 향신료의 종류와 농도에 따른 각 식중독세균에 대한 항균활성은 배양액의 생균수 변화로서 조사하였으며, 향신료의 농도가 증가할수록 식중독세균의 증식은 억제되었다. 액체배지에 첨가한 향신료의 농도 2% 범위내에서 Gram 양성균이 V. parahaemolyticus를 제외한 Gram 음성균에 비하여 증식이 크게 억제되었다. 향신료 중에서는 시험한 6종류의 식중독세균에 대하여 clove의 항균활성이 가장 우수하였으며, 다음으로는 allspice와 oregano가 우수하였다. 액체배지에 0.3%의 clove첨가로서 시험한 모든 식중독세균의 증식이 억제되었다. Kanagawa 반응 양성세균인 V. parahaernolyicus는 clove와 allspice를 첨가했을 때 시험한 타 균쥬에 비하여 증식이 가장 두드러지게 억제되었다. Thyme은 시험한 대부분의 세균에 대하여 가장 항균활성이 낮았던 반면에 clove는 1%를 첨가하였을 때 시험한 모든세균을 사멸시켰다.다.
The seasonal and spatial variation of pathogenic Vibrio species, such as V. parahaemolyticus, V. vulnificus, V. alginolyticus, and V. cholerae were investigated in seawater and in bivalves off the Gyeongnam coast of Korea, which is an important area for shellfish production, during the period 2013-2016. V. parahaemolyticus, V. vulnificus, V. alginolyticus, and V. cholerae were detected in 12.1%, 5.2%, 15.4%, and 0.9% of seawater samples, respectively. V. parahaemolyticus, V. vulnificus, V. alginolyticus, and V. cholera were detected in 21.9%, 7.1%, 12.2%, and 0.0% of shellfish samples, respectively. The Vibrio spp. in seawater and bivalve samples were detected at high levels during the summer to early autumn; however, the levels were low during the winter. Therefore, their occurrence was seasonally dependent and correlated with high water temperature, which is also the biggest factor contributing to foodborne outbreaks associated with Vibrio. Relatively high detection rates of the strains were also found in the sea area that was continually exposed to inland wastewater. Our findings show that continuous monitoring is needed to reveal the patterns of occurrence of these pathogens from marine samples collected off the Korean coast, to reduce seafood-borne outbreaks caused by Vibrio.
16S rRNA short amplicon sequencing-based microbiota profiling has been thought of and suggested as a feasible method to assess food safety. However, even if a comprehensive microbial information can be obtained by microbiota profiling, it would not be necessarily sufficient for all circumstances. To prove this, the feasibility of the most widely used V3-V4 amplicon sequencing method for food safety assessment was examined here. We designed a pathogen (Vibrio parahaemolyticus) contamination and/or V. parahaemolyticus-specific phage treatment model of raw oysters under improper storage temperature and monitored their microbial structure changes. The samples stored at refrigerator temperature (negative control, NC) and those that were stored at room temperature without any treatment (no treatment, NT) were included as control groups. The profiling results revealed that no statistical difference exists between the NT group and the pathogen spiked- and/or phage treated-groups even when the bacterial composition was compared at the possible lowest-rank taxa, family/genus level. In the beta-diversity analysis, all the samples except the NC group formed one distinct cluster. Notably, the samples with pathogen and/or phage addition did not form each cluster even though the enumerated number of V. parahaemolyticus in those samples were extremely different. These discrepant results indicate that the feasibility of 16S rRNA short amplicon sequencing should not be overgeneralized in microbiological safety assessment of food samples, such as raw oyster.
저가 수산물의 부가가치를 높이고 소비를 촉진시키기 위하여 이들을 이용한 인스턴트 생선회를 제조하여 산업화할 필요성이 대두되고 있다. 인스턴트 생선회를 제조할 때 생선회를 원인식으로 하는 식중독 세균의 제어가 필수적이므로 생선회 소스의 원료인 유기산을 대상으로 생선회 식중독 유발 세균의 생존에 미치는 영향을 실험하였다. 식초(총산도 6.0-7.0%)와 젖산(총산도 8.0-9.0%)은 낮은 농도에서도 Vibrio속에 대한 항균활성이 강하게 나타났으며 Vibrio vulnificus(V. vulnificus), V. cholerae non-O1, V. parahaemolyticus, V. mimicus 순이었고, Salmonella typhimurium(S. typhimurium)과 Escherichia coli O157:H7(E. coli O157:H7)은 비교적 높은 농도에서 항균활성이 약하게 나타났다. 최소생육저해농도(MIC)는 식초의 경우 V. vulnificus 16$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, V. cholerae non-O1 18$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, V. mimicus 16$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, V. parahaemolyticus 12$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, S. typhimurium 26$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, E. coli O157:H7 20$\mu\textrm{g}$/$m\ell$를 나타내었고, 젖산의 경우 V. vulnificus 20$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, V. cholerae non-O1 25$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, V. mimicus 25$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, V. parahaemolyticus 25$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, S. typhimurium 40$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, E. coli O157:H7 35$\mu\textrm{g}$/$m\ell$를 나타내었다. 순간 살균력 (10초)은 식초의 경우 V. vulnificus 8%, V. cholerae non-O1 14%, V. mimicus 10%, V. parahaemolyticus 4%, E. coli O157:H7 48%에서 증식되지 않았지만 S. typhimurium은 50%에서도 집락이 검출되었다. 젖산의 경우 V. vulnificus 2%, V. cholerae non-O1 3%, V. mimicus 4%, V. parahaemolyticus 3%, S. typhimurium 14%, E. coli O157:H7 17%에서 증식되지 않았다. 식초와 젖산은 낮은 농도에서 생선회 식중독 유발에 주 원인균이 되는 Vibrio 속의 생육을 억제하였고, S. typhimurium과 E. coli O157:H7의 생육은 비교적 약하게 나타났다.
This study was carried out to investigate antibacterial activities of the green tea extract according to storage temperature as death velocity constant. The survey data were collected from seven green teas (2 Korean, 2 Japanese, 2 Chinease and 1 Vietnamese) and experimental strains were used E. coli No. 11234, Ent. aerogenes No. 11783, Ps. fiu. orescens No. 11210, S. marscens No. 11808, St. mutans No. 11823 and V. parahaernolyticus No. 11965. The experimental results obtained were as follows: 1. Antibacterial activities of the green tea extracts according to the strains were strikingly difference. That is, those of the samples appeared to be conspicuous on [St. mutans No. 11823 (Range of death velocity constant a day after, at 20$\circ$C 4.85~5.22) and V. parahaemolyticus No. 11965 (4.70~6.00) while E. coli No. 11234 (0.59~-0.30) and Ent. aerogenes No. 11783 (0.24~-0.11)] were not so. 2. To storage temperature at 5$\circ$C than that at 20$\circ$C, antibacterial activities of the green tea extract on Ps. fluorescens No. 11210, S. marscens No. 11808, E. coli No. 11234, and Ent. aerogenes No. 11783 were sensitived but St. mutans No. 11823 and V. parahaemolyticus No. 11965 were not related to those. 3. Antibacterial activities to the strains were increased within two days.
Vibrio parahaemolyticus species, which cause acute gastroenteritis in humans, were isolated from farmed fish and seawater and their antimicrobial-resistance pattern and factor were investigated. They exhibited the highest resistance to ampicillin (88.9%), followed by trimethoprim (51.9%) and rifampin (22.2%). The relatively high resistance to trimethoprim was unexpected because trimethoprim was not commonly used in fish farming in Korea. R plasmid related resistance was identified by the treatment of novobiocin (7 ug/mL) and it was named as pVPBW1. A putative trimethoprim resistance gene in 2.0 kb fragment of pVPBW1 was also confirmed.
V. parahaemolyticus를 균주로 alkaline protease 생산을 위한 질소원의 종류, skim milk농도, NaCl농도, 금속이온의 종류를 조사하였다. 질소원인 peptone, tryptone, casamino acid, ski milk, phyton peptone중에서는 skim milk에서 활성이 월등히 높게 나타났고, skim milk의 농도에 따른 실험에서는 2%일 때 활성이 가장 높게 나타났다. NaCl의 농도에 따른 실험에서는 0%일 때 활성이 가장 높았고 농도가 높아질수록 활성이 낮아졌다. 금속이온에 따른 활성을 보면 금속이온이 들어가지 않았을 때 활성이 가장 높게 나타났고, 금속이온을 첨가하므로써 활성이 급격히 떨어졌다. 또한 CoCl$_2$, CuCl$_2$, HgCl가 첨가되었을 때는 활성이 전혀 나타나지 않았다.
본 연구는 1997년 1월부터 1997년 11월까지 낙동강 기수지역인 다대포의 모래에서 서식하는 식용 쌍패각 조개인, 빛조개로부터 비브리오를 분리 동정한 것이다. 표현형을 중심으로 한 새와학적 성상으로 빛조개의 내장으로부터 Vibrio alginolyticus, V. parahaemolyticus, V. cholerae non-O1, V. vulnificus, V. salmonicida 및 V. tubiashii 등 8종의 비브리오가 동정되었다. 수온이 $15^{\circ}C$ 이하에서 성장이 불가능한 병원성 세균인 V.parahaemolyticus 가 동절기에 및조개로부터 분리됨으로서 빛조개가 자연계내에서 V.parahaemolyticus 의 월동 보균체중의 하나라는 결론을 얻게 되었다.
Here, we report that Vibrio parahaemolyticus induces a rapid remodeling of macrophage actin and activates RhoB GTPase. Mutational analysis revealed that the effects depend on type III secretion system 1 regulated translocation of a V. parahaemolyticus effector protein, VP1686, into the macrophages. Remodeling of actin is shown to be necessary for increased bacterial uptake followed by initiation of apoptosis in macrophages. This provides evidence for functional association of the VP1686 in triggering an eat me-and-die signal to the host.
Effect of inhibitors on Vibrio parahaemolyticus cell growth and its urease activity was studied. The growth of the bacterium and the enzyme activity were inhibited by the addition of 0.02% p-hydroxymercuric benzoate, $HgCl_2$and $AgNO_3$. However, same concentration of boric acid, thallium acetate and $Pb(NO_3)_2$ did not affect the cell growth but inhibited urease activity by 25%, 29%, and 38%, respectively. Acetohydroxamic acid was the most potent inhibitor on cell growth by inhibiting 40% but did not affect urease activity. To investigate the effect of inhibitors on urease activity, urease was purified and confirmed on SDS-PAGE. The purified urease was inhibited 100% by the addition of 1 mM acetohydroxamic acid and $AgNO_3$but no inhibition was occurred by the addition of the same concentration of thallium acetate. and the addition of 0.01 mM of $HgCl_2$ and acetohydroxamic acid inhibited the purified urease activity by 39% and 24%, respectively. On 0.1 millimolar basic, acetohydroxamic acid and $HgCl_2$inhibited 4 times more active in urease inhibition than p-hydroxymercuric benzoate whereas no inhibition was occurred either thallium acetate or $Pb(NO_3)_2$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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