A specific analytical method able to identify and quantify traces of six glucocorticoids residues in eggs were developed. The extraction and clean-up parameters for simultaneous analysis were evaluated and HPLC and spectrometric conditions were also established. For determination of glucocorticoids, 5 g of egg was transferred into a test tube, adjusted pH 5.2 with acetate buffer and was $\beta$-glucuronidase/arylsulfatase from Helix pomatia added. The mixture was centrifuged and supernatant was extracted twice with 20 mL n-hexane. The extraction was performed with HLB cartridge using methanol, followed by clean-up with silica cartridge using methanol/ethyl acetate (4/6, v/v). The analytes were determined by HPLC/ESI-MS/MS operating in the negative ion mode. Validation studies with fortified egg samples for established method were performed. The result of method validation gave good efficiency, linearity, accuracy and precision. The correlation coefficients ($r^2$) of the calibration curves appeared to be higher than 0.99 in egg, indicating excellent linearity. LOD was ranged 0.09 to $0.17{\mu}g/kg$, and recoveries for most compounds were in the range of 55.7-69.8%. This method can be used to determine ${\mu}g/kg$ levels of glucocorticoids in eggs.
This study aimed to prepare kombucha, a fermented tea beverage, containing Dendropanax morbiferus (DM) leaves and roots, and analyze its antioxidant and intracellular activities. We compared the pH change, total acidity, radical scavenging activity, and oxygen radical absorbance capacity (ORAC) of kombucha fermented with black tea alone and that with added DM leaves or roots during fermentation. Using RAW 264.7, we evaluated the effects of kombucha containing different DM parts on nitric oxide (NO) production and inflammation-related cytokine content in cells. Kombucha containing ethanol extracts of DM leaves (BTK-E-DML) and roots (BTK-E-DMR) showed higher radical scavenging activity and ORAC 3 d after fermentation than that prepared from black tea alone (BTK-Ori). In an in vitro experiment using RAW 264.7, samples were treated with 8 mg/mL kombucha considering cytotoxicity; the lipopolysaccharide (LPS)-induced NO content significantly reduced after BTK-E-DML and BTK-EDMR treatments compared with that after BTK-Ori treatment. Additionally, the levels of interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha, which were LPS-stimulated inflammatory cytokines, significantly decreased in cells treated with BTK-E-DML and BTK-E-DMR 15 d after fermentation compared with those treated with BTK-Ori. In conclusion, these results demonstrate that kombucha fermented with the leaves and roots of DM increases antioxidant activity and can significantly regulate inflammatory responses at the cellular level.
Eui-Jeong Hwang;Yejin Choi;Hyeop-Jo Han;Daeung Yoon;Jong-Un Lee
Economic and Environmental Geology
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v.57
no.3
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pp.305-317
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2024
To investigate the effect of changes in microbial communities on arsenic release in soil, experiments were conducted on arsenic-contaminated soils (F1, G7, and G10). The experiments involved three groups of the experimental sets; ① BAC: sterilized soil + Bacillus fungorum, ② IND: indigenous bacteria, and ③ MIX: indigenous bacteria + B. fungorum, and incubated them for seven weeks using lactate as a carbon source under anaerobic conditions. The experimental results showed that higher concentrations of arsenic were released from the IND and MIX soils, where indigenous bacterial communities existed, compared to BAC. Significantly higher levels of arsenic were released from the G10 soil, which showed higher pH, compared to the F1 and G7 soils. In the G10 soil, unlike other soils, the proportion of As(III) among the released arsenic was also low. These results may be attributed to differences in microbial community composition that vary depending on the soil. By the seventh week, the diversity of microbial species in the IND and MIX soils had significantly decreased, with dominant orders such as Eubacteriales and Bacillales thriving. Bacteroidales in the seventh week of the MIX in the F1 soil, Rummeliibacillus in the seventh week of the IND and MIX of the G7 soil, and Enterobacterales in the IND and MIX of the G10 soil were dominant. At present, it is not known which mechanisms of microbial community changes affect the geochemical behavior of arsenic; however, these results indicate that microbiome in the soil may function as one of the factors regulating arsenic release.
We investigated a hydrometallurgical process of nickel recovery from Inconel 713C scrap. The process proceeded with a series of i) comminution of pyrometallurgical treated scrap, ii) sulfuric acid leaching, iii) solvent extraction of unreacted acid, molybdenum, aluminum, and precipitation of chromium, iv) crystallization of nickel sulfate by vacuum evaporation, and v) nickel electrowinning. The nickel-aluminum intermetallic compound, Ni2Al3, was formed by the pyrometallurgical pretreatment readily grounded under 75 ㎛. Sulfuric acid leaching was done for 2 hours in 2 mol/L, 20 g/L solid/liquid ratio, and 80 ℃. It revealed that over 98 % of nickel and aluminum was dissolved, whereas 28 % of molybdenum was. A nickel sulfate solution with 2.34 g/L for the crystallization of nickel sulfate hydrate was prepared via solvent extraction and precipitation. Over 99 % of molybdenum and aluminum and 93 % of chromium was removed. Nickel metal with 99.9 % purity was obtained by electrowinning with the nickel sulfate monohydrate in the cell equipped with anion exchange membranes for catholyte pH control. The membrane did not work well, resulting in a low current efficiency of 73.3 %.
The purpose of this study was to determine the effect of selenate on adipocyte differentiation and to identify genes involved in the modulation of adipogenesis in 3T3-L1 cells. To test the effect of selenate on adipocyte differentiation, adipogenesis was induced in cells using various concentrations ($0-100{\mu}M$) of selenate. Various phases of adipogenesis were induced: postconfluent (PC), early phase (EP, d0-d2), postmitotic growth arrest (PM, d2-d4), and all period (AP). The PC cells exposed to selenate for 24 h displayed dose-dependent inhibition of intracellular lipid droplet accumulation on day 6 of adipogenesis. Two days of selenate treatment at EP or AP inhibited adipogenesis, with an approximately 20-80% reduction in lipid accumulation compared to that of a control (p<0.05). When preadipocytes were exposed to selenate during the PM period, the antiadipogenic effect of selenate was attenuated. Two types of selenoprotein genes (Seps1 and Sepp1) were up-regulated by the selenate treatment during mitotic clonal expansion, whereas these genes were down-regulated during PM growth arrest (p<0.05). The findings demonstrate the antiadipogenic function of selenate and the possible involvement of Sepp1 and Seps1 genes in selenate-inhibited adipogenesis in 3T3-L1 cells.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.44
no.12
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pp.1763-1770
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2015
The effects of root of Taraxacum coreanum Nakai (TC), on the suppression of inflammation and oxidative stress induced by lipopolysaccharide (LPS) in ICR mice were studied. LPS (10 mg/kg body weight) was injected into ICR mice in between two consecutive oral administrations. Hot water extract of fresh TC (HWETC) was administered to mice immediately before and 24 h after LPS injection. The animal groups used in this study were as follows: NOR group (PBS injection, DW administration), CON group (LPS injection, DW administration), and TC group (LPS injection, 1.4 g/kg bw of HWETC administration). Mice in the CON group lost weight due to inflammation induced by LPS, while the body weight of the TC group mice increased significantly, indicating that inflammation was inhibited by HWETC administration. Compare with the CON group, plasma and hepatic triglyceride, reactive oxygen species, peroxynitrite, and hepatic thiobarbituric acid reactive substances concentrations of the TC group decreased significantly (P<0.05). The protein expression of a pro-inflammatory transcription factor, nuclear $factor-{\kappa}B$ ($NF-{\kappa}B$) and its target enzyme, cyclooxygenase 2, increased in response to LPS injection, but was suppressed by HWETC administration (P<0.05). In conclusion, HWETC appears to ameliorate the oxidative stress and inflammatory responses induced by LPS via inhibition of $NF-{\kappa}B$ activation.
Cytochrome P4501B1(CYP1B1) is known to be inducible by xenobiotic compounds such as policyclic aromatic hydrocarbon(PAH) and dioxins such as 2,3,7,8-tetrachloro-dibenzo-p-dioxin(TCDD). And these induction of CYP1B1 is also regulated by many categories of chemicals. In order to investigate the effects of several chemicals on CYP1B1 gene expression in Hepa-I and MCF-7 cells, 5' flanking DNA of human CYP1B1 was cloned into pGL3 basic vector containing luciferase gene, and then transfected into these cells. After treatment of chemicals, the luciferase activity was measured. CYP1B1 enzyme metabolize PAHs and estradiol. CYP1B1 metabolize estradiol to 4-hydrozyestradiol that is considered as carcinogenic metabolite. Recent industrialized industrialized society, human has been widely been exposed to widespread environmental contaminants such as PAHs(polycyclic aromatic hydrocarbon) that are originated from the imcomplete combustion of hydrocarbons. PAHs are known to be ligands of the AhR(aryl hydrocarbon receptor). Induction of cytochrome P4501B1(CYP1B1) in cell culture is widely used as a biomarker for PAHs. Therefore we have studied the effect of PAHs in the human breast cancer cells MCF-7 to evaluate bioactivity of PAHs. We have used the United State of America EPA selected 13 different PAHs, PAHs mixtures and extracts from environmental samples to evaluate the bioassay system. We examined effects of PAHs on the CYP1B1-luciferase reporter gene and CYP1B1 mRNA level. Benzo(k)fluoranthene and dibenzo(a, h)anthracene showed strong response to CYP1B1 promoter activity stimulation, and also CYP1B1 mRNAs increase in MCF-7 cells in a concentration-dependent manner. RT-PCR analysis indicated that PAHs significantly up-regulate the level of CYP1B1 mRNA. Some flavonoids such as genistein, daidzein, chrysin, naringenin and morin were also investigeted. These flavonoids decreased B(k)F infuced luciferase activity at low concentration. But, these flavonoids exhibited stimulatory effect at high concentration.
Kim, Hyun Kyung;Choi, Jong Hun;Kim, Hun Jung;Kim, Wooki;Go, Gwang-woong
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.51
no.3
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pp.272-277
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2019
The effects of medium-chain enriched diacylglycerol (MCE-DAG) oil on hepatic cholesterol homeostasis were investigated. HepG2 hepatocytes were treated with either 0.5, 1.0, or $1.5{\mu}g/mL$ of MCE-DAG for 48 h. There was no evidence of cytotoxicity by MCE-DAG up to $1.5{\mu}g/mL$. The level of proteins for cholesterol uptake including CLATHRIN and LDL receptor increased by MCE-DAG in a dose-dependent manner (p<0.05). Furthermore, proprotein convertase subtilisin/kexin type 9, an inhibitor of LDLR, was dose-dependently diminished (p<0.05), indicating cholesterol clearance raised. MCE-DAG significantly increased 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase and acetyl-CoA acetyltransferase2 (p<0.05), required for cholesterol synthesis, and their transcriptional regulator sterol regulatory element-binding protein2 (p<0.05). These findings suggest that given conditions of prolonged sterol fasting in the current study activated both hepatic cholesterol synthesis and clearance by MCE-DAG. However, total intracellular level of cholesterol was not altered by MCE-DAG. Taken together, MCE-DAG has the potential to prevent hypercholesterolemia by increasing hepatic cholesterol uptake without affecting intracellular cholesterol level.
Mercury (Hg) is a major concern in marine environment because of their bioaccumulation and biomagnification properties, and adverse effects to aquatic organisms at even a trace amount. However, little information on the effects of Hg, compared to other heavy metals, is available in marine small crustaceans. Here, we investigated the transcriptional modulation of metabolism-related genes in the brackish water flea, Diaphanosoma celebensis after exposure to sublethal concentration (0.2, 0.4, 0.8 ㎍/l) of HgCl2 for 48 h. Relative mRNA expression levels of five detoxification enzyme-coding genes (cytochrome P450; cyp360A1, cyp361A1, cyp4AP3, cyp4C122, and cyp370C5) and six digestive enzyme-coding genes [alpha amylase (AMY), alpha amylase related protein (AMY-like), trypsin (TRYP), chymotrypsin-like protein (CHY), lipase (LIP), pancreatic lipase-related protein (PLRP)] were analyzed using quantitative real time reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR). As results, Hg increased the mRNA level of cyp370C5 (clan2) and cyp4AP3 (clan4) in a concentration dependent manner. A significant increase in TRYP mRNA was also concentration-dependently observed after exposure to Hg. These findings suggest that cyp370C5 and cyp4AP3 play a key role in Hg detoxification in D. celebensis, and Hg can affect energy metabolism by modulating the transcription of digestive enzyme. This study will provide better understanding the molecular effects of Hg in marine small crustacean.
Shin, Ji Hyeon;Kang, Min Jung;Byun, Hee Uk;Bea, Won Yoel;Shin, Jeong Yeon;Seo, Weon Tack;Choi, Jine Shang;Shin, Jung Hye
Food Science and Preservation
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v.24
no.5
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pp.647-657
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2017
This study was carried out to investigate the quality characteristics of vinegars containing jaceosidin and eupatilin using Artemisia argyi H. ethanol extract (AEE). 10% malt extract (ME) and water extract of Artemisia argyi H. (AWE) were also prepared for vinegar production. Three kinds of materials were mixed in the same amount to prepare vinegar as follows; CO (ME, water, 18% edible ethanol), SE (ME, water, and AEE), SW (ME, AWE, and 18% edible ethanol) and SM (ME, AWE, AEE). All samples were fermented by Acetobacter pasteurianus A8 at $30^{\circ}C$ for 25 days and analyzed at 10, 15, 20 and 25 days. The pH decreased significantly during the fermentation. pH was lower in SE and SM than CO and SW. The acidity increased significantly during the fermentation, and was highest in SM (4.44%) at 25 days of fermentation. The concentration of acetic acid was higher than other organic acids for all vinegars. Jaceosidin and eupatilin were not detected in both CO and SW, but both were detected in the SE and SM. At 25 days of fermentation, jaceosidin and eupatilin concentrations in SE and SM were 6.49-6.88 mg/kg and 2.23-2.24 mg/kg, respectively. From these results, we confirmed that production of vinegar containing jaceosidin, eupatilin and phenolic compounds can be prepared by using Artemisia argyi H. edible ethanol extract.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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