• 한국동물생명공학회지
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• 제38권2호
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• pp.62-69
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• 2023

Background: Research on the reproductive physiology of Water and Sika deer, an endemic in Korea, still needs to be completed. This study analyzed the ovarian development and morphological characteristics of wild Water deer and Sika deer. Methods: Water deer and Sika deer ovaries were collected from the Korean Peninsula and Russia-Korean Peninsula border during the estrus and pregnancy seasons, respectively. And, morphological and physiological analysis and immunohistochemistry were conducted to confirm the detection of Ca²⁺ and assess the morphological changes in the ovaries. Results: The results of morphological analysis of ovaries during pregnancy and estrus, the development of the corpus luteum and follicles of Water deer showed similar patterns to other mammals. In contrast, the corpus luteum of Sika deer differed in tissue morphology and composition from Water deer. Ca²⁺ related to tissue metabolism was detected in the theca cells zone of Water deer on the estrus and was highly detected in the luteum cells zone during pregnancy. The hormone receptor protein expression patterns were generally higher in the ovaries of Water deer on the estrus and the pregnancy than in Sika deer. The expression of LH receptor was relatively low in the lutein cell zone, unlikely that of Water deer. The expression of VEGF was also different from Water deer, and the response in Sika deer was relatively very low compared to Water deer in expressing all proteins-related development. Conclusions: Therefore, the results of the study were shown that the composition of the corpus luteum of Sika deer is not clear compared to Water deer, and there are many differences in the functional and morphological formation of the corpus luteum.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제34권8호
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• pp.1580-1591
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• 2024

Menopause is induced by spontaneous ovarian failure and leads to life quality deterioration with various irritating symptoms. Hormonal treatment can alleviate these symptoms, but long-term treatment is closely associated with breast and uterine cancer, and stroke. Therefore, developing alternative therapies with novel anti-menopausal substances and improved safety is needed. In our study, heat-killed Bifidobacterium breve HDB7040 significantly promoted MCF-7 cell proliferation in a dose-dependent manner under estrogen-free conditions, similar to 17β-estradiol. This strain also triggered ESR2 expression, but not ESR1, in MCF-7 cells. Moreover, administrating HDB7040 to ovariectomized (OVX) Sprague-Dawley (SD) female rats reduced estrogen deficiency-induced weight gain, fat mass, blood triglyceride, and total cholesterol levels. It also recovered collapsed trabecular microstructure by improving trabecular morphometric parameters (bone mineral density, bone volume per tissue volume, trabecular number, and trabecular separation) and decreasing blood alkaline phosphatase levels with no significant changes in uterine size and blood estradiol. HDB7040 also significantly regulated the expression of Tff1, Pgr, and Esr2, but not Esr1 in uteri of OVX rats. Heat-killed B. breve HDB7040 exerts an anti-menopausal effect via the specific regulation of ERβ in vitro and in vivo, suggesting its potential as a novel substance for improving and treating menopausal syndrome.

• Applied Microscopy
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• 제30권1호
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• pp.45-59
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• 2000

항암제로 널리 사용되는 cis-platin은 백금(platinum) 원소에 염소기와 암모니아기가 수평면의 cis-위치에 결합되어 있는 금속화합물이다. Cis-platin은 인체의 종양에 상당한 항암효과가 있어 악성 난소종양, 두경부의 악성상피종양, 방광암 및 자궁경부암에 효과가 있다고 알려져 있으나 이 약제는 세포의 DNA합성을 억제하는 기능이 이미 밝혀져 있다. 저자는 cis-platin을 가임기의 여성에 투여되었을 때 난관상피 세포를 구성하는 섬모세포의 섬모형성에도 필연적으로 손상 및 억제적인 작용이 있을 것으로 생각되어 섬모의 주요 구성분인 미세소관의 $\alpha-tubulin$과 cis-platin과의 관계를 추구하고자 하였다. 실험동물로는 건강한 체중 $150\sim200gm$의 자성흰쥐를 사용하였으며 estradiol benzoate를 4일간 매일 투여함으로써 섬모세포를 난관내에서 지속적인 활성을 유지시킨 뒤 cis-platin을 실험군의 복강내로 주사한 후 1일, 3일, 5일 및 7일 경과시에 각각 실험동물의 난관에서 상피세포내 $\alpha-tubulin$의 발현을 관찰하기 위해 mouse antirat $\alpha-tubulin$ monoclonal antibody와 2차 항체로 bio-tinylated goat anti-rat IgG를 각각 사용하여 면역조직 화학법을 시행한 후 광학현미경으로 관찰하였다. 또 일부조직은 전자현미경 조직절편을 제작하여 1차 항체로 mouse anti rat $\alpha-tubulin$ monoclonal antibody와 2차 항체로 직경 15nm의 금과립을 결합시킨 goat anti-mouse IgG를 사용하여 면역조직 반응을 시행하고 투과전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Estradiol benzoate를 4일간 매일 일정량을 투여한 흰쥐의 난관섬모세포내 $\alpha-tubulin$의 면역반응은 estradiol 투여후 1일, 3일 및 5일군에서 강한 반응을 나타내었다. 2. Estradiol beozoate를 4일간 투여한 후 cia-platin을 투여한 흰쥐 난관섬모세포내 $\alpha-tubulin$ 반응은 cis-platin 투여 1일군과 3일군에서 약한 반응을 나타내었으나 제 5일군에서는 강한 반응으로 회복되었다. 3. Cis-platin투여한 후 제 1일 및 3일군의 흰쥐 난관 섬모세포내 $\alpha-tubulin$반응은 첨부세포질에서는 감소되었고 기저체, 섬모등에서는 $\alpha-tubulin$반응이 대조군과 비교하면 변동이 없었다. 이상의 결과로 미루어 난관섬모세포내 $\alpha-tubulin$은 cis-platin투여에 의해 감소되는 것으로 결론 지을 수 있었다.

• 대한약리학회지
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• 제31권1호
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• pp.103-114
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• 1995

일부 malignant tumor에 Pt-complex의 일상 응용 과정에서 신장독성등의 심한 부작용이 문제점으로 지적되고 있다. 이 연구에서는 기존의 cisplatin보다 항암효과는 우수하면서, 부작용을 감소시킨 새로운 Pt-complex의 개발에 역점을 두었다. 본 연구에서 합성한 Pt(Ⅱ) complex는 carrier ligand로서 1,2-diaminocyclohexane(dach)을 사용하였고, leaving group으로는 diophosphine류인 1,2-bisdiphenylphosphinoethane(DPPE)을 도입하였으며, 물에 대한 용해도를 높이기 위해 dinitrate로 만들었다. 새로이 합성한 [Pt(Ⅱ)(trans-d-dach)(DPPE)]$(NO_3)_2$는 원소 분석, IR 및 $^{13}C-NMR$ 분석 data에 의하여 위의 물질임이 확인되었다. MTT assay method에 의한 항암활성 연구를 통하여 P-388, L-1210 lymphocytic leukemia cell과 SK-OV3 난소암세포에서 항암효과가 인정되었으며, 이 항암효과는 대조 약물로 사용된 cisplatin과 유사하였다. 토끼의 신세뇨관 세포와 인체의 신피질 세포를 이용한 cytotoxity 및 thymidine 섭취율과 인체 신피질 조직 배양을 이용한 glucose consumption 실험을 통하여 모두 cisplatin보다 신장독성이 현저히 감소되었다. 이상의 결과로 보아 Pt(Ⅱ)complexes는 carrier ligand와 leaving group의 선택에 따라 항암활성의 증가와 신독성의 감소를 일으키는 요인으로 보여지며, 이 연구에서 만들어진 Pt(Ⅱ)complex는 앞으로 다각적인 검토를 거쳐 새로운 항암화학요법제로 개발될 가능성이 있을 것으로 생각된다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제20권1호
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• pp.71-77
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• 2005

Relaxin과 insulin이 돼지 난포 과립막세포의 스테로이드 호르몬 분비에 미치는 영향을 연구하기위하여 체외에서 황체화된 과립막세포에서 prosesterone과 $17{\beta}-estradiol$의 생산을 조사하였다. 돼지난포 과립막세포를 혈청 존재하에 배양접시에 부착 후 48시간 동안 체외배양하고 무혈청 배지에서 24시간 배양하였다. Relaxin과 insulin의 용량의존성을 확인하기 위하여 다양한 농도 (10, 100, 1,000 ng/ml)를 각각 무혈청 배지에 첨가하였다. 병합 효과를 알아보기 위하여 100 ng/ml relaxin과 100 ng/ml insulin을 단독 혹은 병합하여 처리하였는데 황체호르몬 (100 ng/ml)을 처리한 경우와 처리하지 않은 경우 모두를 조사, 분석하였다. 최종 배양이 끝난 배양액을 수집하여 RIA법으로 proses-terone과 $17{\beta}-estradiol$의 농도를 조사하였다. Relaxin과 insulin은 용량이 증가될수록 progesterone의 생산을 증가시켰으나 $17{\beta}-estradiol$의 생산에는 아무런 영향이 없었다. 병합실험에서는 relaxin과 insulin 단독 또는 병합시 황체호르몬 존재 하에서 progesterone의 생산을 증가시켰으나 $17{\beta}-estradiol$의 생산에는 아무런 영향이 없었다. 결론적으로 relaxin과 insulin은 돼지 황체화 과립막세포의 progesterone 분비를 증가시키지만 $17{\beta}-estradiol$의 생산에는 효과가 없었으며 병합에 의한 상승효과는 없었다. Progesterone 생산에 미치는 relaxin과 insulin의 효과는 황체호르몬의 존재에 의해 증대되었다.

• 농약과학회지
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• 제5권4호
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• pp.11-19
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• 2001

곤충의 난황형성에는 각종호르몬들이 먹이 등과 함께 매우 중요하게 작용하고 있으며, 이러한 호르몬들 중에서는 신경분비호르몬, 유약호르몬 및 엑디스테로이드 등이 주작용을 한다. 본 총설에서는 곤충호르몬을 포함한 곤충성장조절제가 곤충의 난황형성에 작용하여 어떤 영향을 주는지에 대하여 살펴보고 종합적 해충관리 인자로서 이용 가능성을 조사하였다. 곤충의 난황형성은 일반적으로 뇌에서 분비하는 신경분비호르몬의 작용과 난소에서 분비되는 엑디스테로이드 및 알라타체에서 분비되는 유약호르몬이 지방체를 자극하여 난황소전구물질을 합성하게 하며, 혈림프로 분비된 난황소 전구물질은 난모세포로 흡수되어 난발육이 이루어진다. 곤충호르몬을 포함한 곤충성장조절제는 이러한 난황형성과정 중에 각종 호르몬분비 기관(알라타체와 난소 등) 및 여러 가지 생리기관(지방체, 중장상피 그리고 침샘 등)에 작용하여 용해, 파괴 및 세포독성을 나타내 정상적인 생식작용을 하지 못하도록 한다. 따라서 곤충의 종류에 따라서는 포유동물에 독성이 낮은 곤충호르몬을 포함한 곤충성장조절제를 종합적 해충관리의 일환으로 사용함으로서 효과적인 해충방제가 가능할 것으로 보인다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제33권4호
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• pp.547-555
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• 2020

Objective: Apoptosis of ovarian granulosa cells (GCs) affects mammalian follicular development and fecundity. This study aimed to explore the regulatory relationship between microRNA-26a (miR-26a) and the 3β-hydroxysteroid-Δ24-reductase gene (DHCR24) gene in porcine follicular granular cells (pGCs), and to provide empirical data for the development of methods to improve the reproductive capacity of pigs. Methods: The pGCs were transfected with miR-26a mimic, miR-26a inhibitor and DHCR24-siRNA in vitro. The cell apoptosis rate of pGCs was detected by the flow cytometry. The secretion levels of estradiol (E2) and progesterone (P) in pGCs were detected by enzyme-linked immunosorbent assay. Double luciferase validation system was used to detect the binding sites between miR-26a and DHCR24 3'-UTR region. Qualitative real-time polymerase chain reaction and Western blotting were used to verify the DHCR24 mRNA and protein expression in pGCs, respectively, after transfecting with miR-26a mimic and miR-26a inhibitor. Results: Results showed that enhancement of miR-26a promoted apoptosis, and inhibited E2 and P secretion in pGCs. Meanwhile, inhibition of DHCR24 also upregulated the Caspase-3 expression, reduced the BCL-2 expression, promoted pGCs apoptosis, and inhibited E2 and P secretion in pGCs. There were the binding sites of miR-26a located within DHCR24 3'-UTR. Up-regulation of miR-26a inhibited DHCR24 mRNA and protein expression in pGCs. Conclusion: This study demonstrates that miR-26a can promote cell apoptosis and inhibit E2 and P secretion by inhibiting the expression of DHCR24 in pGCs.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제30권4호
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• pp.333-340
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• 2003

Objective: This study was performed to examine the maturation and the development to the blastocyst stage of immature oocytes collected from patients with high risk of ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS). Materials and Methods: Cumulus-oocyte complexes (COCs) were collected following only HCGpriming for non stimulated IVF-ET cycles of the patients. At the time of oocyte collection, COCs were classified into three groups in accordance with their appearance (Group I: oocytes with dispersed cumulus cells; Group II: oocytes with compacted cumulus cells; Group III: oocytes with sparse cumulus cells). The in vitro maturation and blastocyst development rates of the COCs were compared among these groups. From August 2001 to June 2002, 48 IVM/IVF-ET cycles from 42 patients (mean age: $32.4{\pm}3.8$ years) were performed. To prevent the occurrence of OHSS, the patients were primed with 10, 000 IU HCG alone 36 h before oocyte collection without gonadotropin stimulation. Oocytes were aspirated on cycle days from 7 to 13. The normal COCs were classified into three groups according to their appearance. The aspirated immature oocytes were cultured in YS maturation medium containing 30% (v/v) human follicular fluid (HFF), 1 IU/ml FSH, 10 IU/ml HCG and 10 ng/ml rhEGF. Fertilization was induced by intracytoplasmic sperm injection (ICSI). All zygotes were co-cultured with cumulus cells in $10{\mu}l$ YS medium containing 10% HFF until day 7 after oocyte collection. Blastocyst transfer was performed on day 5 after ICSI. Results: Th e mean number of oocytes cultured in the IVM/IVF cycles was $24.7{\pm}10.6$. Of 1185 COCs, those assigned to Group I, II and III were 470 (39.7%), 414 (35.0%) and 301 (25.4%), respectively. The maturation rate (94.5%, 444/470, p<0.05) in Group I was significantly higher than those of Group II (62.8%, 260/414) and Group III (73.1%, 220/301). Especially, 30.9% of COCs in Group I (145/470) was matured on the day of oocyte aspiration. There were no differences in the rates of fertilization and cleavage among the three groups. The development rate to the blastocyst stage in Group I (54.6%, 206/377, p<0.05) was also significantly higher than those in Group II (33.0%, 68/206) and Group III (30.1%, 52/173). Twenty-four clinical pregnancies (50.0%) was obtained and 22 pregnancies (45.8%) are ongoing. Implantation rate in the present study was 24.6%. Conclusion: These results suggest that there is a positive correlation between the appearance of COCs and the developmental competence of the immature oocytes in non stimulated IVM/IVF cycles.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제12권3호
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• pp.215-220
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• 2008

눈동자개, Pseudobagrus koreanus의 성분화 과정을 밝히기 위해 부화 직후부터 250일령까지 생식소의 분화 및 발달을 조사하였다. 원시생식세포는 부화 후 1일(전장: $6.63{\sim}6.95\;mm$)에 나타났으며, 부화 후 5일($7.50{\sim}9.36\;mm$)에 생식융기를 형성하는 원시생식소 구조를 나타내었다. 부화 후 25일($11.58{\sim}13.21\;mm$)에서는 생식소 후단부 한쪽 끝에서 신장된 체세포 돌기가 생식소와 융합되어 작은 난소강이 형성되었다. 부화 후 30일($12.19{\sim}13.72\;mm$)에는 생식소 하단부에 정소관 원기가 출현하여 정소의 분화가 시작되었다. 부화 후 50일째 자어($16.28{\sim}17.06\;mm$)의 난소내에서는 주변인기 난모세포로 채워지기 시작하였으며, 정소내에서는 정원세포(spermatogonia, SG)의 활발한 증식을 관찰할 수 있었다. 부화 후 250일째 자어($35.49{\sim}51.12\;mm$)에서는 난소의 크기가 더욱 커지고 난모세포들로 가득 채워져 있었고, 정원세포의 수가 증가하기 시작하였다. 이상의 결과 눈동자개의 성분화 양상은 자웅이체형 중 분화형이었다.

• 한국동물학회지
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• 제39권3호
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• pp.257-265
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• 1996

참개구리를 사용하여 난소내 여포들이 성장시기에 획즉하게 되는 스테로이드들의 생성능력을 조사하였다. 개구리로부터 중간(0.7-1.11mm) 크기 이하의 여포들을 분리한 다음 전구스테로이들이나 뇌하수체추출물(FPH)을 포함한 배양액에서 6시간 배양 후 이들에 의해 산물스테로이드로 전환된 양을 방사면역 측정법으로 조사하였다. FPH의 처리는 중간 크기의 여포만 스테로이드들의 생성을 현저히 촉진하고 작은 여포들(0.35-0.7mm)에서는 촉진효과가 매우 미약하였다. Progenenolone의 첨가는 가장 작은 여포 (0.22-0.4mm)들에 의해서도 progesterone(P$_4$)으로 전환되었다. 그러나 가장 작은 여포에서는 P$_4$를 첨가했을 때에도 역시 같은 현상이 나타났다. 작은 여포와 중간 여포들에 의한 전환된 스테로이드들의 양을 단위표면적의 전환량으로 계산 비교해 본 결과 전환된 양은 거의 같았다. 이는 작은 여포의 여포세포들 (granulosa cells)이 이미 E$_2$에 이르는 모든 중간 산물들을 생성할 능력을 가졌다는 것을 의미한다. 그러나 이들이 FPH에 의해서는 스테로이드를 조금밖에 생성하지 못하는 것으로 보아 아직 부족한 또다른 요인들이 있는것으로 추정된다.