눈꽃동충하초 분생자경속을 형성하는데 액체배양을 이용한 접종원의 배지는 PDB가 가장 우수하였으며, 분생자경속 형성에 유리한 배양온도는 $20^{\circ}C$로 나타났다. 조명은 500lx.에서 가장 양호한 성장을 하였으며 광조사 시간은 18hr이 가장 유리한 분생자경형성 조건을 나타내었다. 알맞은 배지 조건은 번데기와 현미를 50 : 50의 비율에 증류수를 현미에 1 : 1비율로 첨가한 혼합배지에서 높게 나타났다. 번데기배지는 원형상태와 분쇄상태 중에서는 분쇄된 상태에서 번데기배지의 공극률이 높아 균사의 침입이 용이하여 분생자경속 회수율과 균사의 배지내에 형성이 원형상태의 번데기보다 더욱 높게 나타났으며, 균사의 생장도 역시 분쇄한 번데기에서 더욱 빠르고 고르게 나타났다. 종균 접종량은 $15m{\ell}$의 종균을 접종하면 분생자경속이 잘 형성되었다. 눈꽃동충하초 재배에 가장 안정하게 재배하려면 분쇄한 번데기에 현미와 혼합한 배지에 종균 $15m{\ell}$를 접종하여 24 에서 발이를 시킨 후 $20^{\circ}C$의 배양실에서 재배하는 것이 가장 좋은 것으로 나타났다.
모상근의 성장 및 tropane alkaloids의 생성에 미치는 pH, 서당, 비타민의 영향을 구명하기 위하여, 독말풀(Datura stramonium var. tatula Torr.)의 잎에 Agrobacterium tumefaciens $A_4$T를 접종하여 모상근을 유도하였다. 유도된 모상근 중 성장률이 양호한 clone (DTLA9)을 선발하고, 이를 pH, 서당, 비타민을 각각 여러 농도로 처리한 SH(Schenk and Hildebrandt, 1972) 기본배지에 배양하였다. 모상근의 성장에 있어 최적 pH는 6.3이었으며, 최적 서당농도는 3.0%이었다. Tropane alkaloids의 함량에 있어 최적 PH는 6.5이었으며, 최적 서당농도는 2.8%이었다. 한편, 비타민이 제거된 SH기본배지에 ascorbic acid, D-pantothenate, nicotinic acid, pyridoxine, riboflavin. 그리고 thiamine을 각각 농도별로 첨가하여 배양한 경우에, 모상근의 성장에 있어 비타민의 최적 농도는 각각 0.1, 0.003, 0.07, 0.002, 0.025, 0.01 mM이었다. Tropane alkaloids의 함량은 0.1 mM의 ascorbic acid 단독처리구에서 대조구(vitamin-free구) 및 SH기본배지에서의 경우에 비하여 가장 높게 나타났다.
A new synthetic medium was developed for the submerged mycelial cultures of Phellinus linteus. The medium for maximum mycelial growth of Phellinus linteus (3 days incubation, 28$^{\circ}C$, pH 5) consisted of (per 1 L): glucose, 90 g peptone, 10 g soluble starch, 10 g yeast extract, 3 g KH2PO4, 1 g MgSO4.7H2O, 1 g and CaCl2, 0.1 g. The concentrations of glucose, peptone, yeast extract, KH2PO4, MgSO4.7H2O, and CaCl2 were examined in the ranges of 10~90 g/L, 0~10 g/L, 0~15 g/L, 0~2 g/L, 0~1 g/L, and 0~0.5 g/L, respectively. The dry weight of mycelium in 3 days increased to 16.79 mg/mL using the new synthetic medium. The optimum temperature for mycelial growth of Phellinus linteus was 28$^{\circ}C$. The concentrations of KH2OP4, CaCl2, and yeast extract, which gave the maximum mycelial growth of Phellinus linteus, existed in the concentration ranges examined in this study. But, in the cases of other compositions (MgSO4.7H2O, peptone, and glucose), the mycelial growth of Phellinus linteus increased with the concentration in the ranges.
This study was carried out to obtain the basic data for artificial culture of veiled lady mushroom (Dictyophora spp). The optimal conditions for the mycelial growth were $25^{\circ}C$ and pH 5.0 for all isolates except the optimal temperature of $30^{\circ}C$ for D. echinovolvata ASI 32002 and Phallus rugulosus. The optimal medium for Dictyophora spp. was PBA (potato bamboo sawdust extract agar) medium. The strain ASI 32002, D. echinovolvata, grew faster than. D. indusiata ASI 32003 and Phallus rugulosus ASI 25007 on the medium. Carbon sources such as glucose, maltose and inuline were favorable for stimulating a mycelial growth of the two strains of ASI 32002 and ASI 32003. Asparagine and glutamine appeared to be favorable to the strain ASI 32002 and ASI 32003, where as alanine, one of nitrogen source also favorable to the strain ASI 32002. The optimum C/N ratio of the two isolates of ASI 32002 and ASI 32003 was about 25 : 1 when 2% glucose as carbon source was mixed with the basal medium. While, in the case of 4% as carbon source, the optimum C/N ratio was about 30 : 1.
In the process of oyster mushroom production, loading work of culture medium needs the most intensive labor power. Therefore, development of culture medium machine causes to reduce the manpower and cost. The main objective of this study is to develop the culture medium loading machine and investigate the optimal operation conditions and to evaluate the economic value of the machine. The results are summarized as follows: 1. Optimum transporting velocity of the conveyor was 0.61 m/s 2. Optimum speed of blower was 3183 rpm at the transporting velocity of 0.61 m/s with the loading quantity of 3.41 t/hr 3. Recommendable opening area ratio of pressure controller was 1/2 at the blower speed of 3183 rpm and the transporting velocity of 0.61 m/s 4. The break even point resulted in $240\;m^2$ of cultivating area compared to the method of with portable workbench, and $350\;m^2$ of cultivating area compared to the method of with a tractor and a truck.
The embryogenesis stimulating activity(ESA) had been shown in co-culture of embryos with bovine oviduct epithelial cell(BOEC) and culture in BOEG-conditioned medium. The present study was undertaken to purify and quantify the embryotropic proteins and to determine the optimum concentration of the embryotropic protein for the proper development of embryos. In BOEC-conditioned medium, five major bands of proteins were detected(66, 53, 40, 32 and 24 kDa) by SDS-PAGE. From these proteins, 288pg of protein that had a 32kDa molecular weight was purified by gel filtration column and perfusion chromatography ion-exchange column. When purified protein was supplemented to the in vitro culture media at various concentrations in protein-free media, 2.5$\mu$g /ml supplement group showed significantly higher rates of embryo development into morula /blastocyst stages than other groups(p<0.05). In conclusion, we purified 32kDa protein from BOEC-conditioned medium and this protein showed optimum embryogenesis stimulating effect at 2.5$\mu$g /ml.
Metacordyceps yongmunensis is a newly reported species from Korea, which is very similar to Cordyceps species in morphological characters. It grows on large lepidopteran pupa, and numerous white stromata grow on a single host. Mycelial growth characteristics of M. yongmunensis isolates were studied in different media and at different temperatures. Also, different carbon sources, nitrogen sources, and mineral salts were tested for mycelial growth of M. yongmunensis. Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract, Schizophyllum (mushroom) genetics minimal medium, and Martin's peptone dextrose agar produced longer colony diameters and more compact mycelial density than other media. The optimum temperature for mycelial growth was $25^{\circ}C$. Carbon sources such as sucrose, soluble starch, dextrose, glucose, dextrin, maltose, and fructose showed better mycelial growth, whereas peptone, yeast extract and tryptone resulted in the best mycelial growth of all of the nitrogen sources tested. All of the mineral salts tested showed similar growth as the control, except $K_2HPO_4$ which showed longer colony diameter and more compact mycelial density. The compact colonies were white and cottony with a greenish margin. The results showed that M. yongmunensis is an easy fungus to growas it grew from 30 to more than 50 mm in 2 wk.
This study examined the dye-properties of natural fabrics dyed with Coptis chinensis and Curcuma longa root fermented with fungi. The optimum culture conditions for the fermentation of microorganisms, the relationship between natural dye color and fermentation conditions were investigated. Two different medical herbs (ground to 80-100 mesh in size) were used as a natural dyeing source. Phellinus linteus (P. linteus), which can grow in different media, such as Agarmedium (only agar containing medium), maltose extract agar (MA) and potato dextrose extract agar (PDA) culture media, were isolated from the medium. P. linteus was confirmed to be the optimum microorganism for the fermentation of Coptis chinensis and Curcuma longa, and the MA medium was confirmed to be the best for culturing. When using the microorganism as the fermenting agent, $32^{\circ}C$ was found to be the optimum fermenting temperature for both natural colorants. Regarding the dyeing property of the fermented natural dye, silk was dyed quite darkly in an appearance by naked eye estimation and the K/S value in the color strength of silk reached a high level of 16 after the fermenting process. The washing fastness of dyed silk after treatment washing was reduced from 4 to under4 and indicates that dyed silk with fermented plant was not unsubstantial. The light fastness was 1 to 2, showing intended to maintain due to the fermentation process.
Pongamia pinnata Pierre is a tree legume, having potential in production of raw material for biodiesel. A protocol for in wk propagation of this plant was standardized using seedling explants. Growth regulators (GR) including gibberellic acid $(GA_3),\;N^6-benzylaminopurine(BA)$, thidiazuron (TDZ), and Adenine sulphate (Ads) were tested for optimum germination of seeds. Removal of seed coat prior to germination, controlled fungal growth partially but enhanced bacterial growth. Antibiotic cefotaxime was ineffective in controlling bacterial contamination. Seedling derived nodal explants and cotyledon nodes with attached cotyledons were excised and cultured for induction of shoots. Optimum sprouting and multiplication of shoot buds were obtained in MS medium supplemented with $8.88{\mu}M$ BA. These buds differentiated and rooted on medium devoid of GR. Optimum growth of Pongamia seedling was obtained in cotton plugged culture vessels. Reculturing of the cotyledon node explants produced more shoots from the same site. This process of removing shoots and reculturing of cotyledon node was followed for eight passages yielding 4 to 8 shoots in each cycle. The shoots (75%) rooted on half strength MS basal medium supplemented with 0.22% charcoal. All plants survived on transfer to soil. This is the first report on in vitro regeneration of Pongamia pinnata. This report demonstrates the possibility of coupling more than one parameter in single experiment to hasten the process of standardization. The process of cycling the nodal explant repeatedly for production of large number of shoots from single meristem may find application in genetic transformation experiments wherein meristems are used for transformation.
Haematococcus sp.를 대상으로 mixotroph 형태에서 배양을 위한 배지 최적화 연구를 수행하였다. 기본 배지로는 modified MS 배지가 적절했으며, 탄소원으로는 glucose가, 그리고 농도는 10 g/l가 적합하였다. 질소원으로는 KNO3를 선정하였으며, 농도는 1.9 g/l이 최적이었다. 최적의 배지조건에서 Haematococcus sp.를 초기 접종량(0.18 g/l)로 접종하여 14일 후에 5.58 ± 0.25 g/l로 성장하였으며, 이는 건조 세포중량 기준으로 약 31배의 성장한 것이다. 이때 생성된 클로로필은 172.16 ± 7.79 mg/l였으며, 카로티노이드는 42.33 ± 1.91 mg/l이었다. 본 연구의 결과는 추후 미세조류 대량 배양과 대사산물의 생산에 이용가능한 기초자료가 될 수 있을 것이라 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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