• 한국식품영양과학회지
• /
• 제34권1호
• /
• pp.36-41
• /
• 2005

본 연구는 고콜레스테롤을 급여한 흰쥐 에 키토산 올리고당의 첨가 수준을 달리한 식이가 흰쥐의 지방대사에 미치는 영향을 알아보고자 수행하였다. 체중이 174.7$\pm$6.3 g인 Sprague-Dawley종 수컷 흰쥐에게 고콜레스테롤혈증을 유발시키기 위하여 콜레스테롤을 식 이 무게의 0.5%를 급여하고 키토산 올리고당을 식이 무게의 1.0%와 2.0%로 하여 총 3군으로 나누어 4주간 사육하였다. 식이섭취량과 체중증가량은 식이에 의한 영향이 없었다. 혈청 중 총 콜레스테롤, 중성지방은 대조군에 비해 2.0% 키 토산 올리고당을 첨가한 군에서 유의적으로 그 농도가 크게 감소하였으며 HDL-콜레스테롤/총콜레스테롤 비는 키토산 올리고당 첨가에 의해 높아지는 경향을 보였다. 간 조직 중 TBARS 함량은 키토산 올리고당을 첨가하였을 경우 유의적으로 낮게 나타났으며 SOD와 catalase의 활성은 키토산 올리고당을 첨가한 군이 대조군에 비해 유의적으로 낮았다. 이상의 결과를 볼 때 키토산 올리고당은 체내 지방대사에 있어 총콜레스테롤과 LDL-콜레스테롤, 중성지방 및 TBARS 함량을 낮추고 HDL-콜레스테롤/총 콜레스테롤 비는 높이는 효과를 나타냈으며, 또한 생체내 고콜레스테롤에 의한 산화적 스트레스로부터 간을 보호하는 것을 알 수 있었다.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제32권4호
• /
• pp.621-626
• /
• 2003

설탕의 40%를 프락토올리고당이나 이소말토올리고당으로 대치하여 구운 스폰지 케이크를 2주간 섭취하게 하여 여대생의 변비개선에 대한 효과를 살펴보았다. 두 올리고당 모두 섭취 후 배변 횟수와 변의 경도를 유의적으로 개선시켰다. 프락토올리고당을 첨가한 스폰지 케이크를 섭취한 군에서는 배변시간이 섭취 1주 후부터 유의적으로 감소하였으며, 이소말토올리고당을 첨가한 스폰지 케이크를 섭취한 군에서는 변의 모양, 변색, 배변 시 노력과 배변 후 상쾌함 등이 섭취 전보다 섭취 후에 유의적으로 개선되었다. 섭취 중에 나타난 소화장애 현상으로는 설사, 복통, 메스꺼움, 더부룩함, 방귀, 식욕 감소, 체중감소, 복부 팽만감 등이 나타났고, 프락토올리고당을 첨가한 스폰지 케이크 섭취 군에서는 이들 장애현상 중 복부 팽만감이나, 방귀, 메스꺼움 현상이 섭취 후 1~2시간 안에 나타나기 시작하여, 실험 기간 내내 지속되었다. 반면 이소말토올리고당을 첨가한 스폰지 케이크를 섭취한 군에서는 2~3일 정도 소화장애 현상이 나타났으나, 그 후에는 섭취 후에 장애 현상이 없어졌다. 섭취종료 일주일 후에는 프락토올리고당에 의한 소화장애 현상은 곧 사라졌으나, 대부분의 피검자들은 섭취 전에 나타난 변비현상이 다시 나타났다. 배변상황의 개선여부와 소화장애 현상을 종합적으로 판단하였을 때, 두 올리고당 모두 인체의 장기능 개선에는 효과가 있었으나, 비교적 안전성이 좋은 이소말토올리고당을 첨가한 스폰지 케이크 섭취가 변비 치료에는 더 긍정적으로 나타났다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제28권7호
• /
• pp.1141-1146
• /
• 2018

2'-Fucosyllactose (2'-FL) is one of the most important human milk oligosaccharides and has several health benefits for infants. The levels of 2'-FL in breast milk or samples from other sources can be quantified by high-performance liquid chromatography. However, this method cannot be used for simultaneous detection of the target compound in numerous samples. Here, we developed a simple method for quantifying 2'-FL in a microplate format. The method involves two steps: (i) release of $\text\tiny{L}$-fucose from 2'-FL by ${\alpha}$-(1-2,3,4,6)-$\text\tiny{L}$-fucosidase and (ii) measurement of NADPH formed during the oxidation of $\text\tiny{L}$-fucose by $\text\tiny{L}$-fucose dehydrogenase. This method enables measurement of up to 5 g/l 2'-FL in 50 min using a 96-well microplate. The efficiency and simplicity of the proposed method make it suitable for the analyses of a large number of samples simultaneously.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제24권2호
• /
• pp.197-205
• /
• 1996

The $\beta$-xylosidase was purified 99- fold from the culture supernatant of Pseudo onas sp. CB-33 by ammonium sulfate precipitation, PEI precipita- tion, DEAE-Sephadex column chromatography, Sephadex G-75 gel filtration chromatography and preparative disc gel electrophoresis. Molecular weight of the enzyme was estimated to be 44,000 by SDS polyacrylamide gel electrophoresis. The enzyme has a pH optimum for activity at 7.0 and is stable over pH 6.5-9.0. The optimal temperature of the enzyme was 45$\circ$C, and its enzymatic activity was completely inactivated at 55$\circ$C for 30 min. Km value of the enzyme for p-nitrophenyl-$\beta$-D-xylopyranoside was calculated to be 4.6 mM. The effect of various reagents on the $\beta$-xylosidase activity was investigated. The enzyme activity was completely inhibited by Hg$^{2+}$, Cu$^{2+}$ and Zn$^{2+}$. The $\beta$-xylosidase was inactivated by tryptophan-specific reagent, N-bromosuccinimide and tyrosine-specific reagent, iodine. The enzyme could degrade xylo-oligosaccharides to xylose and the enzyme was competitively inhibited by xylose. The $\beta$-xylosidase and endoxylanase from Psedomonas sp. CB-33 hydrolized xylan synergically. The purified enzyme also showed $\alpha$-L-arabinofuranosidase activity.

• Journal of Plant Biology
• /
• 제39권4호
• /
• pp.295-300
• /
• 1996

The physiological effects of oligogalacturonic acid (OGA:D. P. 6-7), a product of acid hydrolysis of polygalacturonic acid (PGA), on ethylene biosynthesis in mung bean (Vigna radiata W.) hypocotyl segments was studied. Among PGA, OGA and monogalacturomic acid (MGA), only OGA stimulated ethylene production in mung bean hypocotyl segments, and the most effective concentraton of OGA was 50$\mu\textrm{g}$/mL. Time course data indicated that this stimulatiion effect of OGA appeared after 90 min incubation period and continued until 24 h. When indol-3-acetic acid (IAA) and 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) were treated with OGA to investigate the mechanism of OGA on ethylene production, they did not show synergistic effects on ethylene production. The stimulation of ethylene production by OGA was due to the increase of in vivo ACC synthase activity, but OGA treatment had no effect of in vivo ACC oxidase activity. The effect of aminoethoxy vinyl glycine (AVG) and Co2+, the inhibitor of ethylene synthesis, was siminished a little by the OGA, but the treatment of Ca2+, known to increase ACC, with OGA did not increase the ethylene production, this effect seems to be specific for Ca2+ because other divalent cation, Mg2+, did not show the inhibition of OGA-indyuced ethylene production. It is possible that the OGA adopts a different signal transduction pathway to the ethylene bioxynthesis.

• 생명과학회지
• /
• 제12권1호
• /
• pp.77-86
• /
• 2002

토양으로부터 chitinase를 생성하는 균주를 분리하여 동정한 결과 Bacillus subtilis로 판명되었으며, 분리한 균주를 Bacillus subtilis JK-56이라 명명하였다. B. subtilis JK-56의 chitinase 생산 최적 조건을 검토한 결과 1% chitin, 0.5% polypeptone, 0.1% KCI, 0.05% MnS $O_4$.4$H_2O$이며 초발 pH 7.0, 배양온도 37$^{\circ}C$에서 가장 많은 효소를 생산하였다. 본 균주가 생산하는 chitinase를 정제하기 위해서 native-PAGE를 이용해 효소활성 band를 확인한 결과, 1개의 강한 활성 band와 2개의 약한 활성 band를 가지는 isozyme으로 확인되었다. 확인된 isozyme을 정제한 결과, isozyme 중 1개의 강한 활성 band를 정제하였고 정제된 효소를 Chi-56A라고 명명하였다 Chi-56A의 효소 특성에 관해서 실험한 결과 분자량은 약 53kDa, pI는 4.3으로 확인되었다. 본 효소는 $65^{\circ}C$까지 상당히 안정하였으며 효소의 최대활성 온도도 $65^{\circ}C$로 확인되는 등 열에 대해 상당히 안정한 효소로 확인되었다. Collidal chitin에 대한 정제효소 Chi-56A의 $K_{m}$ 값은 17.33g/L였다. 그리고 pH 6.0에서 최대의 활성을 나타내었고, 산성범위보다 알칼리범위에서 안정한 것으로 나타났다. 또한 $Mn^{2+}$ 존재 하에서 높은 활성을 나타내었고 C $O^{2+}$와 $Mg^{2+}$ 존재 하에서도 활성이 약간 증가한 반면에 H $g^{2+}$ 존재 하에서는 상당한 저해를 받았다. Chito 올리고당에 대한 분해 산물을 HPLC로 확인해 본 결과 짝수개의 올리고당의 분해산물은 (GlcNAc)$_2$만을 생산하였고 홀수개의 올리고당에 대해서는 GlcNAc와 (GlcNAc)$_2$를 생산하는 것으로 비환원성 말단으로부터 이당체인 diacetyl chitobiose ((GlcNAc)$_2$)를 생산하는 exo형 chitinase로 추정 된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제18권2호
• /
• pp.255-262
• /
• 2008

Methyl jasmonate (MJ) and yeast extract (YE) induce protein expression and benzophenanthridine alkaloid accumulation in Eschscholtzia californica suspension cell cultures. One hundred ${\mu}M$ MJ primarily induced dihydrosanguinarine $(509.0{\pm}7.4mg/l)$ ; 0.2g/l YE induced sanguinarine $(146.8{\pm}3.8mg/l)$ and an unknown compound. These results occur because dihydrobenzophenanthridine oxidase (DHBO) is induced by YE and not by MJ. YE and chitin (CHI) had similar effects on sanguinarine production and DHBO expression. Differential induction of secondary metabolites was shown in E. californica suspension cultures and the expression of proteins confirmed the metabolite results. Furthermore, treatment by various oligosaccharides helped us to understand the elicitation effect of YE in signal transduction pathways.

• 한국작물학회지
• /
• 제62권2호
• /
• pp.143-148
• /
• 2017

콩의 성숙 종실에 들어 있는 stachyose 및 raffinose 성분은 난소화성당으로 콩이나 콩 제품의 품질, 영양가치 및 가공적성을 저하시키는 것으로 알려져 있다. Stachyose 및 raffinose의 함량이 낮은 육종계통들의 농업적 형질을 평가하여 용도별 난소화성당의 함량이 낮은 콩 품종 육성을 위한 자료를 얻기 위하여 본 실험이 진행되었으며 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 전체 7개의 모본을 이용하여 난소화성당의 함량이 낮은 10개의 $F_6$ 선발 계통은 포장 평가에서 초장, 종피색, 백립중, 성숙기, 수량, 도복등 농업형질에서 다양한 차이를 보였다. 2. 883-1 선발 계통은 백립중이 14.3 g으로 수확기가 9월 21일로 조숙이며 도복이 강하여 난소화성당 저함량 조생 소립품종 육성을 위한 중간모본으로 적당하였다. 3. 백립중이 20-26 g 범위의 중립인 5개의 계통(15A1, 15D1, RS-5, RS-64, RS-70)중에서 RS-5 계통은 백립중이 20.1 g 정도이며 종자상태가 매우 우수하고 도복에 강하여 난소화성당의 함량이 낮은 중립콩 품종 육성을 위한 중간모본으로 이용성이 높았다. 4. 난소화성당의 함량이 낮아 품질 및 기능성이 우수한 장류용콩 품종 육성을 위한 중간 모본으로 14G20 선발계통은 도복이 강하며 수량성이 매우 높고 백립중이 29.7 g 정도의 대립이었다. 5. 검정종피와 녹색자엽을 가진 RS-21 계통은 도복이 강하며, 수량성이 매우 높고 백립중이 28.7 g 정도의 대립으로, 난소화성당의 함량이 낮은 특수용콩 품종 육성을 위한 중간모본으로 이용성이 높았다.

• 미생물학회지
• /
• 제34권1_2호
• /
• pp.37-42
• /
• 1998

토양으로부터 levan을 분해하여 단일종의 fructooligosaccharide를 생산하는 새로운 미생물을 분리 선별하여 본 연구의 공시균주로 선택하였다. Levanase 생산을 위한 최적 배지조성은 0.5% levan, 0.3% yeast extract 0.3% $NaNO_3$, 0.1% $K_2HPO_4$, 0.05% NaCl(pH 8.0)이었으며, 500ml용 shaking flask에 배지 50ml를 넣어 $30^{\circ}C$에서 54시간 배양시켰을 때 목적효소의 생산이 최대에 도달하였다. Levanase에 의해 생성되는 생성물은 단일종의 oligo당임이 확인되었으며 측쇄가 많은 levan으로부터는 소량의 측쇄구조를 가진 oligosaccharide로 추정되는 미지의 물질이 부산물로 생성되었다. 생성 oligo당을 순수하게 정제하여 HPLC 및 ESI-MASS로 중합도를 조사한 결과 DP가 7인 levanheptaose임이 판명되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제20권5호
• /
• pp.574-582
• /
• 1992

Bacillus stearothermophilus exo-xylanase 유전자 DNA가 삽입된 재조합 plasmid pMG1을 가지고 있는 E.coli JM109 exo-xylanase 생산 최적 배양 조건, 생산 효소의 정제 및 정제 효소의 특성 등을 조사 연구하였다. 상기 재조합 E.coli 균주는 0.5 fructose, 0.5 yeast extract, 1.0 tryptone 및 1.0 sodium chloride가 함유된 배지에서 약 10시간 배양했을 때 최대량의 효소를 생산하였으며 생산효소의 94는 세포내에 존재하는 것으로 분석되었다. 생산 효소는 ammonium sulfate 분획, ion exchange chromatography 및 gel filtration 등의 과정을 거쳐 단일 단백질로 정제하였으며 정제 효소는 pH 6.0과 $45^{\circ}C$에서 가장 높은 효소 활성을 나타내었다.또한 1mM $Ca^{2+}$과 $Co^{2+}$ 이온의 첨가는 각각 약 25% 정도의 활성화 효과를 나타내는 반면, 본 효소의 pNPX에 대한 $K_{m}$은 2.75mM, pl값을 4.7, 그리고 분자량은 gel-filtration 법으로는 약 200,000dal., SDS-polyacrylamide gel 전기영동법으로는 약 66,000dal 으로 측정되어 세 개의 동일한 subunit로 구성된 효소 단백질인 것으로 추정되었다. 본 정제 효소는 xylobiose, xylotrioxe 및 xylotetraose 등의 xylo-oligosaccharide를 효과적으로 분해함은 물론이고, 분해율은 낮으나 birchwood xylan, larchwood xylan 및 oatspelt xylan 등의 xyland에도 작용, xylose 생산을 확인함으로써 본 효소는 그 예가 극히 드문 bacterial exo-xylanase인 것으로 분류되었다.