PAIK, SANG-KYOO;HAE-SUN YUN;HO-YONG SOHN;INGNYOL JIN
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권1호
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pp.85-89
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2003
The difference in the thermotolerance between Saccharomyces cerevisiae KNU5377 and ATCC24858 was compared by assaying the amounts of trehalose accumulated under growth and heat shock conditions. Both strains exhibited similar trehalose accumulation during the growth period, but an intrinsic thermotolerance was much higher in KNU5377 than in the control strain. This result implied that some strain-specific characteristics of KNU5377, other than trehalose accumulation, primarily were responsible fur its higher intrinsic thermotolerance. Heat shock at $43^{\circ}C$ for 90 min to the exponentially growing cells resulted in the maximum level of trehalose In both strains. Trehalose accumulated at least twice more in KNU5377 by the heat shock than in the control, due to the maintenance of its neutral trehalase activity even after the heat shock. Consequently, the Increase of acquired thermotolerance in both strains correlated with an increase in the trehalose content in each strain. In conclusion, KNU5377 exhibited a well-modulated trehalose-related mechanism to accumulate more trehalose by means of maintaining neutral trehalase activity after heat shock than the control strain, thereby contributing to its acquired thermotolerance.
Searches for the nutrition requirements of three strains of Brevibacterium ammoniagenes reported in the previous paper were carried out with an aim of achieving the striking accumulation of L-glutamic acid and the large multipication of cells. It was recognized that all three strains required both biotin and thiamine, together with amino acids such as histidine or cysteine, for their good growth and extracellular L-glutamic acid accumulation. The quantity of biotin required for remarkable growth of these microorganisms was quite different from that for the maximum production of L-glutamic acid. This result, however, did not apply in the case of thiamine. It was also confirmed that, of 18 amino acids, histidine and cysteine were the msot effective organic nitrogen sources, while the most available inorganic ammonium salt resulting in a large amount of L-glutamic acid-production and considerable cell gorwth was found to be only urea. Maximum accumulation of extracellular L-glutamic acid, more than 50%(w/w) of the initial sugar content, could be obtained from fermentation in the medium containing wheat-bran extract(Brev. ammoniagenes T-1 and Brev.ammoniagenes Y-2) or rice-bran extract(Brev. ammoniagenes YR-2), which confirmed us a possibility that these bacteria might be employed for industrial fermentation of L-glutamic acid.
Although various raw plant materials have been demonstrated to exert anti-obesity effects to a greater or lesser extent in both humans and animals when they are used to supplement the diet, it has not been shown extensively that they influence adipocyte cell differentiation involving lipid metabolic gene expressions. Using a well-established 3T3-L1 preadipocyte differentiation system, we decided to look into molecular and cellular event occurring during adipocyte differentiation when raw plant materials aye included in the process, in an effort to demonstrate the potential use of a screening system to define the functions of traditionally well-known materials. To these ends, the effects of ethanol (EtOH) or EtOH/distilled water (DW) extracts of Wax Gourd were examined using cytochemical and molecular analyses to determine whether components of the extracts modulate adipocyte differentiation of 3T3-Ll preadipocytes in vitro. The cytochemical results demonstrated that EtOH or EtOH/DW extracts did not affect lipid accumulation and cell proliferation, although the degree of lipid accumulation was influenced slightly depending on the extract. EtOH extract was highly effective in apoptotic induction during differentiation of 3T3-Ll preadipocytes (p<0.05). Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis of lipoprotein lipase (LPL), Uncoupling protein (Ucp) 2, 3 and 4 also showed that while LPL expression was not influenced, Ucp2, 3 and 4 were up regulated in the EtOH extract-treated group and down regulated in the EtOH/DW extract-treated group. These changes in gene expressions suggest that the components in different fractions of Wax Gourd extracts may modulate lipid metabolism by either direct or indirect action. Taking these results together, it was concluded that molecular and cellular analyses of adipocyte differentiation involving lipid metabolic genes should facilitate understanding of cellular events occurring during adipocyte differentiation. Furthermore, the experimental scheme and analytical methods used in this study should provide a screening system for the functional study of raw plant materials in obesity research.
The effect of sesame of L-lysine HCI and sesame supplementing a wheat flour diet on growth, liver lilpid content, and on the free amino acid levels in the plasma and liver was studied in young male rats with an initial body weight of $75{\pm}3g$. The free amino acids were analyzed by amino acid auto analyzer (JLC - 6HA, NO. 310). The results were as follows. The body weitht gain on L-lysine HCI and sesame supplemented diet was more than weight in the sesame added diet or wheat flour diet groups. Also the liver lipid contents of rats on a wheat flour diet supplemented with L-lysine HCI and sesame showed greater increases than the levels in rats on the wheat flour diets. The rate of liver lipid accumulation was depressed in rats fed L-lysine HCI supplemented wheat flour containing sesame than in rats fed soybean oil or shortening oil instead of sesame. The free phe. Tyr. Leu. Ileu. Val. Lys. levels in the plasma of rats administered the wheat flour diets supplemented with 0.25% L-lysine HCI were higher than those of rats without L-lysine HCI. The free phe. Tyr. Asp. His. Lys. contained in the liver were increased, but other free amino acids were decreased according to the L-lysine HCI amount.
Resveratrol (RVT) and epigallocatechin gallate (EGCG) individually inhibit adipogenesis in 3T3-L1 adipocytes. The objective was to examine the possibility of interaction between RVT and EGCG, resulting in enhanced inhibition of adipogenesis in 3T3-L1 adipocytes. Preadipocytes were treated with RVT and EGCG individually at 6.25 or $25{\mu}M$ (RVT6.25 or RVT25) and 12.5 or $50{\mu}M$ (EGCG12.5 or EGCG50) and in combination (RVT6.25 + EGCG12.5 and RVT25 + EGCG50). RVT25 as an individual compound decreased lipid accumulation in 3T3-L1 adipocytes by 24%, and RVT25 + EGCG50 further decreased lipid accumulation by 77%. In addition, exposure of 3T3-L1 adipocytes to RVT6.25 + EGCG12.5 and RVT25 + EGCG50 combinations resulted in an enhanced increase of adiponectin release and inhibition of leptin release. Quantitative analysis revealed that the combination of tested materials (RVT6.25 + EGCG12.5 and RVT25 + EGCG50) decreased the expression levels of C/EBP${\alpha}$, PPAR${\gamma}2$, and aP2. These results indicate that the combined treatments with RVT and EGCG produce synergistic effects on inhibiting adipogenesis in 3T3-L1 adipocytes. The overall results suggested that the combining RVT and EGCG might be more capable of exerting antiobesity effects than each individual compound by itself.
This study done to investigate the hypocholesterolemic effect of ow dietary fiber in a high cholesterol diet in aspect of cholesterol absorption and excretion using Sprague Dawley rats. After feeding diets containing 0.5% cholesterol and 5% tangerine pulp, sea tangle or prickly pear cactus for four weeks, we measured the levels of plasma and liver cholesterol and triglyceride, fecal neutral sterols and fecal radioactivity after ingestion 14(sup)C-cholesterol. We also examined platelet aggregation and histological change in liver tissues in association of hypercholesterolemia. The liver to body weight ratio was significantly(p<0.01) lower in rats fed prickly pear cactus than in other groups. The levels of plasma total cholesterol, LDL-cholesterol and triglyceride were decreased significantly(p<0.01) in the prickly pear cactus group compared with the control, while there was no difference in the liver levels of total cholesterol and triglyceride among groups. Fecal corprostanol and cholesterol were significantly(p<0.01) higher groups of control and prickly pear cactus compared to the other two groups. Radioisotope excretion after ingestion of 14(sup)C-cholesterol was higher in the control group than in tangerine pulp group or sea tangle group, with the highest in prickly pear group. Radioisotope excretion was the highest during the 2nd and 3rd days in all groups. Hematocrit and platelet aggregation were decreased in all fiber groups compared to the control, but not statistically different. Microscopic examination showed that cholesterol diet cause a fat accumulation in the liver and prickly pear cactus decreased the fat accumulation. Result indicates that prickly pear cactus has hypocholesterolemic effect by decreasing absorption and increasing excretion of cholesterol, thereby protective effect on fatty liver. Control group fed diet containing high cholesterol and low fiber seems to have a self control system in cholesterol absorption and excretion preventing hypercholesterolemia. (Korean J Nutrition 34(2) : 141-149, 2001)
Activities of lipoprotein lipase (LPL) and hormone-sensitive lipase (HSL) in adipose tissue, accumulation of carcass fat, and serum triglyceride have been determined in meal-fed (MF) and ad libitum-fed (AD) rats. At each feeding frequency, the animals received diets providing total fat as 15% or 30% of calories and polyunsaturated fatty acids (PUFA) as 2.5% or 11% of calories. The food intake of the MF rats was 75% of that consumed by the AD rats but MF rat utilized their food more efficiently, as evidenced by weight gain per 100 Kcal consumed. Meal feeding, as contrasted to ad libitum feeding, resulted in greater activities of both LPL and HSL. This suggested a higher turnover of fat in the adipose tissue of MF rats. In AD rats, body fat was significantly correlated with LPL and the ratio of LPL/HSL. Meal feeding significantly increased the ratio of LPL/HSL, indicating a greater capacity for energy storage and fat deposition in the MF rat. However, at the limited caloric intake, MF rats failed to realize this potential; there was no significant difference in percentage of body fat at the two feeding frequencies. Body fat deposition was greater in rats fed the 30% fat diet, as compared with the 15% diet, regardless of the rate of food ingestion. This was coupled with a higher ratio of LPL/HSL. The significant correlation of serum triglycerides with body fat and with the ratio of LPL/HSL in AD rats suggests that LPL activity and fat deposition may be controlled by the concentration of circulating triglycerides. Both serum triglycerides and adipose LPL activity were significantly reduced when the diet contained high levels of PUFA. The percentage of body fat was also lower in animals whose intake of PUFA was high.
Chitosan, hydroxycitrate and L-carnitine have been known to be antiobesity components. The purpose of this study was to evaluate the combined effects of chitosan, hydroxycitrate and L-carnitine mixture as a potential antiobesity supplement in overweight women. Pre-menopausal healthy females who were overweight (percent ideal body weight > 110) were included in this study. Forty-nine subjects randomly received a placebo (n = 25) or antiobesity-supplement (n = 24), which was a mixture of chitosan, hydroxycitrate, and L-carnitine. Before and after the eight-week experimental period, anthropometric parameters, blood components and computerized tomography were measured. At baseline, the two groups were well matched in terms of age, body mass index and lipid profile. After the eight weeks of potential antiobesity supplementation, the subjects' body fat percent had decreased significantly (p < 0.001) by 5.6% (39.1 $\pm$ 1 vs 36.9 $\pm$ 1%) while lean body mass increased (p < 0.01). Vsceral fat area at the L4 vertebra decreased significantly (p < 0.01) by 8.6% in the supplemented group and the total fat area at the L4 vertebra showed a tendency to decrease (p = 0.051) by 2.4%. Also, in the group given the antiobesity-supplement rather than the placebo, the fasting triglyceride level decreased significantly (p < 0.05) by 10.0%. In addition, serum total cholesterol levels in the antiobesity-supplement group showed a tendency to decrease (p=0.159) by 2.7% (194 $\pm$ 6 vs 189 $\pm$ 6 mg/dl). No side effects were found in either group during the intervention. In conclusion, the present study demonstrated that taking a mixture of chitosan, hydroxycitrate, and L-carnitine as a potential antiobesity supplement for eight weeks produced advantageous changes in the weight and visceral fat accumulation of overweight women without any side effects. (Korean J Nutrition 36(5): 483~490, 2003)
본 연구는 cadmium의 축적균주인 Pseudomonas maltophilia H-8을 MNNG로 처리하여 cadmium축적능이 가장 우수한 변이균주인 Pseudomonas maltophilia H-8M을 얻었고 그 특성을 조사하였다. 변이주 Pseudomonas maltophilia H-8M은 카드뮴농도 1,000ppm에서 36시간 배양했을 시 대조구에 비해 약 80%정도의 성장률을 나타내었다. 카드뮴 이외의 중금속의 첨가에 따른 생육상은 $Pb^{2+}$, $Zn^{2+}$, $Hg^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Cr^{2+}$, $Co^{2+}$ 등에는 별다른 성장 억제는 없었으나 $Sn^{2+}$에서는 생육억제가 나타났다. 또한 50ppm의 카드뮴을 배지에 첨가 하였을 때 균체내 카드뮴 축적율은 52.92%로 가장 높게 나타났으며 축적부위는 세포벽에 80.3%의 축적율을 나타내었다.
분화된 3T3-L1 지방세포에서 수세미오이의 메탄올 추출물이 지방의 축적 및 분해에 미치는 영향을 확인하였다. 수세미오이의 메탄올 추출물 안전범위(0~1000 ${\mu}g$/mL)에서 지방대사 관련한 여러 과정을 확인한 결과 $600\;{\mu}g$/mL 이상의 농도에서 세포 내 지방축적이 억제되었고 특히 지방구내의 triglyceride 함량이 억제되는 것으로 나타났다. 이러한 결과에 대한 기전을 위해 포도당의 유입 억제로 인한 세포내 triglyceride의 합성감소와 지방분해효소의 활성화로 인한 세포 내 triglyceride의 분해 증가의 두 가지로 확인하였다. 우선적으로 수세미오이의 메탄올 추출물의 포도당 유입 억제 효과를 실험하였지만 아무런 영향이 나타나지 않았다. 하지만 지방분해효소 중 LPL을 제외한 HSL과 ATGL의 유전자 발현이 증가됨에 따라 세포 내 triglyceride이 지방산과 glycerol로 분해되었을 것으로 생각되며 이러한 결과는 세포외로 유리된 glycerol의 함량이 수세미오이의 메탄올 추출물 $1000\;{\mu}g$/mL의 농도에서 증가한 것을 통해 재확인할 수 있었다. 하지만 $600\;{\mu}g$/mL의 농도에서 triglyceride 분해는 촉진되었으나 glycerol의 유리가 유의적으로 나타나지 않은 것은 세포 내에서 분해된 glycerol의 일부가 세포 내 생합성에 재사용되었을 것으로 생각되며 실제 세포 외로 유리된 양을 확인하기 위해서는 보다 높은 농도가 필요한 것으로 여겨진다. 전반적으로 본 실험에서는 수세미오이의 메탄올 추출물이 분화된 3T3-L1 지방세포에서 지방구의 생성을 억제하였으나 효과 농도가 다른 많은 천연물에 비해 다소 높게 나타남으로써 제약으로서의 생산으로는 제한점이 있을 것으로 생각되는 반면 식품으로서 꾸준히 사용될 경우 항비만 소재로서의 가능성이 있을 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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