The dinoflagellates have some primitive nuclear features and are evolutionarily intermediate between prokaryotes and eukaryotes. The small subunit ribosomal RAN gene, the 5.8S ribosomal RNA gene, and the internal transcribed spacer (ITS) of Gonyaulax polyedra were cloned, and their sequences were analyzed to better understand their evolutionary position. The small subunit ribosomal RNA gene was 1,794 nt long, the large subunit ribosomal RNA gene was approximately 3,500 nt long, and the 5.8S ribosomal RNA gene was 159 nt long. The first internal transcribed spacer (ITS1) was 191 nt long, and the second internal transcribed spacer (ITS2) was 185 nt long. The intergenic spacer of the ribosomal RNA gene (IGS) was about 2,200 nt long, indicating that 5,800 nt of transcribed sequences were separated by roughly 2,200 nt of intergenic spacer. The ribosomal RNA genes were repeated many times and arranged in a head-to-tail, tandemly repeated manner. The repeating unit of ribosomal RNA gene of G. polyedra was proposed to be 8,000 nt long. Based on the lengths of ribosomal RNA, sequence alignments with representative organisms, and phylogenetic analysis on ribosomal RNA, G. polyedra appears to be one of the alveolates branched from the eukaryotic crown and, among dinoflagellates, it seems to not have emerged early.
Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein E1(hnRNP E1) is one of the primary pre-mRNA binding proteins in human cells. It consists of 356 amino acid residues and harbors three hnRNP K homology(KH) domains that mediate RNA-binding. The hnRNP E1 protein was shown to play important roles in mRNA stabilization and translational control. In order to enhance our understanding of the cellular functions of hnRNP E1, we searched for interacting proteins through a yeast two-hybrid screening while using HeLa cDNA library as target. One of the cDNA clones was found to be human ribosomal protein L18a cDNA(GenBank accession number BC071920). We demonstrated in this study that human ribosomal protein L18a, a constituent of ribosomal protein large subunit, interacts specifically with hnRNP E1 in the yeast two-hybrid system. Such an interaction was observed for the first time in this study, and was also verified by biochemical assay.
Phylogenetic classification of the Aphyllophorales was conducted based on the analysis of nuclear small subunit ribosomal RNA (nuc SSU rDNA) sequence. Based on phylogenetic groupings and taxonomic characters, 16 families were recognized and discussed. Although many of the characters had more or less homoplasies, miroscopic characters such ad the mitic system and clamp, spore amyloidity and rot type appeared to be important in the classification of the Aphyllophorales. Phylogenetically significant families were newly defined to improve the classification of the order Aphyllophorales.
Because of an increased number of Acanthamoeba keratitis (AK) along with associated disease burdens, medical professionals have become more aware of this pathogen in recent years. In this study, by analyzing both the nuclear 18S small subunit ribosomal RNA (18S rRNA) and mitochondrial 16S rRNA gene loci, 27 clinical Acanthamoeba strains that caused AK in Japan were classified into 3 genotypes, T3 (3 strains), T4 (23 strains), and T5 (one strain). Most haplotypes were identical to the reference haplotypes reported from all over the world, and thus no specificity of the haplotype distribution in Japan was found. The T4 sub-genotype analysis using the 16S rRNA gene locus also revealed a clear subconformation within the T4 cluster, and lead to the recognition of a new sub-genotype T4i, in addition to the previously reported sub-genotypes T4a-T4h. Furthermore, 9 out of 23 strains in the T4 genotype were identified to a specific haplotype (AF479533), which seems to be a causal haplotype of AK. While heterozygous nuclear haplotypes were observed from 2 strains, the mitochondrial haplotypes were homozygous as T4 genotype in the both strains, and suggested a possibility of nuclear hybridization (mating reproduction) between different strains in Acanthamoeba. The nuclear 18S rRNA gene and mitochondrial 16S rRNA gene loci of Acanthamoeba spp. possess different unique characteristics usable for the genotyping analyses, and those specific features could contribute to the establishment of molecular taxonomy for the species complex of Acanthamoeba.
The Polyporaceae is a chaotic mass of genera having poroid hymenophores in the Aphyllophorales. To classify the Polyporaceae into more natural groups, phylogenetic analyses were performed using nuclear small subunit ribosomal DNA sequences. Thirty-six species from the families of the Polyporaceae, the Hymenochaetaceae, the Ganodermataceae, the Corticiaceae, the Bondarzewiaceae, the Meruliaceae, the Steccherinaceae and the Lentinaceae were phylogenetically compared. By performing maximum parsimony analysis, seven phylogenetically meaningful groups were identified and discussed. The hyphal system, presence or absence of clamps, and the type of rot were found as important characters in defining the groups. Each group was phylogenetically significant enough to be a core member of each family when the Polyporaceae was split into smaller and more natural families.
The rice belonging to Oryza sativa is not only has significant economic importance, for it is the major source of nutrition for about 3 billion all around the world. But also plays a vital role as a model organism, because it has a number of advantages to be a model plant, such as efficient transformation system and small genome size. Many methods and techniques have been conducted to attempt to distinguish different Oryza sativa species, such as amplified fragment length polymorphism (AFLP), random amplified polymorphic DNA (RAPD), simple sequence repeat (SSR) and so on. However, studies using sequence analysis of internal transcribed spacer (ITS), a region of ribosomal RNA has not been reported until now. This study was undertaken with an aim to understand the phylogenetic relationships among sixteen isolates of Oryza sativa collected from abroad and fifteen isolates collected from Korea, using ribosomal RNA (rRNA) internal transcribed spacer (ITS) sequences to compare the phylogeny relationships among different Oryza sativa species. The size variation obtained among sequenced nuclear ribosomal DNA (nrDNA) ITS region ranged from 515bp to 1000bp. The highest interspecific genetic distance (GD) was found between Sfejare 45 (FR12) and Anapuruna (FR15). Taebong isolate showed the least dissimilarity of the ITS region sequence with other thirty isolates. This consequence will help us further understanding molecular diversification in intra-species population and their phylogenetic analysis.
정확한 in vitro 전사가 일어날 수 있는 진딧물의 세포추출액을 제조하였다. 전사를 직접 조절할 수 있는 단백질 인자를 규명하기 위하여 전사개시점과 그의 상류에 결합하는 DNA 결합단백질을 탐색했다. 전사개시점을 포함하는 단편 A(-194/23)에는 52kDa, 50kDa, 40kDa의 단백질들이 결합했으며 전사개시점 상류의 DNA 단편 B(-393/-263)에는 52kDa, 50kDa, 40kDa의 단백질들이 결합한 반면 DNA 단편 C(-263/-195)는 53kDa단백질만이 결합했다. 그리고 이들 DNA 결합단백질들의 DNA 결합 활성에는 양이온이 요구되었다.
A spionid polychaete, Boccardiella hamata (Webster, 1879) has been found from mud in crevices between the shells of oysters and adherent substrates in South Korea. The sequences of mitochondrial DNA (mtDNA) cytochrome c oxidase subunit 1 (CO1), 16S ribosomal DNA (16S), and the nuclear 18S ribosomal DNA (18S) from Korean individuals of Boccardiella hamata were determined in the present study. The molecular analysis based on the 18S rRNA gene sequences showed clear separation among the spionid polychaete species, and the sequences of Korean and Japanese individuals are completely identical. The morphological diagnosis and photographs of B. hamata are also provided.
The nuclear 18S ribosomal RNA genes of seven corticioid species were sequenced. These sequences were analyzed and compared with those of 24 other species of the order Aphyllophorales and phylogenetic trees were constructed using parsimonious methods. Phylogenetic analyses showed that two species among examined members of the Corticiaceae, Resinicium bicolor and Thanatephorus praticola, are located distantly from the remaining six species. The separation of R. bicolor seems to be kphylogenetically significant because it has very unique cystidia. The independent lineage of T. practicola suggests that it is also phylogenetically distinct because it has unusual features like the homobasidium producing secondary spores and the spetal ultrastructure of pore cap. Furthermore, Auriscalpium vulgare, Bondarzewia berkeleyi, and Heterobasidion annosum from different families of the Aphyllophorales proved to be closely related to the species of the Corticiaceae. They all have amyloid spores and grouped with Aleyrodiscus amorphus, which is a member of the Corticiaceae. The amyloidity of spores seems to be an improtant character throughout the order of the Aphyllophorales.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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