Special AT-rich sequence binding protein 1 (SATB1) is a nuclear matrix-associated DNA-binding protein that functions as a chromatin organizer. SATB1 is highly expressed in aggressive breast cancer cells and promotes growth and metastasis by reprograming gene expression. Through genome-wide cross-examination of gene expression and histone methylation, we identified SATB1 target genes for which expression is associated with altered epigenetic marks. Among the identified genes, long noncoding RNA urothelial carcinoma-associated 1 (UCA1) was upregulated by SATB1 depletion. Upregulation of UCA1 coincided with increased H3K4 trimethylation (H3K4me3) levels and decreased H3K27 trimethylation (H3K27me3) levels. Our study showed that SATB1 binds to the upstream region of UCA1 in vivo, and that its promoter activity increases with SATB1 depletion. Furthermore, simultaneous depletion of SATB1 and UCA1 potentiated suppression of tumor growth and cell survival. Thus, SATB1 repressed the expression of oncogenic UCA1, suppressing growth and survival of breast cancer cells.
Purpose : Ttransfusion transmitted virus(TTV) is a circular DNA and consists of diverse genotypes and variants. The pathogenecity of TTV is still unclear. Recently another circular single stranded DNA virus, distantly related to TTV was isolated from the sera of blood donors, designated as Transfusion transmitted virus like minivirus(TLMV). TTV and TLMV show greater sequence divergence from each other than between genotypes of TTV. We planned to know the prevalence of TLMV in children. Methods : TLMV DNA was detected by PCR primers from noncoding region of the genome in 88 children without hepatitis, aged 0~15 years. PCR products derived from 10 children were directly sequenced and phylogenetic analysis was undertaken. Results : TLMV DNA was detected in 49% of 88 children without hepatitis. The prevalence of TLMV varied with age : <1 y, 16%(4/25); 1~3 y, 62%(18/29); 4~6 y, 43%(7/16); 7~9 y. 16%(1/6); 10~15 y, 66%(8/12). Mixed infection with TTV was confirmed in 22% of 88 children. Pyhlogenetic analysis of 10 TLMV sequences showed much heterogeneity compared to sequences of GenBank. Conclusion : TLMV prevalence in children was 49% in Korean children. Our TLMV sequence did not cluster in any sequence of TLMV in the GenBank.
We isolated a cDNA clone, BLSC1, encoding 5' exon of ATP synthase CF0 subunit I from broccoli. BLSC1 is 285 nucleotides long which consists of a 5' noncoding region of 34 nucleotides, a 5' exon of 145 nucleotides and an intron of 106 nucleotides. The 5' exon codes for 48 amino acids which reveals mostly hydrophobic. The amino acid sequence deduced from BLSC1 shares 83%, 83% and 91% identities with the genes coding for atpF from wheat, rice and spinach, respectively. Genomic Southern blot analysis for BLSC1 showed a typically strong signal for a gene located in the chloroplast genome. Northern blot analysis identified three major classes of transcripts showing strong positive signals in the leaves, but only trace amounts of the transcripts were identified in the other organs like stems, flowr buds and roots.
Environmental toxicants such as toxic metals can alter epigenetic regulatory features such as DNA methylation, histone modification, and non-coding RNA expression. Heavy metals influence gene expression by epigenetic mechanisms and by directly binding to various metal response elements in the target gene promoters. Given the role of epigenetic alterations in regulating genes, there is potential for the integration of toxic metal-induced epigenetic alterations as informative factors in the risk assessment process. Here, we focus on recent advances in understanding epigenetic changes, gene expression, and biological effects induced by toxic metals.
Heterochromatin protein 1 (HP1) was first described in Drosophila melanogaster as a heterochromatin associated protein with dose-dependent effect on gene silencing. The HP1 family is evolutionarily highly conserved and there are multiple members within the same species. The multi-functionality of HP1 reflects its ability to interact with diverse nuclear proteins, ranging from histones and transcriptional co-repressors to cohesion and DNA replication factors. As its name suggests, HP1 is well-known as a silencing protein found at pericentromeres and telomeres. In contrast to previous views that heterochromatin is transcriptionally inactive; noncoding RNAs transcribed from heterochromatic DNA repeats regulates the assembly and function of heterochromatin ranging from fission yeast to animals. Moreover, more recent progress has shed light on the paradoxical properties of HP1 in the nucleus and has revealed, unexpectedly, its existence in the euchromatin. Therefore, HP1 proteins might participate in both transcription repression in heterochromatin and euchromatin.
Recent technical advances, such as chromatin immunoprecipitation combined with DNA microarrays (ChIp-chip) and chromatin immunoprecipitation-sequencing (ChIP-seq), have generated large quantities of high-throughput data. Considering that epigenomic datasets are arranged over chromosomes, their analysis must account for spatial or temporal characteristics. In that sense, simple clustering or classification methodologies are inadequate for the analysis of multi-track ChIP-chip or ChIP-seq data. Approaches that are based on hidden Markov models (HMMs) can integrate dependencies between directly adjacent measurements in the genome. Here, we review three HMM-based studies that have contributed to epigenetic research, from a computational perspective. We also give a brief tutorial on HMM modelling-targeted at bioinformaticians who are new to the field.
Ultraviolet light (UV)-induced cellular response has been studied by numerous investigators for many years. Long noncoding RNAs (lncRNAs) are emerging as new regulators of diverse cellular process; however, little is known about the role of lncRNAs in the cellular response to UV treatment. Here, we demonstrate that levels of lncRNA-HOTTIP significantly increases after UV stimulation and regulates the UV-mediated cellular response to UV through the coordinate activation of its neighboring gene Hoxa13 in GC-1 cells (spermatogonia germ cell line). UV-induced, G2/M-phase arrest and early apoptosis can be regulated by lncRNA-HOTTIP and Hoxa13. Furthermore, lncRNA-HOTTIP can up-regulate ${\gamma}-H_2AX$ and p53 expression via Hoxa13 in UV-irradiated GC-1 cells. In addition, p53 has the ability to regulate the expression of both lncRNA-HOTTIP and Hoxa13 in vitro and in vivo. Our results provide new data regarding the role lncRNAs play in the UV response in spermatogenic cells.
Chung, Min A;Lou, Chung Woo;Kim, Dong Soo;Yun, Jae Deuk;Kim, Ki Soon;Lee, Yoon Sung
Pediatric Infection and Vaccine
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v.6
no.1
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pp.123-130
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1999
Purpose : Meningitis is an inflammation of meninges by various kinds of organisms. Almost 85% of aseptic meningitis is caused by Enterovirus. This study was done to detect the causative virus of those with aseptic meningitis through sequencing the 5'-noncoding region to compare prototype and homology. Methods : RNA was extracted from Coxsackie Bl, Echovirus 3, 7, 9, 30. DNA was synthesized by RT-PCR and we compared homology with prototype from WHO by direct sequencing. Results : 1) PCR products from these viruses showed same bands of 155 bp and 440 bp on gel electrophoresis. 2) Coxsackievirus and Echovirus 11 prototype sequences were compared, which showed 12 bp changes with 92.1%. 3) Coxsackievirus B1 from a patient showed 94.1% homology when compared with prototype. 4) Echovirus 3 showed 92.8%, echovirus 7 92.8%, echovirus 30 82.9% homology. Conclusion : 5'-NCR of enterovirus has high homology which was good for use of diagnosis and more long sequencing requires for typing of viruses.
This study identified genomic factors associated with endoplasmic reticulum protein (ERp)29 gene expression in a genome-wide association study (GWAS) of genetic variants, including single-nucleotide polymorphisms (SNPs). In total, 373 European genes from the 1000 Genomes Project were analyzed. SNPs with an allelic frequency of less than or more than 5% were removed, resulting in 5,913,563 SNPs including in the analysis. The following expression quantitative trait loci (eQTL) from the long noncoding RNA LOC105372577 were strongly associated with ERp29 expression: rs6138266 (p<4.172e10), rs62193420 (p<1.173e10), and rs6138267 (p<2.041e10). These were strongly expressed in the testis and in the brain. The three eQTL were identified through a transcriptome-wide association study (TWAS) and showed a significant association with ERp29 and osteosarcoma amplified 9 (OS9) expression. Upstream sequences of rs6138266 were recognized by ChIP-seq data, while HaploReg was used to demonstrate how its regulatory DNA binds upstream of transcription factor 1 (USF1). There were no changes in the expression of OS9 or USF1 following ER stress.
To understand the molecular structure of Korean garlic viruses, cDNA cloning of virus genomic RNA was attempted. Virus particles were isolated from virus-infected garlic leaves and a cDNA library was constructed from garlic virus RNA. One of these clones, S81, selected by random sequencing has been identified as a member of potexvirus group other than potyvirus and carlavirus. The clone is 873 bp long contains most of the coat protein (CP) coding region and 3'-noncoding region including poly(A) tail. A putative polyadenylation signal sequence (AAUAAA) and the hexanucleotide motif (ACUUAA), a replicational cis-acting element conserved in the 3'-noncoding region of potexvirus RNAs are noticed. The clone S81 shows about 30-40% identity in both nucleotide and amino acid sequences with CPs of potexviruses. The genome size of the virus was analysed to be 7.46 knt by Northern blot analysis, which was longer than those of other potexviruses. The open reading frame encoding CP was expressed as a fusion protein (S81CP) in Escherichia coli and the recombinant protein was purified by immobilized metal binding affinity chromatography. Polyclonal antibody was raised against S81CP in rabbit to examine the occurrence of garlic potexvirus in Korean garlic plants by immunoblot analysis. Two virus protein bands of Mr 27,000 and 29,000 from garlic leaf extract of various cultivars reacted with the antibody. It was shown that Mr 27,000 band might not be a degradation product of Mr 29,000 band, suggesting that two types of potexvirus different in size of coat protein could exist in Korean garlic plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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