Objective : This study was carried out to understand effects of ginseng(hearinafter ; GS, Panax Ginseng) extract on regeneration responses on injured sciatic nerves in rats. Methods :Using white mouse, we damaged sciatic nerve & central nerve, and then applied GS to the lesion. Then we observed regeneration of axon and non-neuron. Results : 1. NF-200 protein immunostaining for the visualization of axons showed more distal elongation of sciatic nerve axons in GS-treated group than saline-treated control 3 and 7 days after crush injury. 2. GAP-43 protein was increased in the injured sciatic nerve and further increased by GS treatment. Enhanced GAP-43 protein signals were also observed in DRG prepared from the rats given nerve injury and GS treatment. 3. GS treatment in vivo induced enhanced neurite outgrowth in preconditioned DRG sensory neurons. In vitro treatment of GS on sensory neurons from intact DRG also caused increased neurite outgrowth. 4. Phospho-Erk1/2 protein levels were higher in the injured nerve treated with GS than saline. Phospho-Erk1/2 protein signals were mostly found in the axons in the injured nerve. 5. NGF and Cdc2 protein levels showed slight increases in the injured nerves of GS-treated group compared to saline-treated group. 6. The number of Schwann cell population was significantly increased by GS treatment in the injured sciatic nerve. GS treatment with cultured Schwann cells increased proliferation and Cdc2 protein signals. 7. GS pretreatment into the injured spinal cord generated increased astrocyte proliferation and oligodendrocytes in culture. In vitro treatment of GS resulted in more differentiated pericytoplasmic processes compared with saline treatment. 8. More arborization around the injury cavity and the occurrence at the caudal region of CST axons were observed in GS-treated group than in saline-treated group. Conclusion :GS extract may have the growth-promoting activity on regenerating axons in both peripheral and central nervous systems.
In cultivating human neuroblastoma cells maximum number of neurites per cell and length of the neurite were estimated as 5.5 and 2.2 (nm), respectively It was found that there was correlation between growth and differentiation of nerve cells. Maximum specific BDNF production rate was also calculated as 2.5$\times $10$^{-5}$(ng/cell/day) at 7$\times $ 10$^{5}$ (viable cells/ml) of maximum cell density, corresponding to 100 (ng/mL) of BDNF. The secretion of BDNF was occurred most in the later peroids of the cultivation, yielding 75 (ng/mL) of BDNF. The production of rate of BDNF was elongated in adding 1 ($\mu $g/mL) of BDNF as well as 40% increase of the length of the BDNF. It proves that BDNF can be used as one of biopharmaceuticals to treat age-related diseases such as Alzheimer's disease and Prakinson's disease. It can also provide the information of scaling-up mammalian cell cuture system to economically produce BDNF.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.135.3-136
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2003
Liriope platyphylla (LP) Wang et Tang has been used for tonic, anti-tussive and expectorant in Korea. In the current study, we found that buthanol fraction of Liriope platyphylla-conditioned media of C6 and primary astrocyte induced the neurite outgrowth of PC 12 cells, which effect was reversed by addition of NGF-antibody. We demonstrated that buthanol fraction of Liriope platyphylla increased the expression and secretion of NGF through RT-PCR and ELISA. (omitted)
조직공학적 신경재생 및 파킨슨씨병 등의 시경퇴행성 질환에서의 치료에 이용 목적으로 신경성장인자(nerve growth factor, NGF)를 생분해성 고분자 담체에 NGF를 서방화시키고자 PLA 담체에 함유시켜 유화동결건조법으로 제조하였다. 제조된 NGF의 방출량은 생체외 pH 7.4, 37$^{\circ}C$의 PBS 조건하에서 4주 동안 방출실험 하였으며, 함유된 NGF의 활성을 확인하기 위하여 PC-l2 세포에 직접 배양하여 확인하였다. 제조되어진 PLA 담체는 열린 셀 구조를 가졌으며, 초기 NGF의 함량이 많을수록 방출량도 증가를 보였으며, 제조과정에서의 NGF의 환성을 확인하기 위하여 PC-12 세포를 배양한 결과 신경돌기가 성장하였다. 본 연구는 생분해성 고분자 특정인 확산과 분해에 의해서 생물학적 활성물질인 NGF의 방출을 조절할 수 있으며, 조직공학적으로 서방화되어 3차원적인 신경재생을 가능케 할 것으로 기대된다.
Dung, To Thi Mai;Yi, Young-Su;Heo, Jieun;Yang, Woo Seok;Kim, Ji Hye;Kim, Han Gyung;Park, Jae Gwang;Yoo, Byong Chul;Cho, Jae Youl;Hong, Sungyoul
BMB Reports
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제49권8호
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pp.437-442
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2016
We aimed to study the role of protein L-isoaspartyl methyltransferase (PIMT) in neuronal differentiation using basic fibroblast growth factor (bFGF)-induced neuronal differentiation, characterized by cell-body shrinkage, long neurite outgrowth, and expression of neuronal differentiation markers light and medium neurofilaments (NF). The bFGF-mediated neuronal differentiation of PC12 cells was induced through activation of mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling molecules [MAPK kinase 1/2 (MEK1/2), extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2), and p90RSK], and phosphatidylinositide 3-kinase (PI3K)/Akt signaling molecules PI3Kp110β, PI3Kp110γ, Akt, and mTOR. Inhibitors (adenosine dialdehyde and S-adenosylhomocysteine) of protein methylation suppressed bFGF-mediated neuronal differentiation of PC12 cells. PIMT-eficiency caused by PIMT-specific siRNA inhibited neuronal differentiation of PC12 cells by suppressing phosphorylation of MEK1/2 and ERK1/2 in the MAPK signaling pathway and Akt and mTOR in the PI3K/Akt signaling pathway. Therefore, these results suggested that PIMT was critical for bFGF-mediated neuronal differentiation of PC12 cells and regulated the MAPK and Akt signaling pathways.
Gilson Khang;Jeon, Eun-Kyung;John M. Rhee;Lee, Ilwoo;Lee, Sang-Jin;Lee, Hai-Bang
Macromolecular Research
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제11권5호
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pp.334-340
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2003
In order to fabricate new sustained delivery device of nerve growth factor (NGF), we developed NGF-loaded biodegradable poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA, the mole ratio of lactide to glycolide 75:25, molecular weight: 83,000 and 43,000 g/mole, respectively) film by novel and simple sandwich solvent casting method for the possibility of the application of neural tissue engineering. PLGA was copolymerized by direct condensation reaction and the molecular weight was controlled by reaction time. Released behavior of NGF from NGF-loaded films was characterized by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and degradation characteristics were observed by scanning electron microscopy (SEM) and gel permeation chromatography (GPC). The bioactivity of released NGF was identified using a rat pheochromocytoma (PC-12) cell based bioassay. The release of NGF from the NGF-loaded PLGA films was prolonged over 35 days with zero-order rate of 0.5-0.8 ng NGF/day without initial burst and could be controlled by the variations of molecular weight and NGF loading amount. After 7 days NGF released in phosphate buffered saline and PC-12 cell cultured on the NGF-loaded PLGA film for 3 days. The released NGF stimulated neurite sprouting in cultured PC-12 cells, that is to say, the remained NGF in the NGF/PLGA film at 37 $^{\circ}C$ for 7 days was still bioactive. This study suggested that NGF-loaded PLGA sandwich film is released the desired period in delivery system and useful neuronal growth culture as nerve contact guidance tube for the application of neural tissue engineering.
Background: Conditioned medium is the medium obtained from certain cultured cells and contained secretome from the cells. The secretome, which can be in the form of growth factors, cytokines, exosomes, or other proteins secreted by the cells, can induce the differentiation of cells that still have pluripotent or multipotent properties. Objectives: This study examined the effects of conditioned medium derived from E17 rat brain cells on cells with pluripotent properties. Methods: The conditioned medium used in this study originated from E17 rat brain cells. The CM was used to induce the differentiation of primary colonies of mice blastocysts. Primary colonies were stained with alkaline phosphatase to analyze the pluripotency. The morphological changes in the colonies were examined, and the colonies were stained with GFAP and Neu-N markers on days two and seven after adding the conditioned medium. Results: The conditioned medium could differentiate the primary colony, beginning with the formation of embryoid-body-like structure; round GFAP positive cells were identified. Finally, neuron-like cells testing positive for Neu-N were observed on the seventh day after adding the conditioned medium. Conclusions: Conditioned medium from different species, in this case, E17 rat brain cells, induced and promoted the differentiation of the primary colony from mice blastocysts into neuron-like cells. The addition of CM mediated neurite growth in the differentiation process.
Purpose: The purpose of this study was to investigate the effects of taro extract on brain resilience in in vitro Parkinson's disease model induced by 6-hydroxydopamine (6-OHDA). Methods: To induce a neuroinflammatory reaction and the in vitro Parkinson's disease model, SH-SY5Y cells were stimulated with lipopolysaccharide (LPS) and 6-OHDA, respectively. After that, cells were treated with at various concentrations (1, 5, and 10 mg/mL) of taro extract. Then nitric oxide (NO) production, inducible nitric oxide synthase (iNOS), interleukin (IL)-6, synaptophysin (SYP) and growth associated protein (GAP)-43 messenger ribonucleic acid (mRNA) expression level were measured. Results: Taro extract significantly suppressed LPS-induced NO production. Meanwhile, iNOS and IL-6 mRNA expression decreased in a dose-dependent manner. In addition, taro increased the mRNA expression of SYP and GAP-43 mRNA. Conclusion: These findings indicate that taro played an important role in brain resilience by inhibiting neuronal cell death and promoting neurite outgrowth, synaptogenesis, and neural plasticity. The results of this study suggest that taro may contribute to the prevention of neurodegenerative disease and become a new and safe therapeutic strategy for Parkinson's disease.
An oriental medicinal drugs Jahageo (JHG, Hominis placenta) were examined to determine its effects on the responsiveness of central nervous system neurons after injury. We found that JHG was involved in neurite outgrowth of DRG sensory axons. JHG treatment also increased expression of axonal growth-associated protein GAP-43 in DRG sensory neurons after sciatic nerve injury and in the injured spinal cord. JHG treatment during the spinal cord injury increased induction levels of cell division cycle 2 (Cdc2) protein in DRG as well as in the spinal cord. Histochemical investigation showed that induced Cdc2 in the injured spinal cord was found in non-neuronal cells. These results suggest that JHG regulates activities of non-neuronal cells such as oligodendrocyte and astrocyte in responses to spinal cord injury and protects neuronal responsiveness after axonal damage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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