탈지(脫脂) 유채박중(油菜粕中)에는 필수(必須) 아미노산(酸)이 다수함유(多數含有)한 양질(良質)의 단백질(蛋白質)을 함유(含有)하고 있으나 독소(毒素)인 myrosinase이 활성(活性)을 억제(抑制)시키거나 효소(酵素) 가수분해물(加水分解物)인 isothiocyanate 및 oxazoolidinethione을 제거(除去)하여야 한다. 이와 같은 독소(毒素)를 myrosinase 활성(活性)을 감소(減少)시키는 방법(方法)으로 처리하여 전연무독(全然無毒)한 단백질(蛋白質)을 분리(分離)하였다. 즉(卽) pH11.0에서 냉시(冷時)에 추출(抽出)하고 $0^{\circ}C$에서 침전(沈澱)을 분리(分離)하였으며 식품화학적(食品化學的)인 성질(性質) 비교(比較)를 하였다. 유채단백질(油菜蛋白質)은 분자수(分子數)가 많아 침전시(沈澱時)에는 조제(助劑)인 혹(或)은 알긴 산(酸)소 다- 를 이용(利用)하여 좋은 결과(結果)를 얻었다. 또 pH 6.7, 5.6 및 5.0에 따라 색상(色相)을 단리하는 단백질(蛋白質)이 분리(分離)되었고 수세(水洗)와 acetone을 사용(使用)하여 색소(色素)를 제거(除去)시킬 수 있었으며 냉동건조(冷凍乾燥)하여 변색(變色)을 방지(防止)하였다. 역류(逆流) 추출법(抽出法)은 양산(量産)할 수 있는 단백질(蛋白質) 추출(抽出) 방법(方法)이다.
The biologically active compounds raphasatin and sulforaphene are formed during the hydrolysis of radishes by an endogenous myrosinase. Raphasatin is very unstable, and it is generated and simultaneously degraded to less active compounds during hydrolysis in aqueous media. This study determined the hydrolysis conditions to maximize the formation of raphasatin and sulforaphene by an endogenous myrosinase and minimize their degradation during the hydrolysis of radish roots. The reaction parameters, such as the reaction medium, reaction time, type of mixing, and reaction temperature were optimized. A stability test for raphasatin and sulforaphene was also performed during storage of the hydrolyzed products at $25^{\circ}C$ for 10 days. The formation and breakdown of raphasatin and sulforaphene in radish roots by endogenous enzymolysis was strongly influenced by the reaction medium, reaction time, and type of mixing. The production and stabilization of raphasatin in radishes was efficient in water and dichloromethane with shaking for 15 min at $25^{\circ}C$. For sulforaphene, the favorable condition was water as the reaction medium without shaking for 10 min at $25^{\circ}C$. The maximum yields of raphasatin and sulforaphene were achieved in a concurrent hydrolysis reaction without shaking in water for 10 min and then with shaking in dichloromethane for 15 min at $25^{\circ}C$. Under these conditions, the yields of raphasatin and sulforaphene were maximized at 12.89 and $1.93{\mu}mol/g$ of dry radish, respectively. The stabilities of raphasatin and sulforaphene in the hydrolyzed products were 56.4% and 86.5% after 10 days of storage in water and dichloromethane at $25^{\circ}C$.
십자화과 채소를 습열처리한 thiocyanate ion의 방출량은 열처리시간이 증가함에 따라 점차 증가하여 30분 열처리시 최대치를 나타내었으나, 건열처리시는 유의적인 변화가 없었다. 또한, 내생의 효소 myrosinase에 의한 자가분해시는 방치시간이 경과함에 따라 점차 증가하여 3시간 후에 최대치를 나타내었는데, 이는 습열처리시의 최대 방출량보다 많은 양을 나타내었으며, 시료별 방출량은 양배추, 배추, 무, 케일 및 겨자의 순으로 높게 나타났다. 열처리에 따른 indoleacetonitrile의 생성량은 시간이 경과함에 따라 증가함을 나타내었으며, 시료별 생성량은 양배추 및 무 순으로 높게 나타났다.
한국식품영양과학회 2004년도 Annual Meeting and International Symposium
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pp.150-157
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2004
Cruciferous vegetables are rich in organosulfur compounds such as isothiocyanates and sulfides. While the isothiocyanates, corresponding to pungent principle, are generated from myrosinase-catalyzed hydrolysis of glucosinolates, the sulfides can be generated non-enzymatically. Recent studies provide evidences that some sulfur compounds in these vegetables show a chemopreventive action against carcinogenesis; while isothiocyanates such as sulforaphane induce phase 2 enzymes (glutathione S-transferase/quinone reductase), disulfides tends to elevate the level of phase 1 and 2 enzymes. Especially, sulforaphane rich in Cruciferae vegetables has been reported to express anticarcinogenic effect in some organs such as liver, kidney or intestine. When the level of sulfur compounds in Cruciferous and Alliaceous vegetables was determined by GC/MS (SIM), the richest in sulforaphane is broccoli followed by turnip, cabbage, radish, kale, cauliflower and Chinese cabbage. Meanwhile, the sulfides are predominant in Alliaceous vegetables such as onion. In related study, the administration of vegetable extract elevated the GST level by 1.5 fold for broccoli, 1.4 fold for radish, and 1.3 for onion. Thus, the vegetables frequently used in Korean dish contain relatively high amount of anticarcinogenic sulfur compounds. Moreover, the combination of broccoli and radish extracts elevated the GST induction up to 1.84 folds of control. In addition, the Kakdugi, fermented radish Kimchi was observed to show a comparable GST induction despite the decomposition of methylthio-3-butenylisothiocyanate (MTBI). Therefore, the combination of vegetables including broccoli, and fermented radish Kimchi would be useful as a functional food for chemoprevention.
A cDNA clone for a salicylic acid-induced gene in Chinese cabbage (Brassica rapa subsp. pekinensis) was isolated and characterized. The cabbage gene, designated Br-sil1 (for $\underline{B}$rassica $\underline{r}$apa $\underline{s}$alicylate-$\underline{i}$nduced $\underline{l}$lipase-like 1 gene), encodes a putative lipase that has the family II lipase motif GDSxxDxG around the active site serine. A database search showed that plant genomes have a large number of genes that contain the family II lipase motif. The lipase-like proteins include a myrosinase-associated protein, an anther-specific proline-rich protein APG, a pollen coat protein EXL, and an early nodule-specific protein. The Br-sil1 gene is strongly induced by salicylic acid and a non-host pathogen, Pseudomonas syringae pv. tomato, that elicits a hypersensitive response in Chinese cabbage. Treatment of the cabbage leaves with BTH, methyl jasmonate, or ethephon showed that the Br-sil1 gene expression is induced by BTH, but not by methyl jasmonate or ethylene. This indicates that the cabbage gene is activated via a salicylic acid-dependent signaling pathway. An examination of the tissue-specific expression revealed that the induction of the Br-sil1 gene expression by BTH occurs in leaves and stems, but not in roots and flowers. Without the BTH treatment, however, the Br-sil1 gene is not expressed in any of the tissues that were examined.
브로콜리의 조리가공 방법에 따른 sulforaphane(4-methylsulfinylbutyl isothiocyanate) 생성량을 GC/MSD로 분석하여 chemoprotection에 가장 효과적인 조리방법을 모색하고자 하였다. Sulforaphane량이 가장 많은 브로콜리의 조리 가공방법은 생즙(juice)이었으며, 브로콜리 생즙 제조시 sulforaphane최대 함유조건은 Vitamin C, 1mM이 첨가된 pH 7 buffer에서 마쇄후 실온에서 1시간 방치하였을 때이었다. 가열시(10$0^{\circ}C$ 물)에는 시간 경과에 따라 감소하여, 건조시에도 5분 가열시에는 생즙의 40%, 30분 가열시에는 약 10%존재하여 많이 감소되었으며, 건조시에는 열풍 건조 방법(30%)이 동결 건조 방법(50%)에 비해 더 많이 감소되었다. 브로콜리 생즙제조조건에 따라 sulforaphane함량이 달랐는데 마쇄시의 pH는 1일때가 가장 많았고, pH 4 및 pH 9에서는 10%및 60%이었고 pH 7에서 마쇄시 실온에 방치되는 시간은 1시간, Vitamin C 첨가량은 1mM정도 이었을때 생즙중의 sulforaphane량이 최대이었다.
6-7월, 8-9월, 10-11월, 12-4월(2007년) 및 5월(2008년)에 수확한 신선배추, 절임공정 및 김치 제조과정을 거친 배추를 겉잎과 속잎 부위로 나누어 anion-exchange column을 통과시키고 아세톤 침전법을 사용하여 제조한crude myrosinase로 반응시켜 total glucosinolates 함량을 분석하였다. 신선배추의 경우 6-7월 신선배추의 total glucosinolates 함량이 가장 높은 함량을 나타내었으며, 모든 수확기간에서 속잎보다 겉잎이 대체로 높은 것으로 나타났다. 가공처리 한 배추의 total glucosinolates 함량을 분석 한 결과, 절임배추의 경우 8-9월 절임배추에서 가장 높게 나타났으며, 5월 절임배추의 경우 다른 수확기간에 비해 낮은 함량인 것으로 분석되었다. 부위 별 절임배추의 total glucosinolates 함량은 6-7월 절임배추와 8-9월 절임배추의 경우 겉잎의 함량이 속잎의 함량 보다 높은 것으로 분석된 반면, 10-11월, 12-4월 및 5월 절임배추에서는 속잎의 함량이 높은 것으로 확인 되었다. 배추김치의 경우 6-7월, 8-9월 김치의 total glucosinolates 함량은 비교적 높은 함량을 나타내었으며, 5월 김치의 경우 다른 수확시기에 비해 낮은 함량인 것으로 측정되었다. 배추김치의 부위별 total glucosinolates함량은 5월 배추김치의 경우 속잎의 함량이 겉잎의 함량보다 높게 분석된 반면, 6-7월, 8-9월, 10-11월 배추김치의 경우 겉잎의 함량이 속잎의 함량보다 높은 것으로 분석되었다. 모든 수확기간에서 신선배추의 total glucosinolates 함량보다 가공 처리한 절임배추, 배추김치의 total glucosinolates 함량이 감소하는 경향을 볼 수 있었다. 이러한 분석 결과는 배추의 total glucosinolates 함량이 수확기간, 부위 및 가공처리에 따라 영향을 받는 것으로 사료되며, total glucosinolates 함량에 영향을 줄 수 있는 배추의 부위, 품종, 재배방법 및 재배환경(pH, 온도, 기후, 토양 등)은 고려 되어야 한다고 판단된다.
잘게 부순 유채씨를 토양에 처리하여 토양중의 선충을 친환경적으로 방제하고 오이의 수량을 높이고자 2007년부터 2009년까지 3년간 시험한 결과 토양에 유채종실의 시용량이 많을수록 처리 후 50일에 토양 중 cyanate의 량이 많은 것을 볼 수 있었는데 유채 200 kg/10a을 시용한 토양 중 thiocyanate의 량은 30 mg/kg, 400 kg/10a을 시용한 토양은 40 mg/kg 으로 조사되었다. 토양선충 밀도는 관행의 경우 토양 300 g당 463 마리로 피해유발 수준인 150마리보다 보다 훨씬 높은 밀도로 가시적인 피해가 나타났으나 유채를 처리한 모든 시험구 토양의 경우 토양 300 g당 13~17마리로 뿌리혹 선충의 피해는 나타나지 않았다. 수량은 유채 시 용량이 많을수록 6~15% 증수하는 경향이나 선충 피해 예방과 경제성을 고려할 때 10a당 200 kg를 시용하는 것이 좋을 것으로 사료되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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