Lymphocytes that secrete antibodies can be made immortal by fusing them with myeloma tumor cells (cell fusion) and cloning the hybrids (hybridomas). Each clone is a long-term source of substantial quantities of a single highly specific antibody (monoclona
Background: Symptomatic multiple myeloma (MM) is an acquired B-cell malignant proliferation of antibody secreting plasma cells, characterized by end organ damage due to monoclonal immunoglobulin secretion. The aim of this study wa to determine the stage stratification according to an international scoring system in adult Pakistani MM patients at presentation. Materials and Methods: This single centre retrospective study extendedfrom January 2012 to December 2015. Data were retrieved from the departmental maintained records. Results: A total of 39 patients were diagnosed at our center with MM during the period of the study, 25 males and 14 females. Age ranged between 36 and 81 with a mean of $54.5{\pm}14.8$ and a median of 57 years. Common presenting complaints included fatigue (80.9%), backache (79.3%) and bone pain (66.2%). Overall, 9 patients were in ISS stage I (23%), 12 were in stage II (30.7%) and 18 were in stage III (46.1%). Out of the total, 29 (74.3%) had kappa immunoglobulin andthe remaining 10 (25.6%) had lambda type myelomas. IgG myeloma was commonest, seen in 26 (66.6%) followed by IgA in 11 (28.2%) with non secretory myeloma in one (2.5%) and light chain disease also in one patient (2.5%). Conclusions: MM in Pakistani patients is seen in a relatively young population with male predominance. Primarily patients are symptomatic and risk stratification revealed a predominance of advanced stage III disease in our setting.
In the present study, the protective effects of Bcl-2 over-expression in a suspension culture (without any adaptation) and spent medium (low nutrient and high toxic metabolite conditions) were investigated. In the suspension culture without prior adaptation, the viability of the control cell line fall to 0% by day 7, whereas the Bcl-2 cell line had a viability of 65%. The difference in the viability and viable cell density between the Bcl-2 and control cell lines was more apparent in the suspension culture than the static culture, and became even more apparent on day 6. Fluorescence microscopic counting revealed that the major mechanism of cell death in the control cell line in both the static and suspension cultures was apoptosis. For the Bcl-2 cell lines, necrosis was the major mode of cell death in the static culture, but apoptosis became equally important in the suspension culture. When the NS0 6A1 cell line was cultured in spent medium taken from a 14 day batch culture, the control cell line almost completely lost its viability by day 5, whereas, the Bcl-2 still had a viability of 73%. The viable cell density and viability of the Bcl-2 cell line cultivated in fresh medium were 2.2 and 2.7 fold higher, respectively, than those of the control cultures. However, the viable cell density and viability of the Bcl-2 cultivated in the spent medium were 8.7 and 7.8 fold higher, respectively, than those of the control cultures. Most of the dead cells in the control cell line were apoptotic; whereas, the major cell death mechanisms in the Bcl-2 cell line were necrotic.
Background and Aims: Scutellaria is one of the most popular traditional Chinese herbal remedies against various human diseases, including cancer. In this study, we examined the active effects of Scutellaria extract and its main flavonoid constituents on the proportion of side population cells within human multiple myeloma cell line RPMI8226 in vitro and explored the potential molecular mechanisms involved. Materials and Methods: The contents of flavonoids in ethanolic extract of Scutellaria baicalensis Georgi were determined using high performance liquid chromatography. The antiproliferative effect of the ethanolic extract on RPMI-8226 was determined by CCK assay. Apoptosis was measured by annexin combining with propidium iodide in a flow cytometer. Cell cycle analysis was performed by propidium iodide staining in combination with flow cytometry analysis. Hoechst 33342 exclusion assay was used for the identification of side population within RPMI8226 cells. The expression of ABCG2 protein was assessed by Western blotting assay. Results: The content of major flavonoids constitutents of Scutellaria extract was baicalin (10.2%), wogonoside (2.50%), baicalein (2.29%), and wogonin (0.99%), respectively. The crude Scutellaria extract did not show significant anti-proliferative effect, apoptosis induction and cell cycle arrest in RPMI-8226 within the concentrations of $1-75{\mu}g/mL$. However, the ethanolic extract, baicalein, wogonin and baicalin reduced the side population cells in RPMI-8226, and data showed that baicalein and wogonin had stronger inhibitory effects. Correspondingly, they also exhibited significant effects on decreasing the expression level of ABCG2 protein in RPMI-8226 in vitro. Conclusions: Our results for the first time demonstrated a novel mechanism of action for Scutellaria extract and its main active flavonoids, namely targeting SP cells by modulating the expression of ABCG2 protein. This study provides an insight for new therapeutic strategies targeting cancer stem cells of multiple myeloma.
AIDS 환자의 치명적인 2차 감염을 유발하는 Cryptosporidium parvum 의 Infective stage 인 sporozoites의 단일군 항체를 분리하였다. Oocysts를 효소처리하여 sporozoites를 excystation시킨 후 Isopycnic percoll gradients를 이용하여 sporozoites를 순수분리한 후 단일군 항체 생산을 위한 항원으로 사용하였다. 두 달된 BALB/c 쥐를 immunize한 후 splenocytes와 P3-X63-Ag8 myeloma cells를 융합시킨 후 hybridoma 기술을 이용해 Kor1(IgGl), Ea2(Ig2a) 두 clones을 분리하였으며 정제된 sporozoites를 SDS-PAGE로 분리한 후 Western blot을 이용하여 단일군 항체 Kor1과 Ea2는 20,000 daltons 크기의 항원을 인식하였다. Immunofluorescent assay에서 단일군 항체가 sporozoites 표면에 반응하는 것으로 보아 20-kDa 단백질 항원은 sporozoites 표면에 위치하는 항원으로 밝혀졌으며 C. parvum에 감염되었을 때 항체생성에 관여하는 중요 항원 중 하나일 것으로 추정되었다.
페디스토마 성충의 단백질을 정제하여 이를 항원으로 면역시킨 mouse의 spleen cell과 myeloma cell을 세포융합 시킨 결과 융합율은 56% 이었고. 3차 cloning한 후의 항체생산율은 89% 이였으며, 이들 융합세포로 부터 IgM을 생산하는 hybridoma clone과 IgG을 생산하는 hybridoma clone을 얻었다. IgM을 생산하는 hybridoma clone의 supernate는 antibody titer가 희석농도 1 : 64까지 양성이었고. IgG을 생산하는 hybridoma clone의 supernate는 1 : 256까지 양성이었다.
Abdelgawad, Iman A.;Radwan, Noha H.;Shafik, Roxan E.;Shokralla, Hala A.
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제17권5호
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pp.2389-2394
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2016
Background: Multiple myeloma (MM) is influenced by genetic and micro-environmental changes. Malignant plasma cells produce an abnormal monoclonal immunoglobulin, as well as cytokines, such as IL-10 and IL-6 which stimulate cells of the bone marrow microenvironment (BMM) and cause dysfunction and failure of many organs. B cell activating factor (BAFF), IL6, IL10 are known to influence the growth & survival of the malignant clone. Aim: The objectives of the present study were to investigate the circulating levels of BAFF, IL-10 and IL-6, correlate them with well-known parameters of disease activity in patients with MM, and to detect their impact on the patients' survival. Materials and Methods: This study was conducted on 89 newly diagnosed MM patients and seventy apparently healthy volunteers as a normal control group. BAFF, IL6, IL10 were measured by ELISA for both groups. Survival analysis was performed for all patients. Results: Studied markers were higher in the MM patients compared to the normal control subjects. Patients' survival was improved by high serum BAFF levels. Conclusions: High levels of BAFF were found to improve patients' survival. BAFF and IL-6 can be considered probable diagnostic markers for MM.
Abdelgawad, Iman A;Radwan, Noha H;Shafik, Roxan E;Shokralla, Hala A
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제17권3호
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pp.1351-1355
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2016
Background: Multiple myeloma (MM) is influenced by genetic and micro-environmental changes. Malignant plasma cells produce an abnormal monoclonal immunoglobulin, as well as cytokines, such as IL-10 and IL-6 which stimulate cells of the bone marrow microenvironment (BMM) and cause dysfunction and failure of many organs. B cell activating factor (BAFF), IL6 and IL10 are known to influence the growth and survival of malignant clones. Aim: The objectives of the present study were to investigate the circulating levels of BAFF, IL-10 and IL-6, correlate them with well-known parameters of disease activity in patients with MM, and to detect their impact on patients' survival. Materials and Methods: This study was conducted on 89 newly diagnosed MM patients and seventy apparently healthy volunteers as a normal control group. BAFF, IL6, IL10 were measured by ELISA for both groups and survival analysis was performed for all patients. Results: Studied markers were higher in the MM patients compared to the normal control subjects. Patients survival was improved by high serum BAFF levels. Conclusions: High levels of BAFF were found to improve patients' survival. BAFF and IL-6 can be considered probable diagnostic markers for MM.
Pedro Henrique Chaves Isaias;Fabio Wildson Gurgel Costa;Pedro Henrique Goncalves Holanda Amorim;Raul Anderson Domingues Alves da Silva;Fabrício Bitu Sousa;Karuza Maria Alves Pereira;Ana Paula Negreiros Nunes Alves;Mario Rogério Lima Mota
Imaging Science in Dentistry
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제54권2호
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pp.211-220
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2024
Non-secretory multiple myeloma (NSMM) is a rare cancer of plasma cells characterized by the absence of detectable monoclonal M protein in the blood or urine. A 57-year-old woman presented with mandibular pain but without intraoral swelling. Imaging studies revealed multiple osteolytic lesions in her mandible and pronounced root resorption of the left mandibular second molar. Biopsy results showed atypical plasmacytoid cells positive for anti-kappa, CD138, MUM1, and CD79a antibodies, but negative for anti-lambda and CD20. These results were indicative of a malignant plasma cell neoplasm. No abnormalities were revealed by free light chain assay or by serum or urine protein electrophoresis, leading to a diagnosis of NSMM. The patient began chemotherapy in conjunction with bisphosphonate therapy and achieved remission following treatment. This case underscores the critical role of dentists in the early detection and prevention of NSMM complications, as the disease can initially present in the oral cavity.
Song, Geu Rim;Choi, Yoon Jung;Park, Soo Jin;Shin, Subeen;Lee, Giseong;Choi, Hui Ji;Lee, Do Yup;Song, Gyu-Yong;Oh, Sangtaek
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제31권11호
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pp.1559-1567
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2021
The root bark of Morus alba L. has cytotoxic activity against several types of cancer cells. However, little is known about its chemopreventive mechanisms and bioactive metabolites. In this study, we showed that M. alba L. root bark extracts (MRBE) suppressed β-catenin response transcription (CRT), which is aberrantly activated in various cancers, by promoting the degradation of β-catenin. In addition, MRBE repressed the expression of the β-catenin/T-cell factor (TCF)-dependent genes, c-myc and cyclin D1, thus inhibiting the proliferation of RPMI-8226 multiple myeloma (MM) cells. MRBE induced apoptosis in MM cells, as evidenced by the increase in the population of annexin VFITC-positive cells and caspase-3/7 activity. We identified ursolic acid in MRBE through LC/mass spectrum (MS) and observed that it also decreased intracellular β-catenin, c-myc, and cyclin D1 levels. Furthermore, it suppressed the proliferation of RPMI-8226 cells by stimulating cell cycle arrest and apoptosis. These findings suggest that MRBE and its active ingredient, ursolic acid, exert antiproliferative activity by promoting the degradation of β-catenin and may have significant chemopreventive potential against MM.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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