Park, Sang-Jung;Cho, Jang-Eun;Kim, Yoon-Suk;Cho, Sang-Nae;Lee, Hye-Young
Biomedical Science Letters
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v.18
no.3
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pp.201-209
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2012
Apoptosis is a physiological programmed cell death process. Tubercle bacilli inhibit apoptosis of alveolar macrophages and phagolysosome fusion. We investigated whether the Bcl-2 family anti-apoptotic member, Bfl-1/A1, plays an important role in the anti-apoptotic process during mycobacterial infection. PMA-treated human monocytoid THP-1 cells were infected with mycobacteria (H37Rv, BCG, and K-strain) at a multiplicity of infection (MOI) of 10 for 0, 1.5, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 48, or 72 h. In addition, PMA-treated THP-1 cells were pretreated with specific inhibitors for 45 min before stimulation with mycobacteria at an MOI of 10 for 4 h. After the indicated time, the cells were subject to reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis, and a Bfl-1/A1-specific Western blot was performed. In PMA-differentiated THP-1 cells, the expression level of Bfl-1/A1 mRNA was increased by Mycobacterium tuberculosis (MTB) H37Rv infection. The mRNA level of Bfl-1/A1 peaked 3 h after MTB infection, then declined gradually until 9 h. However, Bfl-1/A1 mRNA induction gradually re-increased from 24 h to 72 h after MTB infection. No difference in Bfl-1/A1 expression was detected following infection with MTB H37Rv, K-strain, or M. bovis BCG. These results were not dependent on mycobacterial virulence. Moreover, mRNA levels of other anti-apoptotic molecules (Mcl-1, Bcl-2, and Bcl-xL) were not increased after MTB H37Rv or K-strain infection. These results suggest that mycobacteria induce the innate immune host defense mechanisms that utilize Bfl-1/A1 molecules at early time points, regardless of virulence.
Background : Infection caused by rapidly growing mycobacteria (RGM) is not uncommon, and the prevalence of RGM infection has been increasing. Clinical diagnosis is difficult because there are no characteristic clinical features. There is also no standard antibiotic regimen for treating RGM infection. A small series of patients with RGM infections was studied to examine their treatments and outcomes. Methods : A total of 5 patients who had developed postoperative infections from January 2009 to December 2010 were retrospectively reviewed. Patients were initially screened using a mycobacteria rapid screening test (polymerase chain reaction [PCR]-reverse blot hybridization assay). To confirm mycobacterial infection, specimens were cultured for nontuberculous mycobacteria and analyzed by 16 S ribosomal RNA and rpoB gene PCR. Results : The patients were treated with intravenous antibiotics during hospitalization, and oral antibiotics were administered after discharge. The mean duration of follow-up was 9 months, and all patients were completely cured of infection with a regimen of a combination of antibiotics plus surgical treatment. Although none of the patients developed recurrence, there were complications at the site of infection, including hypertrophic scarring, pigmentation, and disfigurement. Conclusions : Combination antibiotic therapy plus drainage of surgical abscesses appeared to be effective for the RGM infections seen in our patients. Although neither the exact dosage nor a standardized regimen has been firmly established, we propose that our treatment can provide an option for the management of rapidly growing mycobacterial infection.
Idiopathic CD4+ T-lymphocytopenia is defined as a depletion of CD4+ lymphocytes below $300/mm^3$ in the absence of HIV infection or other known causes of immunodeficiency. Many infectious diseases have been reported to be associated with idiopathic CD4+ T-lymphocytopenia, and there have also been a few cases of mycobacterial infection in idiopathic CD4+ T-lymphocytopenia. Until now, it has been unclear as to whether CD4+ T-lymphocytopenia is a predisposing factor for or a consequence of the mycobacterial infection. Pulmonary alveolar proteinosis is an uncommon disease characterized by the intraalveolar deposition of amorphous granular material that stains positive with PAS, and its association with mycobacterial infection has rarely been reported. Recently, we experienced a previously healthy young man who had been diagnosed as idiopathic CD4+ T-lymphocytopenia with disseminated mycobacterium kansasii infection and pulmonary alveolar proteinosis, and report this case.
Augmentation mammoplasty is one of the most popular cosmetic surgeries, but there is a high reoperation rate (29.7%) commonly due to capsular contracture, implant malpositioning, infection, and unsatisfactory size. Although infection only accounts for 2% of cases, its management is very challenging, especially with nontuberculous mycobacteria (NTM) infection. Breast prosthetic NTM infection is a rare but is a disastrous condition with an incidence of approximately 0.013%. Immediate salvage reimplantation is usually not suggested, and most studies recommend a gap of 3 to 6 months after combination antibiotics therapy before reimplantation. However, delayed reimplantation often leads to great psychological stress and struggle between the doctor and patient. We present the case report of successful reimplantation in treating prosthetic NTM infections in a 28-year-old female. We discuss a novel technique "transaxillary capsulorrhaphy" to correct the bottoming-out deformity. One year after the combination of antibiotics and surgery, the follow-up computed tomography scan showed complete remission of NTM without recurrence. We discuss the surgical technique in detail. The 1-year follow-up assessment (photos and dynamic video) revealed good cosmesis and reliable correction using the new technique. This report is the first formal description and discussion of one-stage reimplantation following NTM infections. Transaxillary capsulorrhaphy allows for a successful salvage operation when an implant is displaced. This approach provides highly favorable result in eastern women undergoing revision augmentation mammoplasty. This study reflects level of evidence V, considering opinions of respected authorities based on clinical experience, descriptive studies, or reports of expert committees.
Tuberculosis is one of the most threatening infectious diseases to public health all over the world, for which Mycobacterium tuberculosis (MTB) is the etiological agent of pathogenesis. Ursolic acid (UA) has immunomodulatory function and exhibits antimycobacterial activity. However, the intracellular killing effect of UA has yet to be elucidated. The aim of this study was to evaluate the intracellular killing effect of UA during mycobacterial infection. The intracellular killing activity of UA was evaluated in the macrophage cell line THP-1 by the MGIT 960 system as well as by CFU count. The production of reactive oxygen species (ROS) and the level of nitric oxide (NO) were measured using DCF-DA and Griess reagent, respectively. Phagocytosis was observed by a fluorescence-based staining method, and the colony forming units were enumerated on 7H11 agar medium following infection. In addition, MRP8 mRNA expression was measured by qRT-PCR. UA significantly decreased the number of intracellular Mycobacterium through generation of ROS and NO. In addition, it profoundly activated the phagocytosis process of THP-1 cells during MTB-infection. Furthermore, our data demonstrated that UA activated the phagocytosis process in human monocyte cells through MRP8 induction. These data suggest that UA firmly contributes to the intracellular killing effect of macrophages during mycobacterial infection.
Background: Mycobacterial infection is a problem throughout the world along with the increase of immunocompromised patients. For this reason, there have been many methods for faster and more accurate diagnosis. In this study, we evaluated several laboratory methods for mycobacterial infection. Methods: From January to December 2009, 635 specimens were cultured with mycobacteria growth indicator tube (MGIT) and Ogawa media. Polymerase chain reaction (PCR) was performed with the AdvanSure tuberculosis (TB)/non-tuberculosis mycobacterium (NTM) real-time PCR Kit (LG Life Sciences, Seoul, Korea). The 69 samples showing positive culture results were identified with the AdvanSure Mycobacteria Genotyping Chip Kit (LG Life Science, Seoul, Korea). Results: Sixty-nine (10.9%) out of 635 samples showed positive results for mycobacterial culture. Among the 635 samples, 64 were positive in MGIT, but only 42 were positive in Ogawa media. Of the 635 samples, 607 (95.6%) showed the same results between MGIT and Ogawa and the results of 579 (95.4%) were also consistent with the TB/NTM real-time PCR results. However, in the case of NTM, only one (1/24, 4.2%) was positive in PCR. In the Mycobacteria genotyping chip analysis, the most frequently identified NTM species in descending order were M. avium, M. intracellulare, M. chelonae and M. abscessus. Conclusion: Culturing with a combination of MGIT and Ogawa is recommended to increase the recovery rate of mycobacteria. Although PCR missed a reasonable number of NTM, it is faster and usually gives results that concur with those from the culture. The appropriate combination of diagnostic methods with clinical correlation are necessary.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.34
no.6
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pp.561-571
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1999
Diagnosis of mycobacterial infection is dependent upon the isolation and identification of causative agents. The procedures involved are time consuming and technically demanding. To improve the laborious identification process mycobacterial systematics supported by gene analysis is feasible, being particularly useful for slowly growing or uncultivable mycobacteria. To complement genetic analysis for the differentiation and identification of mycobacterial species, an alternative marker gene, rpoB encoding the ${\beta}$ subunit of RNA polymerase, was investigated. rpoB DNAs (342 bp) were amplified from 52 reference strains of mycobacteria including Mycobacterium tuberculosis H37Rv (ATCC 27294) and clinical isolates by the PCR. The nucleotide sequences were directly determined (306 bp) and aligned using the multiple alignment algorithm in the MegAlign package (DNASTAR) and MEGA program. A phylogenetic tree was constructed with a neighborhood joining method. Comparative sequence analysis of rpoB DNA provided the basis for species differentiation. By being grouped into species-specific clusters with low sequence divergence among strains belonging to same species, all the clinical isolates could be easily identified. Furthermore RFLP analysis enabled rapid identification of clinical isolates.
Kim, Jung-Ho;Park, Yun-Jung;Park, Ki-Hoon;Kwon, Soon-Seog;Kim, Yong-Hyun
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.72
no.2
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pp.223-227
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2012
Pulmonary siderosis, or Welder's lung disease is an occupational lung disease caused by iron-inhalation. Diagnosis of pulmonary siderosis is based on occupational history of the patient, radiologic findings, and pathologic findings of iron-laden macrophages within lung tissue or broncho-alveolar lavage fluid. We observed a case of a 43 years-old welder diagnosed with pulmonary siderosis via thoracoscopic lung biopsy. Sputum culture along with pathology also identified a non-tuberculotic mycobacterial infection with a sputum culture and the pathologic findings. The patient was treated with anti-tubercular medication and cessation of iron-exposure. And his condition improved within a few months.
As the prevalence of tuberculosis declines, the proportion of nontuberculous mycobacterial (NTM) lung disease is increasing in Korea. The combined use of liquid and solid media increases the sensitivity of mycobacterial culture and shortens culture time. Because NTMs are ubiquitous in the environment, NTM lung disease requires strict diagnostic criteria to prevent over-diagnosis of NTM lung disease. Mycobacterium avium complex is the most common pathogen of NTM lung disease in Korea and present in two forms: upper lobe cavitary and nodular bronchiectatic form. Decision of treatment of NTM lung disease depends on the infecting species and overall condition of the patient. Because medical therapy requires the use of multiple drugs over 18 to 24 months, surgery for localized disease may be useful for those species refractory to medical therapy.
Mycobacterium tuberculosis (Mtb) is an etiologic pathogen of human tuberculosis (TB), a serious infectious disease with high morbidity and mortality. In addition, the threat of drug resistance in anti-TB therapy is of global concern. Despite this, it remains urgent to research for understanding the molecular nature of dynamic interactions between host and pathogens during TB infection. While Mtb evasion from phagolysosomal acidification is a well-known virulence mechanism, the molecular events to promote intracellular parasitism remains elusive. To combat intracellular Mtb infection, several defensive processes, including autophagy and apoptosis, are activated. In addition, Mtb-ingested phagocytes trigger inflammation, and undergo necrotic cell death, potentially harmful responses in case of uncontrolled pathological condition. In this review, we focus on Mtb evasion from phagosomal acidification, and Mtb interaction with host autophagy, apoptosis, and necrosis. Elucidation of the molecular dialogue will shed light on Mtb pathogenesis, host defense, and development of new paradigms of therapeutics.
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