We investigated the effect of nutritional and environmental factors on Ophiocordyceps longissima mycelial growth. The longest colony diameter was observed on Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract, Schizophyllum (mushroom) genetics minimal medium, and Sabouraud dextrose agar (SDA); however, malt-extract yeast-extract agar, SDA plus yeast extract, yeast-extract malt-extract peptone dextrose agar, SDA, oatmeal agar, and potato dextrose agar showed higher mycelia density. A temperature of $25^{\circ}C$ was optimum and 7.0 was the optimum pH for mycelial growth. Colony diameter was similar under light and dark conditions. Maltose and yeast extract showed the highest mycelial growth among carbon and nitrogen sources respectively. The effect of mineral salts was less obvious; however, $K_3PO_4$ showed slightly better growth than that of the other mineral salts tested. Among all nutrition sources tested, complex organic nitrogen sources such as yeast extract, peptone, and tryptone were best for mycelial growth of O. longissima. Ophiocordyceps longissima composite medium, formulated by adding maltose (2% w/v), yeast extract (1% w/v), and $K_3PO_4$ (0.05% w/v) resulted in slightly longer colony diameter. In vitro mycelial O. longissima growth was sustainable and the production of fruiting bodies could be used for commercial purposes in the future.
동충하초는 예로부터 아시아권에서 한방약재로 사용되어 온 곤충병원성진균이다. 이 중 노린재동충하초(Cordyceps nutans)는 자연 상태에서 비교적 많이 발견되나 이에 대한 연구가 미미한 편이다. 따라서 본 실험에서는 C. nutans 균사체의 최적 배양 조건을 확립하고 배양액 처치 시대식세포의 NO (nitric oxide) 생성 억제 효능을 조사하였다. 균사 생육 적정 온도는 $25^{\circ}C$이었으며 pH는 7.0~8.0 사이의 중성범위로 조사되었다. MCM (mushroom complete medium), V8A (V8 juice agar), YMD (yeast malt dextrose) 배지에서는 균사 생육이 우수하였으나 MMM (mushroom minimal medium) 배지의 경우 균사 생육이 이루어지지 않아 영양원이 필수적이었다. 영양원 선발에 있어 탄소원은 dextrose와 sucrose가 적합하였고 질소원은 ammonium citrate가 균사 생장에 적합하였다. RAW 264.7 세포에 대한 C. nutans 배양액의 세포 독성은 나타나지 않았으며 LPS (lipopolysaccharide)를 처리 한 세포의 NO 생성량은 농도 의존적으로 줄어들었다. 따라서 본 실험 결과는 C. nutans 배양 시 다량의 균사체를 확보할 수 있는 최적 조건을 제공할 뿐 아니라 C. nutans의 항염 관련 우수한 생리 활성이 있음을 보여준다.
The filamentous fungus Fusarium graminearum is an important cereal pathogen. Although quantitative realtime PCR (qRT-PCR) is commonly used to analyze the expression of important fungal genes, no detailed validation of reference genes for the normalization of qRT-PCR data has been performed in this fungus. Here, we evaluated 15 candidate genes as references, including those previously described as housekeeping genes and those selected from the whole transcriptome sequencing data. By a combination of three statistical algorithms (BestKeeper, geNorm, and NormFinder), the variation in the expression of these genes was assessed under different culture conditions that favored mycelial growth, sexual development, and trichothecene mycotoxin production. When favoring mycelial growth, GzFLO and GzUBH expression were most stable in complete medium. Both EF1A and GzRPS16 expression were relatively stable under all conditions on carrot agar, including mycelial growth and the subsequent perithecial induction stage. These two genes were also most stable during trichothecene production. For the combined data set, GzUBH and EF1A were selected as the most stable. Thus, these genes are suitable reference genes for accurate normalization of qRT-PCR data for gene expression analyses of F. graminearum and other related fungi.
Lactobacillus casei KC-324 was tested for its ability to inhibit aflatoxin production and mycelial growth of Aspergillus flavus ATCC 15517 in liquid culture. flatoxin $B_{1}$ biosynthesis and mycelial growth were inhibited in both simultaneous culture and individual antagonism assays, suggesting that the inhibitory activity was due to extracellular metabolites. produced in cell-free supernatant fluids of the cultured broth of L. casei KC-324. In cell-free supernatant fluids of all media tested, deMan, Rogosa and Sharpe broth, potato dextrose broth, and Czapek-Dox broth+1% yeast extract showed higher antiaflatoxigenic activity. In these case, fungal growths, however, was not affected as measured by mycelial dry weight. The antiaflatoxigenic metabolites from L. casei KC-324 were produced over wide range of temperatures between $25^{\circ}C$ and $37^{\circ}C$. However, these metabolites were not thermostable since the inhibitory activity of the supernatant was inactivated within 30 minutes at $100^{\circ}C$ and $121^{\circ}C$. The inhibitory activity was not influenced by changing pH of supernatant between 4 and 10. However, the antiaflatoxigenic activity was slightly reduced at pH 10.
Jung, Ji-Young;Hong, Seong-Cheol;Rinker, Danny Lee;Choi, Myung-Suk;Lee, Byung-Hyun;Yang, Jae-Kyung
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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제38권2호
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pp.124-134
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2010
This study was performed to evaluate the efficiency of using softwood as the sawdust medium for Lentinula edodes cultivation, effect of nutrient on the mycelial growth, spawning, the mushroom yield, and quality. The nitrogen nutrition significantly enhanced the mycelial growth of L. edodes. The glutamic acid in the L. leptolepis and P. koraiensis, and asparagine in the P. densiflora were appeared to slight increase in the mycelial growth. The vegetable oil showed very effective on the mycelial growth in the P. koraiensis sawdust medium. Carbon/nitrogen ratio of all the test was reduced after mycelial growth. The mycelial growth was exclusively dependent on reduction of carbon. The mushroom yield (32.7%) of the P. densiflora sawdust medium (carbon source: 3% active carbon, nitrogen source: 0.4% asparagines) was the best in mushroom production of L. edodes, followed by the Q. variabilis sawdust (35.4%) of the control medium. The diameter of mushroom cap was obtained from the P. densiflora sawdust (carbon source: 3% sucrose, nitrogen source: 0.4% potassium nitrate) and P. koraiensis sawdust (carbon source: 3% sucrose, nitrogen source: 0.4% potassium nitrate), and the P. koraiensis sawdust (carbon source: 3% xylose, nitrogen source: 0.4% glutamic acid, supplement: 0.05% amino acid), with values 71.5 mm, 71.5 mm and 72.1 mm, respectively. In the polypropylene bag cultivation, the weight losses of the block medium gradually increased for 80 days in the dark (13.8~16.8%) and then became stable in the range of 20.7~25.8%.
The recycling method of enokitake cultural waste and the potentiality of second flush for enokitake were determined, because this fungus is not as prolific as the more commonly cultivated white rot fungi in the conversion of sawdust to mycelial mass. The mycelial growth of F. velutipes on several substrates, variously treated with rice bran was promoted at ratios of 10-20% (w/w) on all substrates, but suppressed at above ratios, although some difference was there. The mycelial densities generally increased correlated to the supplementation contents of rice bran. It could be concluded that F. velutipes preferred mild acidic to acidic conditions for mycelial growth, considering that the mycelial growth rate was highest on waste of pH 6.01, treated with 0.1 % Ca(OH)$_2$ and on populus mixed waste of pH 6.02, non treated. The ranges of substrate bulk densities, which was pertinent for mycelial linear growth were from B.D. (g/cc) 0.17 to 0.23 on waste and populus mixed waste all. The pertinent contents of rice bran supplementation in bottle cultivation was from 20 to 30% on waste and 20% on populus mixed waste, considering the requried duration for pinheading and fruiting yields. Standard bulk density for filling and utilizing the waste and populus mixed waste for commercial f. velutipes cultivation were B.D.(g/cc) 0.19 ~ 0.23, and 0.23~ 0.25, which could be conversed to 510~ 540g/900m1 and 520~ 570g/900m1, respectively, The second flush of F. velutipes was tried and the re-inoculation by sawdust and liquid spawn showed somewhat good results, indicating the potentiality of second crop and suggesting further research for it.
High prices of raw materials used as media for the mushroom cultivation increased the cost of commercial production of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus). In this study, garlic peels (Allium sativum f. pekinese) as an agricultural by-product were investigated to replace the saw dust for the bottle cultivation of oyster mushroom. Mycelial growth of oyster mushroom were examined by the extracts made from the sawdust, rice bran and garlic peels. The mycelial growth was very poor in the agar media containing the extracts of sawdust or garlic peels, but was good when those of the rice bran were added. In the polypropylene bottle experiment, the sawdust medium which ammended with minerals vitamin was essential for the production of the mushroom fruitbodies. The rice bran was considered to stimulate the mycelial growth, but not the development of basidiocarps. The garlic peel was not a factor to stimulate the production of mushroom fruitbodies, but a raw material ammended with the rice bran produced much amounts of mushroom. In this work, garlic peels ($10{\sim}70%$ v/v) added to the mixture of sawdust and rice bran (4 : 1, v/v) was considered to help the productions of mushroom fruitbodies. Based on the result, the replacement of expensive saw dust with inexpensive garlic peels was a good example to reduce production cost of the bottle cultivation of mushroom.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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