수입되는 중국산 완성형 배지를 대체하고, 수출에 적합한 표고 완성형 배지를 개발하고자 본 연구를 수행한 결과 참나무톱밥+미송톱밥+파옥쇄(40:40:20, v/v) 혼합배지인 T13에서 pH 5.3으로 대조구와 비슷하였으며 C/N율은 82로 대조구 52 대비 높게 나타났다. 배지조성별 균사 생장을 조사한 결과 영양원으로 파옥쇄 혼합 시 균사 생장이 빨라지는 것을 확인할 수 있었으며, 대조구 대비 균사 생장이 빠르고 밀도가 높은 3가지 처리를 1차 선발하였다. 1차로 선발된 3가지 처리를 본 배지에 접종하고 배양특성을 조사한 결과 T12, T13, T18 3처리 모두 대조구 대비 배양기간이 단축되었고, 그 중 T13에서 대조구 대비 '농진고'는 12일, '참아람'은 10일 배양기간이 단축되었으며 특히 2품종 모두 갈변 소요일수가 크게 단축되었다. 1차 선발한 3처리를 재배생육한 결과 '농진고'는 T13에서 대조구 대비 갓이 크고 두꺼웠으며, 대도 길고 굵어 개체중이 높게 나타났다. '참아람' 품종에서도 비슷한 경향을 나타냈으나 대 직경은 대조구 대비 가는 형태를 나타내었다. 1주기부터 5주기까지의 배지조성에 따른 혼합배지별 수량은 파옥쇄가 영양원으로 혼합된 T12, T13, T18 배지조성에서 대조구 대비 모두 수량이 증가하였으며, 그 중 T13에서 대조구 대비 '농진고'는 5.9%, '참아람' 12.6% 증수되었다. 이러한 연구 결과를 바탕으로 참나무톱밥+미송톱밥+파옥쇄(40:40:20, v/v) 혼합배지를 표고 완성형 배지의 적합 배지로 최종 선발하였다.
국내외에서 수집된 10종의 느타리버섯 균사를 버섯 완전 배지에 배양한 후 균사체에 형성된 분생자(分生子) (conidia)를 관찰 하였다. 느타리버섯(P. ostreatus), 사철느타리버섯(P. florida), 노랑느타리버섯(P. cornucopiae), 맛느타리버섯(P. sapidus), 여름느타리버섯(P. sajor-caju), 분홍느타리버섯(P. salmoneostramineus) 외에 P. dryinus, P. eryngii, P. pulmonarius, 및 P. cystidiosus 균사에서 conidia가 형성되었다. Conidia 형태는 구형과 타원형의 2가지였고 2핵 균사체 뿐만 아니라 1핵 균사체에서도 conidia를 형성하였다. Conidia는 버섯 완전 배지에서 관찰되었으나 버섯 최소 배지에서는 관찰하지 못하였으며 담자포자에 UV를 처리하여 conidia를 형성하지 못하는 변이균주를 선발하였다.
식용버섯의 일종인 참느타리버섯 P. spodoleucus의 유전육종을 위하여 균사체로부터의 원형질체 분리와 분리된 원형질체의 환원에 영향을 미치는 몇가지 요인을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 원형질체 분리에 알맞는 효소로는 Novozym 234이며, 삼투압 조절제로는 0.6 M sucrose, 효소처리 시간은 3 시간이었다. 그리고 균사체 배양일수는 exponential phase인 3 일이었으며, colony의 $cm^2$당 원형질체 생성수는 $3.43{\times}10^{5}ml^{-1}$이었다. 2. 원형질체 환원에 알맞는 삼투압 조절제는 0.6 M sucrose이며, 환원율은 0.01-0.28%였다.
This study investigated the cultural characteristics of Shimizuomyces paradoxus in different nutritional and environmental conditions. The highest mycelial growth was observed in Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract agar medium, and the optimal temperature and pH were $25^{\circ}C$ and pH 8.0, respectively. The optimal carbon and nitrogen sources were 1% dextrose and 1% peptone in agar. However, in liquid culture the highest dry mycelium weight was found for the potato dextrose agar and potato sucrose agar broths. The optimum inoculum size was five mycelial discs (5 mm) per 100 mL of broth, and the optimum liquid culture period was 25 days. This is the first ever report of S. paradoxus cultural characteristics.
맛버섯균의 균사 배양을 위한 최적배지는 버섯완전배지(MCM), 최적균사 생장온도는 25 C, 최적pH는 5.0이었다. 균사생장이 가장 양호한 탄소원은 GLUCOSE, MANNOSE, 질소원은 YEAST EXTRACT, PEPTONE 및 ASPARAGINE, 등 이었다. 톱밥 병재배시($850m{\ell}$) 30일 배양후 숙성일수에 따른 초발이소요일, 자실체 생육일 수 및 수량을 검토한 결과 숙성하지 않은 배양 30일 처리시 초발이소요일 15~20일, 병당 수량 79g인 반면 숙성일수가 가장 긴 배양 70일 처리시 초발이 소요일 6~9일, 병당 수량 98g으로 숙성 일수가 길수록 초발이소요일이 빠르고, 수량이 증가하는 경향이었다. PP봉지 재배시 배 850g 배지에서 초발이소요일 17~21일, 갓의 수 39개, 수량 157g으로 배지 회수율이 가장 양호하였다.
Metacordyceps yongmunensis is a newly reported species from Korea, which is very similar to Cordyceps species in morphological characters. It grows on large lepidopteran pupa, and numerous white stromata grow on a single host. Mycelial growth characteristics of M. yongmunensis isolates were studied in different media and at different temperatures. Also, different carbon sources, nitrogen sources, and mineral salts were tested for mycelial growth of M. yongmunensis. Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract, Schizophyllum (mushroom) genetics minimal medium, and Martin's peptone dextrose agar produced longer colony diameters and more compact mycelial density than other media. The optimum temperature for mycelial growth was $25^{\circ}C$. Carbon sources such as sucrose, soluble starch, dextrose, glucose, dextrin, maltose, and fructose showed better mycelial growth, whereas peptone, yeast extract and tryptone resulted in the best mycelial growth of all of the nitrogen sources tested. All of the mineral salts tested showed similar growth as the control, except $K_2HPO_4$ which showed longer colony diameter and more compact mycelial density. The compact colonies were white and cottony with a greenish margin. The results showed that M. yongmunensis is an easy fungus to growas it grew from 30 to more than 50 mm in 2 wk.
We investigated the effect of nutritional and environmental factors on Ophiocordyceps longissima mycelial growth. The longest colony diameter was observed on Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract, Schizophyllum (mushroom) genetics minimal medium, and Sabouraud dextrose agar (SDA); however, malt-extract yeast-extract agar, SDA plus yeast extract, yeast-extract malt-extract peptone dextrose agar, SDA, oatmeal agar, and potato dextrose agar showed higher mycelia density. A temperature of $25^{\circ}C$ was optimum and 7.0 was the optimum pH for mycelial growth. Colony diameter was similar under light and dark conditions. Maltose and yeast extract showed the highest mycelial growth among carbon and nitrogen sources respectively. The effect of mineral salts was less obvious; however, $K_3PO_4$ showed slightly better growth than that of the other mineral salts tested. Among all nutrition sources tested, complex organic nitrogen sources such as yeast extract, peptone, and tryptone were best for mycelial growth of O. longissima. Ophiocordyceps longissima composite medium, formulated by adding maltose (2% w/v), yeast extract (1% w/v), and $K_3PO_4$ (0.05% w/v) resulted in slightly longer colony diameter. In vitro mycelial O. longissima growth was sustainable and the production of fruiting bodies could be used for commercial purposes in the future.
맛느타리버섯(Pleurotus sapidus)의 원형질체 분리 및 환원에 영향을 미치는 제 요인의 최적조건을 구명한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 원형질체의 분리에 알맞는 균사체의 배양은 ${30}^{\circ}C$의 버섯완전배지에서 4일이며, 세포벽 분해효소는 Novozym 234, ${\beta}-D-Glucanase$, ${\beta}Glucuronidase$를 각각 15mg/ml씩 혼합 사용하였을 때 가장 양호하였다. 또한 삼투압 조절제로는 0.6M Sucrose를 pH 조절없이 사용하고 ${30}^{\circ}C$에서 2시간동안 반응시키는 것이 가장 효과적이었다. 원형질체의 환원은 삼투압 조절제로 0.6M Sucrose를 사용하고, 0.75%의 한천을 피복하였을때 환원율이 2%로 최대였다.
동충하초는 예로부터 아시아권에서 한방약재로 사용되어 온 곤충병원성진균이다. 이 중 노린재동충하초(Cordyceps nutans)는 자연 상태에서 비교적 많이 발견되나 이에 대한 연구가 미미한 편이다. 따라서 본 실험에서는 C. nutans 균사체의 최적 배양 조건을 확립하고 배양액 처치 시대식세포의 NO (nitric oxide) 생성 억제 효능을 조사하였다. 균사 생육 적정 온도는 $25^{\circ}C$이었으며 pH는 7.0~8.0 사이의 중성범위로 조사되었다. MCM (mushroom complete medium), V8A (V8 juice agar), YMD (yeast malt dextrose) 배지에서는 균사 생육이 우수하였으나 MMM (mushroom minimal medium) 배지의 경우 균사 생육이 이루어지지 않아 영양원이 필수적이었다. 영양원 선발에 있어 탄소원은 dextrose와 sucrose가 적합하였고 질소원은 ammonium citrate가 균사 생장에 적합하였다. RAW 264.7 세포에 대한 C. nutans 배양액의 세포 독성은 나타나지 않았으며 LPS (lipopolysaccharide)를 처리 한 세포의 NO 생성량은 농도 의존적으로 줄어들었다. 따라서 본 실험 결과는 C. nutans 배양 시 다량의 균사체를 확보할 수 있는 최적 조건을 제공할 뿐 아니라 C. nutans의 항염 관련 우수한 생리 활성이 있음을 보여준다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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