Kim, Sang-Woo;Hwang, Hye-Jin;Baek, Yu-Mi;Hwang, Hee-Sun;Yun, Jong-Won
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권10호
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pp.1109-1121
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2009
In an attempt to discover novel biomarker proteins in type 2 diabetes prognosis, we investigated the influence of hypoglycemic extracellular polysaccharides (EPS) obtained from the macrofungus Tremella fuciformis on the differential levels of plasma proteins in ob/ob mice using two-dimensional gel electrophoresis (2-DE). The 2-DE analysis demonstrated that 92 spots from about 900 visualized spots were differentially regulated, of which 40 spots were identified as principal diabetes-associated proteins. By comparing control with EPS-fed mice, we found that at least six proteins were significantly altered in ob/ob mice, including Apo A-I, IV, C-III, E, retinol-binding protein 4, and transferrin, and their levels were interestingly normalized after EPS treatment. Western blot analysis revealed that the altered levels of the two regulatory molecules highlighted in diabetes and obesity (e.g., resistin and adiponectin) were also normalized in response to EPS. The Mouse Diabetes PCR Array profiles showed that the expression of 84 genes related to the onset, development, and progression of diabetes were significantly downregulated in liver, adipocyte, and muscle of ob/ob mice. EPS might act as a potent regulator of gene expression for a wide variety of genes in ob/ob mice, particularly in obesity, insulin resistance, and complications from diabetes mellitus.
Proteomics is a useful approach to know protein expression, post-translational modification and protein function. We investigated the protein expression pattern and identity in pigs fed with the tissue culture medium waste after harvest of Korean wild ginseng (TCM-KWG) (Panax ginseng). Two groups (n = 30/group) of pigs were administered with 0 (control) and 16 ml/L (treatment) TCM-KWG through drinking water. After 4 weeks, we examined the protein expression pattern of longissimus dorsi muscle by Two-dimensional electrophoresis analysis. TCM-KWG treatment significantly increased two spot's density, and markedly reduced one spot's density in the muscles. We identified 3 proteins (heat shock protein 90-alpha, myosin binding protein and cofilin 2) by the ESI-MS/MS (Q-TOF2, Micromass). These results demonstrate that TCM-KWG treatment may play a protection role against physiological stress in pigs, like as increased heat shock protein 90-alpha.
Kim, Nam-Soo;Shen, Yan-Nan;Kim, Tae-Yoon;Byun, Sung-June;Jeon, Ik-Soo;Kim, Sang-Hoon
BMB Reports
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제40권2호
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pp.212-217
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2007
The chicken oviduct is a dynamic organ that produces secretory proteins such as ovalbumin during the laying period. In this study, we identified oviduct-specific proteins in hens during the egg-laying period by proteomic analysis. Proteins extracted from the magnum of hens of different ages (5, 35, and 65 weeks) were analyzed by two-dimensional gel electrophoresis to compare the intensity of proteins among samples. Approximately 300 spots were detected on each gel. Based on the comparison of image gels, we found that the intensity of eight spots in 35-week magnums was increased at least by 2-fold compared with the others. Five of the eight spots were identified as calumenin, acidic ribosomal phosphoproteins (ARP), prohibitin, heart fatty acid-binding protein, and anterior gradient-2 (AGR-2). In particular, ARP and AGR-2 were highly expressed in 35- week magnums compared with 5- and 65-week magnums. In addition, the level of these proteins was consistent with their RNA levels. Expression of AGR-2 mRNA was detected in the mature magnum, whereas no signal was observed in premature tissue. Among various tissues, expression of AGR-2 mRNA was highest in the magnum, high in the isthmus, and five fold lower in muscle. It was undetectable in the liver and in other tissues (heart and kidney). However, the mRNA levels of other proteins were ubiquitous among tissues. In transcriptional activity of AGR-2, a 3.0 kb fragment of promoter region containing potential estrogen receptor binding sites had enhanced its activity strongly. In conclusion, these results suggest that AGR-2 has functional regulatory roles in the chicken oviduct during the egglaying period.
Ohsaki, H.;Okada, M.;Sasazaki, S.;Hinenoya, T.;Sawa, T.;Iwanaga, S.;Tsuruta, H.;Mukai, F.;Mannen, H.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제20권5호
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pp.638-644
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2007
Differences of meat qualities between Japanese Black and Holstein have been known in Japan, however, the causative proteins and/or the genetic background have been unclear. The aim of this study was to identify candidate proteins causing differences of the meat qualities between the two breeds. Using technique of two-dimensional gel electrophoresis, protein profiling was compared from samples of the longissimus dorsi muscle and subcutaneous adipose tissue. Five protein spots were observed with different expression levels between breeds. By using LC-MS/MS analysis and Mascot program, three of them were identified as ankyrin repeat protein 2, phosphoylated myosin light chain 2 and mimecan protein. Subsequently, we compared the DNA coding sequences of three proteins between breeds to find any nucleotide substitution. However, there was no notable mutation which could affect pI or molecular mass of the proteins. The identified proteins may be responsible for different characteristics of the meat qualities between Japanese Black and Holstein cattle.
The objectives of this study were to examine serum periplakin expression in patients with urothelial carcinoma of the urinary bladder and in normal controls, and to examine relationships with clinicopathological findings. Detection of serum periplakin was performed in 50 patients and 30 normal controls with anti-periplakin antibodies using the automatic dot blot system, and a micro-dot blot array with a 256 solid-pin system. Levels in patients with urothelial carcinoma of the urinary bladder were significantly lower than those in normal controls (0.31 and 5.68, respectively; p<0.0001). The area under the receiver-operator curve level for urothelial carcinoma of the urinary bladder was 0.845. The sensitivity and specificity, using a cut-off point of 4.045, were 83.7% and 73.3%, respectively. In addition, serum periplakin levels were significantly higher in patients with muscle-invasive cancer than in those with nonmuscle-invasive cancer (P = 0.03). In multivariate Cox proportional hazards regression analysis, none of the clinicopathological factors was associated with an increased risk for progression and cancer-specific survival. Examination of the serum periplakin level may play a role as a non-invasive diagnostic modality to aid urine cytology and cystoscopy.
Proteomics is a useful approach to know protein expression, post-translational modification and protein function. We investigated the protein expression pattern and identity in chickens fed with the tissue culture medium waste after harvest of Korean wild ginseng (TCM-KWG) (Panax ginseng). Two groups (n=60/group) of day old broiler chickens were administered with 0 (control) and 0.8% (treatment) TCM-KWG through drinking water. After 5 weeks, we examined the protein expression pattern of fibularis longus and superficial pectoral muscle by Two-dimensional electrophoresis analysis. Interestingly, TCM-KWG treatment significantly increased five spot's density, and markedly reduced five spot's density in the muscles. We identified 10 proteins (desmin, myosin light chain 1, heat shock 25 kDa protein, collapsin response mediator protein-2A, alpha enolase, vimentin, actin alpha 1, my023 protein, pyruvate kinase and troponin T) by the matrix-assisted laser desorption ionization time of flight (MALDI-TOF).
The aim of this review was to understand the effects of ${\beta}$-adrenergic stimulation on oxidative stress, structural remodeling, and functional alterations in the heart and cerebral artery. Diverse stimuli activate the sympathetic nervous system, leading to increased levels of catecholamines. Long-term overstimulation of the ${\beta}$-adrenergic receptor (${\beta}AR$) in response to catecholamines causes cardiovascular diseases, including cardiac hypertrophy, stroke, coronary artery disease, and heartfailure. Although catecholamines have identical sites of action in the heart and cerebral artery, the structural and functional modifications differentially activate intracellular signaling cascades. ${\beta}AR$-stimulation can increase oxidative stress in the heart and cerebral artery, but has also been shown to induce different cytoskeletal and functional modifications by modulating various components of the ${\beta}AR$ signal transduction pathways. Stimulation of ${\beta}AR$ leads to cardiac dysfunction due to an overload of intracellular $Ca^{2+}$ in cardiomyocytes. However, this stimulation induces vascular dysfunction through disruption of actin cytoskeleton in vascular smooth muscle cells. Many studies have shown that excessive concentrations of catecholamines during stressful conditions can produce coronary spasms or arrhythmias by inducing $Ca^{2+}$-handling abnormalities and impairing energy production in mitochondria, In this article, we highlight the different fates caused by excessive oxidative stress and disruptions in the cytoskeletal proteome network in the heart and the cerebral artery in responsed to prolonged ${\beta}AR$-stimulation.
Cho, Jin Hyoung;Lee, Ra Ham;Jeon, Young-Joo;Park, Seon-Min;Shin, Jae-Cheon;Kim, Seok-Ho;Jeong, Jin Young;Kang, Hyun-sung;Choi, Nag-Jin;Seo, Kang Seok;Cho, Young Sik;Kim, MinSeok S.;Ko, Sungho;Seo, Jae-Min;Lee, Seung-Youp;Shim, Jung-Hyun;Chae, Jung-Il
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권11호
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pp.1653-1663
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2016
Meat quality is a complex trait influenced by many factors, including genetics, nutrition, feeding environment, animal handling, and their interactions. To elucidate relevant factors affecting pork quality associated with oxidative stress and muscle development, we analyzed protein expression in high quality longissimus dorsi muscles (HQLD) and low quality longissimus dorsi muscles (LQLD) from Duroc pigs by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS)-based proteomic analysis. Between HQLD (n = 20) and LQLD (n = 20) Duroc pigs, 24 differentially expressed proteins were identified by LC-MS/MS. A total of 10 and 14 proteins were highly expressed in HQLD and LQLD, respectively. The 24 proteins have putative functions in the following seven categories: catalytic activity (31%), ATPase activity (19%), oxidoreductase activity (13%), cytoskeletal protein binding (13%), actin binding (12%), calcium ion binding (6%), and structural constituent of muscle (6%). Silver-stained image analysis revealed significant differential expression of lactate dehydrogenase A (LDHA) between HQLD and LQLD Duroc pigs. LDHA was subjected to in vitro study of myogenesis under oxidative stress conditions and LDH activity assay to verification its role in oxidative stress. No significant difference of mRNA expression level of LDHA was found between normal and oxidative stress condition. However, LDH activity was significantly higher under oxidative stress condition than at normal condition using in vitro model of myogenesis. The highly expressed LDHA was positively correlated with LQLD. Moreover, LDHA activity increased by oxidative stress was reduced by antioxidant resveratrol. This paper emphasizes the importance of differential expression patterns of proteins and their interaction for the development of meat quality traits. Our proteome data provides valuable information on important factors which might aid in the regulation of muscle development and the improvement of meat quality in longissimus dorsi muscles of Duroc pigs under oxidative stress conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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