• 한국수정란이식학회지
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• 제30권3호
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• pp.213-218
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• 2015

In the study for a differentiation and development of spermatogonial cells, the researchers should commonly require a simple, fast and reasonable method that could evaluate the developmental stage of male germ cells without any damage and also relentlessly culture them so far as a cell stage aiming at experimental applications. For developing the efficient method to identify the stage of sperm cells, the morphological characteristics of sperm cells were investigated by staining the cells with blue fluorescent dye Hoechst 33258, and a criterion for male germ cell classification was elicited from results of the previous investigation, then the efficiency of the criterion was verified by applying it to assort the germ cells recovered from male mice in age from 6 to 35 days. As morphological characteristics, spermatogonia significantly differed from spermatocytes in size, appearance and fluorescent patches of nucleus, and spermatids could also be distinguished from spermatozoa by making a difference in the volume and shape of nucleus and the shape and fluorescence of tail. Aforesaid criterion was applicable for classifying in vitro cultured sperm cells by verifying its efficiency and propriety for assorting the stages of testicular germ cells. However, the fluorescent staining showed that germ cells in mouse testis should be dramatically differentiated and developed at 21 days and 35 days of age, which were known as times of sexual puberty and maturity in male mice, respectively. In conclusion, the results indicated that this simple criterion for sperm cell classification using fluorescence staining with Hoechst 33258 may be highly efficient and reasonable for spermatogenesis study.

• 한국HCI학회:학술대회논문집
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• 한국HCI학회 2009년도 학술대회
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• pp.111-115
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• 2009

본 논문은 마스터 형상 분할에 기반한 스키니 스머지 툴에 관한 것이다. 스머지 툴(smudge tool)은 어도비 포토샵에 내장된 대중적인 그래픽 툴로서 물감을 화폭 상에 문질러서 흐려지게 할 시에 이용된다. 그 효과는 지두화법과 매우 유사하다. 스머지 툴은 스머지 아이콘을 클릭한 다음에 화폭 위를 클릭한 후, 마우스 버튼을 누른 상태에서 번짐 효과를 주고 싶은 방향으로 끌어당김으로써 그 기능을 이용할 수 있다. 그러나 기존의 스머지 툴은 마스터 직경 내의 모든 화소값을 블렌딩시켜 목표 영상을 생성함에 따라 원하지 않는 부위의 화소마저도 변형시키는 단점이 있다. 이러한 단점을 해결하고자 본 논문에서는 마스터 형상 분할에 기반한 스키니 스머지 툴(skinny smudge tool)을 제안하고자 한다. 제안된 스키니 스머지 툴은 컬러 영상 분할에 통해 윤곽 형상에 밀착된 마스터 형상을 추출함에 따라 배경에 관계없이 변형하고 싶은 부분에만 번짐 효과를 적용시킬 수 있는 장점이 있다.

• 대한구순구개열학회지
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• 제10권2호
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• pp.81-88
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• 2007

Cleft lip and palate (CLP) is one of the most prevalent congenital craniofacial anomalies. It has a significantly greater incidence of dental abnormalities in number, size, shape, and eruption of the teeth. Knout-out mouse model can identify several genes which play an important role in tooth agenesis. Since disruption of these genes has been confirmed to result in tooth agenesis in humans, CLP associated with hypodontia may be the best models for isolated tooth agenesis. According to the studies of dental abnormalities in CLP, the severity of dental defect is known to be influenced by the CLP phenotype. The cumulative data obtained from mouse and human genetic studies indicated that MSX1, PAX9 and AXIN2 are considered as candidate genes in non-syndromic hypodontia, while Shh, Pitx2, Irf6, p63 and EDA pathway genes are involved in syndromic one. We expect that genetic approach of CLP can offer the basis for tooth regeneration and be a new target in hypodontia therapy.

• Nuclear Engineering and Technology
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• 제31권4호
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• pp.385-390
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• 1999

Ovarian follicles are faced with one of two fates, atresia or development. Up to 99% of follicles become degenerated rather than ovulated in female life span. Thus, atresia occurs at all stages of follicle development in mammalian ovaries. In the present experiment, the effect of ${\gamma}$-radiation on primordial follicles was morphologically analyzed in a mouse ovary. Thirty-seven percent of the primordial follicles in the non-irradiated control mice ovaries were abnormal. At day 8 post irradiation, most of primordial follicles became atretic. They lost their integrity of architecture in the follicular shape. Then, all the oocytes disappeared from the follicles. And only 3 to 4 granulosa cells lay down onto the basement membrane. Disappearance of granulosa cells or oocytes resulted from the radiation-induced apoptotic process. It is definitely clear that ${\gamma}$-radiation induces rapid apoptotic degeneration of the primordial follicles. The morphological degeneration induced by radiation in the primordial follicles can be used as an experimental model to draw out a deeper insight for radioprotectant researches.

• Restorative Dentistry and Endodontics
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• 제16권1호
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• pp.158-166
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• 1991

In order to investigate the cytotoxicity of composite resin in vitro, BALB / C mouse fibroblast were cultured in MEM in which silux, P-50, microrest, clearfil, amalgam and glass - ionomer, in shape of $2{\times}9mm$ circular disk. The experiments were- performed by cell count on 4 hours, 1, 3, 6 days and the composite resin groups, amalgam, glass - ionomer were compared. 1. On the sixth day, the cellular number of resin composite groups were remarkedly reduced, in contrast, the that of amalgam and glass - ionomer group continuously increased. 2. It was only on the 4 hours that the cellular number contained in amalgam were reduced, but increased thereafter, and the cellular number contained in glass - ionomer are greater than other groups. 3. In resin group, especially between self - curing resin and light - curing resin, there is no difference in cellular number statistically (p>0.05). 4. It was amalgam where the round cell without cellular process was found on the 4. hours and on the 6 th day the cell without cellular process was found numeroulsy in resin group whereas in amalgam and glass - ionomer, like control group was contained cell forming monolayer. These result suggested that the toxicity of the self - curing and light - curing resin greater than that of the amalgam and glass - ionomer.

• 대한의생명과학회지
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• 제25권4호
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• pp.398-406
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• 2019

Cancer immunotherapy using gene-modified tumor cells is safe and customized cancer treatment method. In this study, we made gene-modified tumor cells by transferring costimulatory molecules, 4-1BBL and OX40L, into tumor cells using lentivirus vector, and identified anti-cancer effect of gene-modified tumor cells in CT26 mouse colorectal tumor model. We construct pLVX-puro-4-1BBL, -OX40L vector for lentivirus production and optimized the transfection efficiency and transduction efficiency. The transfection efficiency is maximal at DNA:cationic polymer = 1:0.5 and DNA 2 ㎍ for lentivirus production. Then, the lentiviral including 4-1BBL and OX40L was used to deliver CT26 mouse tumor cells to establish optimal delivery conditions according to the amount of virus. The transduction efficiency is maximal at 500 μL volume of lentiviral stock without change in cell shape or growth rate. CT26-4-1BBL, CT26-OX40L significantly inhibited the tumor growth compare with CT26-WT or CT26-β-gal cell line. These data showed the possibility the use of genetically modified tumor cells with costimulatory molecule as cancer immunotherapy agent.

• Journal of Oral Medicine and Pain
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• 제25권1호
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• pp.53-62
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• 2000

Bone marrow culture systems are widely used to differentiate osteoclast-like cells in vitro using several osteotropic hormones. In this study, we isolated and cultured the mouse bone marrow cells with or without some osteotropic hormones such as parathyroid hormone(PTH), prostaglandin $E_2(PGE_2)$ and $l,25(OH)_2-vitamin$ $D_3$(Vit. $D_3$). We confirmed the formation of osteoclast-like cells morphologically and functionally by the expression of tartrate-resistant acid phosphatase(TRAP) and by their capability to resorb dentin slices. We also studied the effects of transforming growth $factor-{\beta}(TGF-{\beta})$ and epidermal growth factor(EGF) on the Vit. $D_3-induced$ osteoclast-like cell formation. In control, a few multinucleated cells were formed whereas PTH and $PGE_2$ increased the number of multinucleated cells. PTH, $PGE_2$ and Vit. $D_3$ induced the formation of TRAP-positive multinucleated cells. After culture of mouse bone marrow cells on the dentin slices with or without osteotropic hormones, giant cells with diverse morphology were found on the dentin slices under the scanning electronmicroscopy. After removing the attached cells, resorption pits were identified on the dentin slices, and the shape of resorption pits was variable. EGF increased the osteoclast-like cell formation induced by Vit. $D_3$, however, $TGF-{\beta}$ showed biphasic effect, which at low concentration, increased and at high concentration, decreased the osteoclast-like cell formation induced by Vit. $D_3$.

• Applied Microscopy
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• 제33권2호
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• pp.117-130
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• 2003

본 연구는 6 MeV LINAC에서 발생한 X-선을 생쥐 생체에 조사한 후, 방사선 조사선량에 따른 난소 조직의 미세구조적 변화를 광학 및 전자현미경으로 관찰하였다. X-선을 200 cGy의 선량을 조사한 후 적출한 난소조직에서 성장난포의 과립층세포는 핵이 응축되어 나타났고, 난자를 둘러싸고 있는 투명층은 정상 대조군에서보다 경계가 불규칙하게 관찰되었다. 400 cGy로 조사된 난소조직에서 과립층세포는 대부분 응축된 핵을 가지고 있었으며, 피폭된 과립층세포의 사멸에 의한 세포질의 단백질 변성이 확인되었다. 600 cGy의 선량을 조사한 난소의 조직표본에서 성장난포는 위축되어 있었으며, 난포동에는 백혈구가 침윤되어 있었고, 난포액은 정상난포와 달리 불균질한 물질로 채워져 있었다. 투과전자현미경으로 관찰한 결과, 200 cGy의 방사선을 조사한 성장난포에서 과립층세포는 정상난포와는 달리 불규칙한 모양을 하고 있었다. 과립세포 사이의 난포동에는 많은 세포성분의 부스러기가 산재하여 있었으며, 이들 주변에 호중구와 대식세포가 관찰되어, 이 시기에 이미 방사선 피폭에 의한 세포사의 기작이 진행되고 있음이 확인되었다. X-선을 600 cGy로 조사한 난소조직의 과립층세포는 세포의 형태나 핵의 변형이 현저하여, 일부 세포는 핵의 분절화가 진행되는 등, apoptosis의 전형적인 특징이 관찰되었다. 특히 성장난포의 난포동에서는 염증반응에 관여하는 호중구가 잘 관찰되었으며, 주변에 산재된 세포 파쇄물 및 apoptotic body와 함께 대식세포의 출현도 확인되었다.

• Applied Microscopy
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• 제30권2호
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• pp.141-152
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• 2000

본 연구의 목적은 $CdCl_2$이 간 미세조직에 일으키는 독성에 대한 50의 억제효과를 연구하는데 있다. 본 실험에서는 총 40마리의 건강한 ICR계 mouse를 사용하였다. 실험군은 먼저 2개군(group A, and B)으로 구분하였다. A군에는 $CdCl_2$(40mg/kg)을 복강투여 하였다. B군에는 SQ (180 mg/kg, 2회/일)과 $CdCl_2$ (4.0 mg/kg)을 동시 복강 투여하였다. 각 군은 24, 48, 72, 96시간째에 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. A군 : 핵막은 24시간대에서 매우 불규칙하게 관찰되었고, 48시간대부터는 대체로 원형을 유지하였다. 사립체는 72시간까지 내강이 파괴된 채로 관찰되었고, 96시간대에는 일부에서만 내강 파괴가 관찰되었다. 과립형질 내세망은 내강이 전 시간대에 걸쳐 팽대된 소견을 보였고, 72시간대부터 층판구조를 형성하였다. 용해소체가 24 시간대부터 세포질에서 관찰되었고, 72시간대부터는 글리코겐이 관찰되었다. 2. B군 : 핵막은 전 시간대에 걸쳐 비교적 규칙적인 형태를 보였다. 사립체는 전반적으로 원형 ,세장형 등 정상적인 형태로 관찰되었다. 과립형질내세망은 48시간군에서 내강이 팽대되었고 층판구조가 일부 분절된 소견을 보였지만, 72시간부터는 전형적인 층판구조가 관찰되었다. 용해소체와 glycogen은 24시간대부터 관찰되었다. 이상의 결과를 종합하면 50이 mouse간세포에 미치는 카드뮴의 독성을 감소시키는 것으로 사료된다.

• Applied Microscopy
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• 제30권2호
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• pp.153-163
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• 2000

본 연구의 목적은 염화수은이 간 미세조직에 일으키는 독성에 대한 SQ의 억제효과를 연구하는데 있다. 본 실험에는 총 40마리의 건강한 ICR계 mouse를 사용하였다. 염화수은 단독투여군(A군)에는 $HgCl_2$(4.0mg/kg)만을 복강투여하였다. 그리고 SQ과 염화수은 동시투여군 (B군)에는 SQ (180 mg/kg, 2 times/day)과 $HgCl_2$ (4.0 mg/kg)를 동시 복강투여하였다. 그리고 각 군은 24, 48, 72, 96시간대에 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. (1)A군 : 핵은 24시간대에서 핵막의 응축현상이 나타났고, 48시간대에는 뚜렷한 응축현상이 관찰되었다. 그러나 96시간대에서는 핵막이 비교적 둥글게 관찰되었다. 전시간대에서 사립체는 내강이 팽대되었고, 사립체릉의 발달이 미약하였다. 또한 기질의 전자밀도가 낮게 나타났다. 72시간대에서는 내 외막의 파괴 현상이 간혹 관찰되었다. 과립형질내세망은 내강의 팽대현상과 층판구조의 붕괴가 24시간대에서 72시간대까지 관찰되었지만, 96시간대부터는 약간의 팽대현상만이 관찰되었다. (2) B군 : 핵막과 염색질은 전시간대에 걸쳐 정상적인 소견을 나타냈다. 사립체는 48시간대에 내 외막의 파괴 현상이 나타났지만, 96시간대에 대부분 정상적인 형태를 이루고 있었고 전자밀도가 약간 높게 나타나는 경향이 있었다. 과립형질내세망은 24시간대와 48시간대에 팽대현상이 나타났지만, 72시간대와 96시간대에는 전형적인 층판구조를 이루기 시작하였으며 주변에 많은 전이소낭들이 관찰되었다. 이상의 결과를 종합하여 보면 SQ이 mouse 간세포에 미치는 염화수은의 독성을 감소소키는 것으로 사료된다.