• 제목/요약/키워드: mouse peritoneal macrophage

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옥수수 추출물의 경구 투여가 사이토카인 IL-2 생성과 IFN-${\gamma}$와 IL-10 Ratio에 미치는 영향 (Effect of Corn Extracts on Mouse IL-2 Cytokine Production by Peritoneal Macrophage and the Ratio of IFN-${\gamma}$, IL-10 Cytokine)

  • 류혜숙
    • 한국식품영양학회지
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    • 제25권2호
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    • pp.362-367
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    • 2012
  • Corn has been used for a long time as a traditional remedy, as well as a food source. We previously reported that in vitro supplementation of corn water extracts enhanced the proliferation of splenocytes, compared to the control group. In this study, we examined the immunomodulative effect of a water extract of corn. Seven to eight weeks old mice(Balb/c) were fed an ad libitum chow diet, and were orally administrated a water extract of corn every other day, for four weeks, at two different concentrations(50 and 500 mg/kg B.W). Cytokine production(IL-2, IL-10 and IFN-${\gamma}$) by macrophages stimulated with LPS or not stimulated with LPS was detected by ELISA assay using the cytokine kit. In an ex vivo study, the cytokines IL-2, IL-10 and IFN-${\gamma}$ were detected at 500 mg/kg b.w. supplementation group with LPS stimulation in all cases. Also, the ratio of IFN-${\gamma}$ to IL-10 was in the range of 0~3 with mitogen stimulation, such as con A and LPS. In conclusion, this study suggests that in mice, corn extracts may enhance immune function by regulating the cytokine production(IL-2, IL-10 and IFN-${\gamma}$) of the activated macrophages.

카카오 열수 추출물 투여의 마우스 면역세포 활성효과 (Effect of Theobroma cacao L. Extracts on Mouse Spleen Immune Cells Activation)

  • 류혜숙
    • 한국식품영양학회지
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    • 제33권6호
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    • pp.732-736
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    • 2020
  • Theobroma cacao L., a fruit of cacao trees, is a perennial plant, which belongs to Sterculiaceae, and is native to the Amazon in South Africa. It also has been known for its various biologically active effects, such as anti-oxidation, anti-cancer, and anti-bacterial. The spleen cell proliferations of mice were measured at 48 hours after treatment of Theobroma cacao L. water extracts in seven concentrations(0, 5, 10, 50, 100, 250, 500 and 1,000 ㎍/mL) an ELISA assay. The production of cytokine (IL-1β, TNF-α, IFN-γ), is secreted by macrophages stimulated with LPS, was detected by ELISA assay using the cytokine kit. From the results of in vitro study, both splenocytes and cytokine production activated by peritoneal macrophages have increased when water extracts were supplemented in the range between 250 and 500 ㎍/mL concentration. Notably, splenocytes production has a signigicant proliferation at 500 ㎍/mL concentration. The result from this research suggests that supplementation with Theobroma cacao L. water extracts may enhance the immune function by stimulating the splenocyte proliferation and improving the cytokine production activating macrophage in vitro.

Hericium erinaceum 균사체와 자실체 열수 추출물의 몇몇 In-Vitro 및 In-Vivo 생물활성 (Some In-Vitro and In-Vivo Biological Activities of Hot Water Extracts from Fruit Body and Cultured Mycelium of Hericium erinaceum)

  • 정재현;이광호;이신영
    • KSBB Journal
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    • 제22권1호
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    • pp.22-29
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    • 2007
  • H. erinaceum은 현재 산업적으로 매우 주목되고 있는 기능성 소재들 중의 하나이다. 본 연구에서는 식용은 물론 각종 약리효과를 나타내는 H. erinaceum의 기능성 식품의 제품화 연구 일환으로, 지금까지 체계적으로 연구된 바 없는 H. erinaceum의 액체배양을 시도하고, 생성된 균사체의 생리기능성의 변화를 자실체의 물 추출물과 비교, 조사함으로써 H. erinaceum 액체배양 생성물의 생리기능 효과를 평가, 규명하고자 하였다. H. erinaceum의 자실체 및 균사체 물 추출물은 HeLa (human cervix epitheloid carcinoma; 인간 자궁 상피암세포), Raw264.7 (mouse monocyte macrophage; 생쥐 단핵 대식세포), Jurkat (human acute T cell leukemia, 인간 급성 T 백혈병 세포), KATO3 (human gastric carcinoma 인간 위장 암세포), EL4 (mouse T lymphoma 생쥐 T 림프종 세포), LyD9 (mouse bone marrow plurypotent stem cell; 생쥐 공수유래 간세포) 등 각종 암세포주에 대해 농도 의존적으로 증식 억제 효과를 나타내었다. 자실체 추출물은 균사체 추출물보다 대부분의 암세포 증식의 억제 효과가 컸으며, 가장 높은 암세포 증식 억제효과를 보인 자실체 열수 추출물의 효과는 Raw 264.7 및 EL4 세포주를 사용한 Taxol와의 비교실험 결과, 자실체 농도 0.01$\sim$10 mg/ml에서 자실체 사용량의 1/1000에 상당하는 양의 Taxol 효과와 비슷하였다. 자실체 및 균사체 열수 추출물들은 1 mg/ml 농도에서 복강세포의 nitric oxide 생산 유도능을 나타내었으며, lipopolysaccharides 자극으로 더욱 증가하였다. 반면, 비장세포의 증식유도능 및 interleukin-2 유도능에서는 각 시료 단독으로는 증식 유도 및 interleukin-2 유도능을 나타내지 않았으나 각각 lipopolysaccharide와 concanavalin A의 첨가 및 concanavalin A 자극으로 강한 증식유도능 및 interleukin-2 생산능을 나타내었고, 그 효과는 균사체 추출물에서 자실체 보다 더욱 높았다. 또 각 시료는 골수세포에 대해서도 약간의 증식효과를 보였으며, 복강세포의 탐식능을 나타내었다.

Effects of Acute Exercise on Nitric Oxide Generation from Mouse Macrophages

  • Shin, Jung-Hee;Kim, Jin;Kim, Hyun-Sook;Kwon, Nyun-Soo
    • Nutritional Sciences
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    • 제5권3호
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    • pp.123-128
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    • 2002
  • Physical activity is a primary cancer control strategy that has received little attention to date. However, an Increasing number of epidemiological studies have proposed that physical exercise may be beneficial by enhancing anticancer immune system responses. We investigated the effects of acute exercise on changes in nitric oxide (NO) production and inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression. The amounts of NO generated by abdominal macrophages in mice were measured after exercise. Thirty-two mice, which were challenged with thioglycollate broth to activate peritoneal macrophages, were randomly assigned to control, exercise and recovery groups. The mice exercised on a motor-driven treadmill for 3 consecutive days, either moderately (18m/min, 30 min/day, 5% grade) or severely (18-35m/min, 60 min/day, 5% grade). The mice were killed immediately after exercise or after 6 hrs of recovery. Nitric oxide was quantified by the Griess assay. The exercised mice showed higher levels of NO generation than those of the control mice, but the intensity of exercise had no significant effect on NO generation. Mice allowed six hours of recovery after exercise showed higher levels of NO generation than that of animals sacrificed immediately after exercise, but there were no significant differences in NO generation with variations in the intensity of exercise. Increased levels of iNOS were found in the exercised groups, and this was greatest in the groups allowed six hours of recovery compared to those groups sacrificed immediately after exercise. The results of this study suggest that acute exercise may enhance an immune response by inducing macrophage-derived NO generation; these results support the epidemiological findings which support the benefits of exercise in the prevention and control of cancer. Further study is needed to determine the physiological significance of these findings, which could be applied to the use of therapeutic exercises to assist in the prevention and control of cancer.

2주 동안의 톳 추출물 투여가 마우스의 비장세포와 Cytokine ($IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$)의 생성량에 미치는 영향 (Effect of Hizikia Fusiforme Water Extracts on Mouse Immune Cell Activation)

  • 류혜숙;정윤희;김현숙
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제40권7호
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    • pp.624-629
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    • 2007
  • 생체 내 (in vivo) 실험에서 톳 추출물을 2주 동안 격일로 0, 50, 500 mg/kg B.W.의 농도로 마우스에 경구투여한 후 비장세포 증식능 및 복강 대식세포에서 분비하는 cytokine ($IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha})$ 생성량을 검색한 결과 50 mg/kg B.W.과 500 mg/kg B.W.의 농도에서 Con A나 LPS로 자극 시 대조군에 비해 높은 비장세포 증식능을 보였고 특히 50 mg/kg b.w. 농도로 투여한 군에서 비장세포 증식능이 최대를 나타내는 것을 알 수 있었다. 복강 대식세포에 의한 cytokine 생성량을 측정한 결과 LPS 첨가시 $IL-1{\beta}$의 분비량은 2주 경구 투여 시에 50 mg/kg B.W.의 농도군에서 가장 높은 생성량을 보였다. 이는 LPS를 투여한 군과 투여하지 않은 군에서 모두 동일한 경향을 보였다. IL-6 분비량은 LPS 첨가시 50 mg/kg B.W.의 농도 투여군에서 가장 높은 생성을 나타냈다. $TNF-{\alpha}$의 경우는 유의적인 차이를 보이지 않았다. 이상의 결과로 톳 열수 추출물은 대식세포의 활성화에 작용하여 사이토카인 생성을 증가시키는데 영향을 미칠 수 있는 것으로 예측된다. 따라서 톳 추출물은 마우스 면역계의 조절기전에 작용하여 비장세포와 대식세포의 활성화를 유도함으로써 면역세포 활성을 직접적으로 촉진시키거나 또는 이와 관련된 다른 면역반응에 영향을 미침으로서 면역 활성에 효과적으로 작용할 가능성이 있으리라 사료된다.

미숙과와 성숙과 복분자의 섭취가 복강 Macrophages의 유전자 발현에 미치는 영향 (Effects Unripe and Ripe Rubus coreanus Miquel on Peritoneal Macrophage Gene Expression Using cDNA Microarray Analysis)

  • 이정은;조수묵;김진;김정현
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제42권10호
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    • pp.1552-1559
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    • 2013
  • 본 연구에서는 미숙과와 성숙과의 복분자 섭취에 의한 쥐복강 대식세포의 염증반응을 조사하였다. 8주간 농도별 미숙과와 성숙과 복분자 식이를 섭취시킨 후 복강대식세포를 분리한 다음, LPS로 염증반응을 유도하여 염증매개 cytokines인 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6의 분비와 PGE2의 분비량을 측정하였으며, cDNA microarray 방법으로 유전자 발현을 측정하였다. 미숙과와 성숙과 복분자 섭취는 TNF-${\alpha}$의 생성을 유의적으로 억제하였으나, IL-$1{\beta}$, IL-6는 미숙과 복분자 섭취에 의해서만 감소하였으며 $PGE_2$의 분비에는 영향을 주지 않았다. 본 연구결과, 미숙과와 성숙과 복분자 섭취에 의해 8개의 유전자 발현이 감소된 것으로 확인되었는데, 이중 세포의 면역반응과 관련된 5-LOX, iNOS, IL-11의 발현이 유의적으로 감소되었으며, 만성질환 특히 심혈관계 질환을 유발하는 인자인 tPA, thrombospondin 1, ceruloplasmin과 암의 성장 및 전이와 관련된 VEGF A의 발현을 유의적으로 억제하였다. 한편 혐기성 관련 유전자의 발현을 억제하는 HIF3A의 발현을 유의적으로 증가시켰다. 또한 미숙과 복분자의 섭취만이 CCL8, CXCL14, PLA2의 발현을 감소시키는 것으로 나타났다. 따라서 복분자의 섭취, 특히 미숙과 복분자의 섭취는 항염증 효과를 보일 뿐 아니라 만성염증성 질환 관련 인자의 발현을 유의적으로 감소시키므로 이와 관련된 기능성 식품 개발에 활용될 수 있을 것으로 사료되며, 추후 복분자내 항염증 효능을 갖는 생리활성 성분에 대한 연구가 더 진행되어야 할 것으로 판단된다.

삼묘환(三妙丸)의 LPS에 의해 활성화된 RAW 264.7 cells과 BV-2 Microglia cells로부터 생성되는 nitric oxide 및 $TNF-{\alpha}$의 생성억제효과 (Inhibitory effects of Sam-Myo-San on the LPS-induced production of nitric oxide and $TNF-{\alpha}$ in RAW 264.7 cells and BV-2 Microglia cells)

  • 이제현;정효원;박용기
    • 대한본초학회지
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    • 제21권4호
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    • pp.59-67
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    • 2006
  • Objectives : Sam-Myo-Whan(SMW) has been known traditional prescription with anti- anthritis activities. We investigated inhibitory effects of SMW on lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide(NO), $TNF-{\alpha}$ and inducible nitric oxide synthase(iNOS) production from RAW264.7 cells and BV-2 Microglia cells. Methods : SMW, which had been extracted with 70% MeOH, concentrated and freeze-dried was used for this experiment. After BV2 mouse brain macrophages and RAW264.7 mouse peritoneal macrophages were pretreated with increasing concentrations of SMW extract for 30min, and then activated with LPS. To investigate cytotoxicity of SMW extract, cell viability was measured by MTT assay. NO production was measured in each culture supernatant by Griess reaction. mRNA expression of iNOS in two type cells was investigated by RT-PCR. $TNF-{\alpha}$ production was measured in each culture supernatant by ELISA. Results : SMW extract significantly inhibited LPS-induced NO and $TNF-{\alpha}$ production in BV2 cells and RAW264.7 cells dose-dependently. SMW extract also greatly suppressed mRNA expression of iNOS in both type cells activated with LPS. Conclusion : These data suggests that SMW extract may have an anti-inflammatory effect through the inhibition of iNOS expression.

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Toxoplasma gondii: Ultrastructural localization of specific antigens and inhibition of intracellular multiplication by monoclonal antibodies

  • Lee, Boo-Young;Ahn, Myoung-Hee;Kim, Hyun-Chul;Min, Duk-Young
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제39권1호
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    • pp.67-76
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    • 2001
  • This experiment was focused on the characterization of anti- Toxoplasma monoclonal antibodies (mAbs) and the effect of mAbs on the parasite invasion of mouse peritoneal macrophages. Twenty eight mAbs including M110, M556, R7A6 and M62l were characterized by Ab titer, immunoglobulin isotyping and western blot pattern. Antibody titer (optical density) of 4 mAbs. Ml 10. M556. R7A6 and M62l. were 0.53,0.67, 0.45 and 0.39 (normal mouse serum; 0.19) with the same IgGl isotypes shown by Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Western blot analysis showed that Ml 10. M556. R7A6 and M62l reacted with the 33 kDa (p30),31 kDa (p28),43 kDa and 36 kDa protein. Immuno-gold labelling of mAbs M110, M556, R7A6 and M621 reacted with the surface membrane, dense granules and parasitophorous vacuolar membrane (PVM) , rhoptries and cytoplasm of tachyzoite, respectively. For in vitro assay, preincubation of tachyzoties with four mAbs, Ml 10, M556, R7A6 and M62l resulted in the decrease of the number of infected macrophages (p < 0.05) and the suppression of parasite multiplication at 18 h post-infection. Four monoclonal antibodies including Ml 10 (SAGI) were found to have an important role in the inhibition of macrophage invasion and T. gondii multiplication in vitro, and these mAbs may be suitable for vaccine candidates, diagnostic kit and for chemotherapy.

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Upregulation of Lipopolysaccharide-Induced Interleukin-10 by Prostaglandin $A_1$ in Mouse Peritoneal Macrophages

  • Kim, Hyo-Young;Kim, Jae-Ryong;Kim, Hee-Sun
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제18권6호
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    • pp.1170-1178
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    • 2008
  • The cyclopentenone prostaglandins (cyPGs) prostaglandin $A_1$ ($PGA_1$) and 15-deoxy-${\Delta}^{12,14}$-prostaglandin $J_2$ (15d-$PGJ_2$) have been reported to exhibit antiinflammatory activity in activated monocytes/macrophages. However, the effects of these two cyPGs on the expression of cytokine genes may differ. In this study, we investigated the mechanism of action of $PGA_1$ in lipopolysaccharide (LPS)-induced expression of inter leu kin (IL)-10 mRNA in mouse peritoneal macrophages. 15d-$PGJ_2$ inhibited expression of LPS-induced IL-10, whereas $PGA_1$ increased LPS-induced IL-10 expression. This synergistic effect of $PGA_1$ on LPS-induced IL-10 expression reached a maximum as early as 2 h after simultaneous $PGA_1$ and LPS treatment ($PGA_1$/LPS), and did not require new protein synthesis. The synergistic effect of $PGA_1$ was inhibited by GW9662, a specific peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}(PPAR{\gamma})$ antagonist, and Bay-11-7082, a NF-${\kappa}B$ inhibitor. The extracellular signal-regulated kinases (ERK) inhibitor PD98059 increased the expression of $PGA_1$/LPS-induced IL-10 mRNA, rather than inhibiting the IL-10 expression. Moreover, $PGA_1$ inhibited LPS-induced ERK phosphorylation. The synergistic effect of $PGA_1$ on LPS-induced IL-10 mRNA and protein production was inhibited by p38 inhibitor PD169316, and $PGA_1$ increased LPS-induced p38 phosphorylation. In the case of stress-activated protein kinase/c-Jun $NH_2$-terminal kinase (SAPK/JNK), the SAPK/JNK inhibitor SP600125 did not inhibit IL-10 mRNA synthesis but inhibited the production of IL-10 protein remarkably. These results suggest that the synergistic effect of $PGA_1$ on LPS-induced IL-10 expression is NF-${\kappa}B$-dependent and mediated by mitogen-activated protein (MAP) kinases, p38, and SAPK/JNK signaling pathways, and also associated with the $PPAR{\gamma}$ pathway. Our data may provide more insight into the diverse mechanisms of $PGA_1$ effects on the expression of cytokine genes.

천년초에서 분리한 점질다당의 면역자극 활성 (Immune System-Stimulating Activities of Mucilage Polysaccharides Isolated from Opuntia humifusa)

  • 서이슬;신광순
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제41권1호
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    • pp.95-102
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    • 2012
  • 천년초(Opuntia humifusa)에 존재하는 점질다당의 새로운 이용방안을 모색하기 위해 천년초로부터 다당을 분리하여 면역자극활성을 측정하였다. 천년초의 주요 다당 CNC-E는 상업용 효소처리, 물 추출 및 ethanol 침전을 거쳐 조제하고 이들의 특성을 검토하였다. CNC-E는 분자량 약 700 kDa의 다당체로, 구성당 조성을 확인한 결과, arabinose, galactose 및 xylose를 높은 비율로 함유하고 있었으며 rhamnose와 fucose를 미량 함유하고 있었다. 한편 CNC-E는 비장세포 유래 림프구에 대해서는 비교적 높은 증식활성을 농도 의존적으로 나타냈다. CNC-E로 자극한 macrophage는 IL-6, IL-12, IL-10 및 TNF-${\alpha}$와 같은 cytokine의 생산을 농도 의존적으로 증진시켰으며 CNC-E를 mouse에 정맥 주사한 후 얻어진 NK세포는 Yac-1 종양 세포주에 대한 높은 치사작용을 보였다. 특히 CNC-E를 mouse 당 $100{\mu}g$ 처리한 후 얻어진 NK세포는 미처리 대조군에 비해 3배 높은 치사활성을 나타냈다. CNC-E는 인체 초기 면역반응에 있어 중요한 역할을 담당하는 보체계에 대하여 농도 의존적인 활성을 나타냈으며, anti-human C3를 이용한 면역전기영동실험과 $Ca^{2+}$이온이 제거된 상태에서의 항보체 활성 실험을 통해 천년초 다당 CNC-E는 고전경로와 부경로를 모두 경유하여 활성을 나타내고 있음을 확인하였다. 이상의 결과로부터 한국산 선인장 천년초에는 인체에 유익한 면역 활성 다당체를 다량 함유함을 알 수 있었다.