Pseudixus japonicus agglutinin (PJA) was isolated. And its characteristics were compared with those of concanavalin A (Con A). PJA is a glycopritein composed of 49.3% carbohydrate and 50.7% protein which had relatively high percentages of glutamic acid, aspartic acid and phenylalanine residues. The hemagglutinating activity of PJA was approximately one-eighth of that of Con A when tested with mouse crythrocytes. PJA failed to simulate the proliferation or transformation of human and mouse lymphocytes in contratst to Con A. PJA and Con A showed cytotoxicities against SNU-1 (human stomach cancer cells), SNU-CI (human colon cancer cells) and mouse Sarcoma 180 cells when tested by 3-(4, 5-dimethyl thiazol-2-yl)2. 5-diphenyl tetrazolium bromide (MIT) colorimetric assay. The antitumor activity of the lectin in vivo was also tested in Sarcoma 180 bearing mice. There was no significant difference in prologation of lifc span of the mice after the treatment with PJA and Con A for 10 consecutive days.
To evaluate the effect of Jingansikpung-tang(JST) water extract on cultured mouse spinal sensory neuron which was inhibited by glucose oxidase(GO)-induced cytotoxicity, MTT and LDH activity assay were carried out after the cultured mouse spinal sensory neuron were pre-incubated with various concentrations of JST extract for 3 hours prior to exposure of GO. The results obtained were as follows: GO, a oxygen radical, decreased the survival rate of the cultured mouse spinal sensory neuron cells on MTT assay. JST water extract have efficacy of decreasing LDH activity increasing by GO in cultured mouse spinal sensory neuron. From above the results, it is concluded that JST water extract has marked efficacy as a treatment for the damages caused in the GO-mediated oxidative process.
녹차분말을 포함하는 차가버섯 조성물의 수용성 추출물에 의한 인체 위암 세포 AGS 및 대장암 세포 HCT-15, 그리고 마우스 정상세포 NIH3T3 fibroblast의 세포생육에 미치는 효과를 세포 수 측정방법과 MTT assay 방법으로 측정하였다. 차가버섯 조성물의 수용성 추출물은 인체 대장암 세포주 HCT-15와 위암 세포주 AGS의 생육을 억제하였다. 그러나 동일한 실험조건 하에서 마우스 정상 세포주 NIH3T3은 80% 이상의 생존율을 나타내었다. 본 연구의 결과로 차가버섯 조성물의 수용성 추출물은 정상세포에는 독성을 나타내지 않으면서 위암 및 대장암 세포에는 높은 생육억제 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
In order to clarify the neuroprotective effect of Cornu Saigae Tataricae(CST) water extract on cultured mouse spinal motor neuron damaged by hydrogen peroxide (H₂O₂), MTT [3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)- 2,5-diphenyltetrazolium bromide] assay, LDH (Lactate Dehydrogenase) activity assay and SRB (Sulforhodamine B) assay were carried out after the cultured mouse spinal motor neuron were preincubated with various concentrations of CST water extract for 3 hours prior to exposure of hydrogen peroxide Cell viability of cultured mouse spinal motor neurons exposed to various concentrations of hydrogen peroxide for 6 hours was decreased in a dose-dependent manner. MTT50 values were 40 uM hydrogen peroxide. Cultured mouse spinal motor neurons in the medium containing various concentration of hydrogen peroxide for 6 hours showed increasing of LDH activity and decreasing of total protein synthesis. We know that hydrogen peroxide was toxic on cultured spinal motor neurons. Pretreatment of CST water extract for 3 hours following hydrogen peroxide prevented the hydrogen peroxide-induced neurotoxicity such as increasing of LDH activity and decreasing of total protein synthesis. These results suggest that hydrogen peroxide shows toxic effect on cultured spinal motor neurons and CST water extract is highly effective in protecting the neurotoxicity induced by hydrogen peroxide.
척수감각신경절세포에 대한 산소자유기의 신경독성효과에 대한 기전을 규명하기 위하여 여러 농도의 Glucose Oxidase(GO)를 배양 척수 감각신경절세포에 처리한 후 GO의 독성효과를 분석하였으며 또한 GO에 의하여 유발된 신경독성에 대한 음양곽(Epimedium Koreanum Nakai)의 방어효과를 MTT assay법에 의하여 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다. GO는 신경세포에 처리한 농도와 시간에 비례하여 세포의 생존율을 유의하게 감소시켰으며, 또한 음양곽이 GO의 독성효과를 효과적으로 방어하였다. 이상의 결과로부터 산소자유기인 GO는 생쥐의 배양 척수감각신경절세포에 독성을 나타냈으며 음양곽과 같은 한약추출물이 GO의 독성을 방어하는데 효과적인 것으로 나타났다.
Objectives : This study was carried out to examine toxic effect of Sintongchukeo-tang on cultured mouse spinal sensory neurons inhibited by neurotoxicity induced by hydrogen peroxide. Methods : MTT assay, NR assay, LDH and neurofilament assay were performed after spinal sensory neurons were preincubater with various concentrations of Sintongchukeo-tang water extract before treatment of cells with hydrogen peroxide. Results : Hydrogen peroxide induced ceil degeneration such as the decrease of cell viability was measured by MTT and NR assay in the cultured mouse spinal sensory neurons. Sintongchukeo-tang water extract was effective in the decrease of LDH activities of neurons produced by hydrogen peroxide. Sintongchukeo-tang water extract was effective in the increase of amount of neurofilaments damaged by hydrogen peroxide. Conclusions : From the above results, it is suggested that hydrogen peroxide induces the inhibition of cell viability in cultured mouse spinal sensory neurons and Sintongchukeo-tang water extract was effective in cultured neurons damaged by hydrogen peroxide.
Kim, Yoon-seob;Park, Ji-sung;Kim, Minji;Hwang, Bang Yeon;Lee, Chong-kil;Song, Sukgil
Natural Product Sciences
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제23권1호
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pp.35-39
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2017
D-chiro-inositol (DCI) is a secondary messenger in insulin signal transduction. It is produced in vivo from myo-inositol via action of epimerase. In this study, we evaluated antitumor activity of DCI against human breast cancer both in vitro and in vivo. In order to determine the inhibitory effects of DCI on growth of human breast cancer cells (MDA-MB-231), two different assessment methods were implemented: MTT assay and mouse xenograft assay. MTT assay demonstrated downturn in cell proliferation by DCI treatment (1, 5, 10, 20 and 40 mM) groups by 18.3% (p < 0.05), 17.2% (p < 0.05), 17.5% (p < 0.05), 18.4% (p < 0.05), and 24.9% (p < 0.01), respectively. Also, inhibition of tumor growth was investigated in mouse xenograft model. DCI was administered orally at the dose of 500 mg/kg and 1000 mg/kg body weight to treat nude mouse for 45 consecutive days. On the 45th day, tumor growth of DCI (500 mg/kg and 1000 mg/kg) groups was suppressed by 22.1% and 67.6% as mean tumor volumes were $9313.8{\pm}474.1mm^3$ and $3879.1{\pm}1044.1mm^3$, respectively. Furthermore, breast cancer stem cell (CSC) phenotype ($CD44^+/C24^-$) was measured using flow cytometry. On the 46th day, CSC ratios of DCI (500 mg/kg) and co-treatment with doxorubicin (4 mg/kg) and DCI (500 mg/kg) group decreased by 24.7% and 53.9% (p < 0.01), respectively. Finally, from tumor recurrence assay, delay of 5 days in the co-treatment group compared to doxorubicin (4 mg/kg) alone group was observed. Based on these findings, we propose that DCI holds potential as an anti-cancer drug for treatment of breast cancer.
Kimchi is a major Korean traditional fermented food, as a supplying source of vitamin and minerals which is prepared with various vegetables and condiments such as red pepper, garlic and salted fish etc. There are many types of Kimchi depending on the ingredients and preparation methods used. To investigate the clastogenicity and anticlastogenicity of Baechu (Chinese cabbage) Kimchi and Buchu (leek, Allium odorum) Kimchi in mouse, it was performed acridine orange supravital staining of micronucleus (AOSS-MN) assay using mouse peripheral reticulocytes. Baechu Kimchi and Buchu Kimchi were cultivated by organic agricultural technique, and Kimchi samples were prepared by methanol extraction and lyophilization. First of all, it was studied the clastogenicity of two Kimchi samples themselves (250-1,000 mg/kg) after oral adminstration in mouse. And also to study the anticlastogenic effect of oral administration of Kimchi samples, mitomycin C (MMC, 1 mg/kg, i.p.) was used as micronucleus inducing agent in this study. Dosing scheme was performed as simultaneous (co-treatment), 3 hr before (pre-treatment) and 3 hr after (post-treatment) with MMC treatment. Two Kimchi samples in the range of 250-1,000 mg/kg did not reveal any clastogenic effect in AOSS-MN assay in mouse. They also revealed anticlastogenic effects in post-treatment of Baechu Kimchi (1,000 mg/kg), and in pre-treatment of Buchu Kimchi (500 and 1,000 mg/kg) with statistical significance. The anticlastogenic effect revealed 1 and 6 hr after treatment of Baechu Kimchi, and Buchu Kimchi with 3 and 6 hr pretreatment. Consequently, it is suggested that antimutagenic and anticlastogenic mechanisms of Baechu and Buchu Kimchi in vivo attributed to sipindle formation and kinetic behavior of mutagens such as absorption and metabolism etc.
1. 연구목적 본 실험은 태음조위탕이 대뇌신경세포의 산화적 손상에 대한 효능을 밝히기 위한 것이다. 2. 연구방법 신생생쥐에서 순수 분리한 대뇌신경세포(大腦神經細胞)를 배양(培養)하여 glucose oxidase (GO)에 노출시킨 후 이의 독성효과(毒性效果)를 측정(測定)하였으며, 또한 GO에 의하여 유도(誘導)된 독성(毒性)에 대한 태음조위탕(太陰調胃湯)의 효과(效果)를 조사(調査)하였다. 3. 결과 및 결론 산소자유기(酸素自由基)인 GO는 MTTassay에 의한 세포생존율(細胞生存率)의 유의한 감소(減少)를 보였다. 산소자유기(酸素自由基)인 GO는 NR assay에 의한 세포생존율(細胞生存率)의 유의한 감소(減少)를 보였다. GO의 산화적(酸化的) 손상(損傷)에 의한 신경독성(神經毒性)에 대하여 태음조위탕(太陰調胃湯) 투여로 총단백질양의 유의한 증가(增加)를 보였다. GO의 산화적(酸化的) 손상(損傷)에 의한 신경독성(神經毒性)에 대하여 태음조위탕(太陰調胃湯) 투여로 lipid peroxidation의 유의한 감소(減少)를 보였다. 이상(以上)의 실험결과(實驗結果)는 태음조위탕(太陰調胃湯)이 대뇌신경세포(大腦神經細胞)의 산화적손상(酸化的損傷)에 대하여 유의성(有意性) 있는 방어적(防禦的) 작용(作用)을 나타낸 것으로, 이와 관련된 노화억제(老化抑制)나 뇌허혈(腦虛血), 다발성경화증(多發性硬化症), 치매 등 뇌기능손상(腦機能損傷)이나 저하(低下)로 유발되는 질환(疾患)에 대한 임상응용(臨床應用)에 대해서도 지속적(持續的)인 연구(硏究)가 필요(必要)하다고 사료(思料)된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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