• 한국식품저장유통학회지
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• 제30권2호
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• pp.358-368
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• 2023

본 연구에서는 화살나무 날개를 이용하여 물, 에탄올 및 메탄올을 이용하여 얻은 추출물을 이용하여 항산화 활성, 항당뇨 활성, 총폴리페놀 및 플라보노이드 함량, 암세포 성장 억제능을 평가하였다. 화살나무 날개 추출물은 DPPH radical 소거능 결과에서는 에탄올과 메탄올 추출물에서 positive control과 유사한 radical 소거능을 나타내었으며 ABTS^·+ radical 소거능에서는 모든 군의 1,000 ㎍/mL의 농도에서 80% 이상의 소거능을 보여주었다. 또한, 환원력과 hydrogen peroxide 소거능 및 α-glucosidase 저해활성에서 에탄올과 메탄올 추출물은 positive control과 비슷하거나 높은 활성을 나타내었다. 화살나무 날개 추출물 내 총폴리페놀 및 플라보노이드 함량은 에탄올 추출물에서 867.8 mg% 및 551.7 mg%로 물 및 메탄올 추출물과 비교하였을 때 보다 높은 총폴리페놀 및 플라보노이드 함량이 확인되었다. 화살나무 날개 추출물의 암세포 증식 억제 활성은 흑색종 피부암(B16)에서는 큰 효과를 확인할 수 없었지만 유방암(MDA-MB-231), 대장암(HT-29) 및 전립선암(LNCaP)에서는 유의적인 세포 생존 억제능을 확인하였고 특히 LNCaP에 에탄올 추출물을 처리하였을 때 19.1%의 세포 생존율을 보이며 가장 우수한 세포 성장 억제 활성을 확인하였다. 또한, 전립선 정상 세포인 RWPE-1을 화살나무 날개 추출물로 처리하였을 때 세포 생존율에 큰 영향을 받지 않았기 때문에 암세포 특이적인 성장 억제 활성을 확인할 수 있었다. 이러한 결과를 통해 풍부한 폴리페놀 및 플라보노이드 함량을 가진 화살나무 추출물은 항산화, α- glucosidase 억제, 항암 효과를 나타내어 뛰어난 생리활성효능을 가지고 있고, 이는 효과적인 천연물 유래 기능성 원료 및 식품 소재 발굴을 위한 기초자료로 이용할 수 있을것으로 사료된다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제41권2호
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• pp.141-146
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• 2008

생체 내 (ex vivo) 실험에서 혼합 (고들빼기, 돌미나리, 메밀, 톳, 생강)시료의 물 추출물을 4주간 격일로 마우스 체중 kg 당 0, 50, 500 mg/kg B.W.의 농도로 마우스에 경구 투여한 후 비장세포 증식능, LPS에 의해 활성화된 복강 대식세포가 분비하는 염증성 사이토카인 ($IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$)의 생성량을 측정하였다. 그 결과 혼합시료의 물추출물은 ConA나 LPS로 자극하지 않은 경우 50 mg./kg B.W. 농도에서 대조군에 비해 유의적으로 높은 비장 증식능을 보였다. LPS에 의해 활성화된 복강 대식세포의 사이토카인 분비량을 측정한 결과에서도 $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$의 분비량은 마우스 체중 kg 당 50 mg/kg B.W. 농도의 투여군에서 높은 생성량을 보여주었으나, 500 mg/kg B.W.의 농도 투여군에서는 IL-6 분비량은 대조군에 비해 높은 반면 $TNF-{\alpha}$의 분비량은 큰 차이를 보이지 않았다. 이상의 결과에 따라 비장세포 증식능과 사이토카인 분비능을 검색한 결과 고들빼기, 도미나리, 메밀, 톳, 생강을 혼합한 혼합시료의 추출물 50 mg/kg B.W. 농도 투여가 면역 세포와 면역 기관의 주요기능을 증진시키리 가능성이 있을 것으로 사료된다. 이러한 연구결과를 토대로 앞으로 혼합식을 통한 기능성 식품 개발에 기초 연구 자료가 될 것으로 기대된다.

• 생명과학회지
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• 제23권4호
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• pp.501-509
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• 2013

포름알데히드는 주로 산업용으로 사용되는 독성이 강한 물질로서 생체에 노출 시 염증, 산화적 스트레스, 알레르기 반응, 나아가서 암을 유발하게 된다. 불가사리에서 추출되는 saponin은 sulphated sterol glycosides 등으로서 인삼 saponin (ginsenoside)들과 화학적 구조가 비슷하여 항균 및 세포독성을 비롯한 미생물을 괴사시키는 기능을 가지고 있음이 보고되었다. 또한 손상된 불가사리의 조직에는 염증성 사이토카인이 발현되는데 TGF-${\beta}$의 증가로 손상 받은 부위를 빠르게 치료, 재생하게 된다. 본 실험은 조직손상 후 8일 된 불가사리 추출물과 포름알데히드를 IMR-90에 처리했을 때와 포름알데히드에 노출시킨 ICR 마우스에 불가사리 추출물을 흡입시켰을 때 염증성 폐 손상의 방어 및 치료에 미치는 효과를 알아보았다. 포름알데히드에 노출된 IMR-90에 조직손상 후 8일이 경과한 불가사리 추출물을 처리한 결과, 세포의 유의한 증식을 보였으며 염증 조절에 영향을 주는 TNF-${\alpha}$, NF-${\kappa}B$의 발현억제 및 $I{\kappa}-B{\alpha}$의 합성을 촉진시켰다. 포름알데히드에 노출된 ICR 마우스에 조직손상 후 8일이 경과한 불가사리 추출물을 처리한 군에서 체중의 증가, 항산화 효소의 증가, 지질과산화 작용의 감소, surfactant protein A의 증가, TNF-${\alpha}$ 및 NF-${\kappa}B$의 발현억제, $I{\kappa}-B{\alpha}$ 발현의 증가와 조직재생에 우수한 효과를 보였다. 이러한 결과는 포름알데히드로 인한 세포 및 폐 손상을 불가사리 추출물의 항염증 작용을 통하여 억제하거나 완화시킴을 확인할 수 있다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제28권6호
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• pp.1022-1029
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• 2018

Tuberculosis (TB) remains a serious health issue around the word. Adenovirus (Ad)-based vaccine and modified vaccinia virus Ankara (MVA)-based vaccine have emerged as two of the most promising immunization candidates over the past few years. However, the performance of the homologous and heterologous prime-boost immunization regimens of these two viral vector-based vaccines remains unclear. In the present study, we constructed recombinant Ad and MVA expressing an Ag85B-TB10.4 fusion protein (AdH4 and MVAH4) and evaluated the impact of their different immunization regimens on the humoral and cellular immune responses. We found that the viral vector-based vaccines could generate significantly higher levels of antigen-specific antibodies, $IFN-{\gamma}$-producing splenocytes, $CD69^+CD8^+$ T cells, and $IFN-{\gamma}$ secretion when compared with bacillus Calmette-$Gu{\acute{e}}rin$ (BCG) in a mouse model. AdH4-containing immunization regimens (AdH4-AdH4, AdH4-MVAH4, and MVAH4-AdH4) induced significantly stronger antibody responses, much more $IFN-{\gamma}$-producing splenocytes and $CD69^+CD8^+$ T cells, and higher levels of $IFN-{\gamma}$ secretion when compared with the MVAH4-MVAH4 immunization regimen. The number of $IFN-{\gamma}$-producing splenocytes sensitive to $CD8^+$ T-cell restricted peptides of Ag85B (9-1p and 9-2p) and Th1-related cytokines ($IFN-{\gamma}$ and $TNF-{\alpha}$) in the AdH4-MVAH4 heterologous prime-boost regimen immunization group was significantly higher than that in the other viral vector-based vaccine- and BCG-immunized groups, respectively. These results indicate that an immunization regimen involving AdH4 may have a higher capacity to induce humoral and cellular immune responses against TB in mice than that by regimens containing BCG or MVAH4 alone, and the AdH4-MVAH4 prime-boost regimen may generate an ideal protective effect.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제61권2호
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• pp.205-211
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• 2018

리바우디오사이드 A는 Stevia rebaudiana Bertoni에서 분리된 천연감미료로 널리 알려진 스테비올배당체 중 하나이다. 최근 연구에서 LPS 자극에 의해 활성화된 RAW264.7 마우스 대식 세포에서 리바우디오사이드 A가 인터루킨-$1{\alpha}/1{\beta}$ 같은 염증성 사이토카인 분비를 억제하는 기능이 확인되었다. 그러나 LPS처리 시 리바우디오사이드 A의 항염 활성에 대한염증 억제기작은 정확히 제시하지 못하였다. 따라서 본 연구에서는 리바우디오사이드 A의 LPS 신호전달 메카니즘에서의 항염증 효능을 단백질 수준에서 규명하고자 하였다. NO 생성에 관여하는 iNOS 단백질 발현양을 분석한 결과 리바우디오사이드 A의 $250{\mu}M$ 처리군에서 농도 의존적으로 단백질 발현이 감소하는 것을 확인하였다. 또한 염증 신호에 의한 대표적 핵 전사 인자인 $NF{\kappa}B$의 mRNA 발현량 분석 결과에서도 LPS 처리군에 비해 그 발현양이 감소하였다. 또한 세포질에 존재하는 $NF-{\kappa}B$와 $I-{\kappa}B$ 복합체는 LPS신호에 의한 $I-{\kappa}B$의 인산화 및 ubiquitination로 인해 $NF-{\kappa}B$가 이탈되기 때문에, 리바우디오사이드 A에 의한 $pNF-{\kappa}B$, $pI-{\kappa}B$의 단백질 발현을 비교 분석한 결과 $NF-{\kappa}B$ 단백질의 인산화가 농도 의존적으로 감소하였고, $I-{\kappa}B$의 인산화 또한 저해되는 것을 확인 하였다. 최종적으로 리바우디오사이드 A는 LPS처리 조건에서 MAPK중 특이적으로 extracellular signal-regulated kinase (ERK1/2)의 인산화를 농도 의존 방식으로 감소시킴으로써 $NF-{\kappa}B$ 조절 기작에 관여함을 알 수 있었다. 따라서 본 연구 결과들을 통해 우리는 리바우디오사이드 A가 RAW264.7 세포에서 LPS에 의해 활성화 되는 MAPK 및 $NF{\kappa}B$의 발현 억제를 통해 염증이 억제될 수 있음을 확인하였다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제25권3호
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• pp.269-277
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• 2010

본 연구에서는 azoxymethane (AOM)과 dextran sodium sulfate (DSS)로 유도된 대장 발암과정에 대한 셀레늄의 방어 효과를 조사하였다. 셀레늄 결핍(0.02 ppm Se), 정상(0.1 ppm Se), 과다(0.5 ppm Se)사료를 12주간 식이로 급여하여 혈액검사와 대장암 발생의 초기단계인 aberrant crypt foci (ACF)수를 측정했으며, 암 발생율을 조사하였다. ICP-AES를 사용하여 간의 셀레늄 농도를 측정하였으며, 또한 셀레늄포함 항산화효소인 glutathione peroxidase (GPx) 활성을 알아보았다. 또한 TUNEL assay와 PCNA, $\beta$-catenin에 대한 면역조직 염색을 수행하였다. ACF 수 및 종양 발생률에 있어서, 셀레늄과다사료를 급여한 군이 정상셀레늄사료를 급여한 군보다 낮았으며, 셀레늄결핍사료를 급여한 군은 오히려 ACF 수 및 종양 발생률이 높았다. GPx 활성은 셀레늄의 섭취가 과다한 군에서 높게 나타났으며, 이 때, TUNEL에서 apoptotic positive cell이 증가하는 것을 확인했다. 또한 셀레늄의 섭취가 과다한 군에서 PCNA와 $\beta$-catenin의 발현이 감소됨을 볼 수 있었다. 본 마우스 모델실험에서 셀레늄은 여러 기전에 의해 대장암 발생을 억제할 수 있을 것으로 사료된다.

• Journal of Acupuncture Research
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• 제24권3호
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• pp.145-161
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• 2007

Objectives : The purpose of this study is to investigate the effect of electroacupuncture at Joksanmi($ST_{36}$) on Rat's aging by experimental methods. Methods : The author performed several experimental procedures to observe the effects of the EC-HAS at the arthritis. First, I measured the cell survival rate of the mice lung fibroblasts. Second, the incidence rate of arthritis and arthritis index of CIA were analyzed. Third, the levels of IL-6, $INF-{\gamma}$ , $INF-{\alpha}$ , $IL-1{\beta}$, IgG, IgM and anti-collagen II were measured in serum and the level of $INF-{\gamma}$, $INF-{\gamma}$/IL-4 ratio in the CIA mouse spleen cell culture. Fourth, histological analysis of the mice joint was performed. Fifth, the expression ratio of $CD3e^+$ cells to $CD19^+$ cells, $CD4^+$ cells to $CD8^+$ cells, $CD11a^+CD19^+$ cells, $CD4^+CD25^+$ cells, $CD3^+CD69^+$ cells, and $CD11b^+Gr-1^+$ cells were checked. Results: 1. The hematocrit was meaningfully (p<0.01, p<0.05) decreased in $ST_{36}$ group in comparison with the control and sham group. 2. The glucose, ALP were meaningfully (p<0.05, p<0.05) decreased in $ST_{36}$ group in comparison with the control group. 3. In the activation of hepatic antioxidase, the catalase was meaningfully (p<0.01) increased in $ST_{36}$ group in comparison with the control group. 4. In the liver, the NO formation was meaningfully (p<0.001) decreased in $ST_{36}$ group in comparison with the nomal, control and sham group. 5. In the activation of splenetic antioxidase, the GSH was meaningfully (p<0.01) increased in $ST_{36}$ group in comparison with the sham group, and the catalase was meaningfully (p<0.001) increased in $ST_{36}$ group in comparison with the control group. 6. In the spleen, the MDA formation was meaningfully (p<0.01, p<0.05) decreased in $ST_{36}$ group in comparison with the control and sham group. 7. In the spleen cell culture, the levels of IL-6 was meaningfully (p<0.05) decreased in comparison with the sham group, $INF-{\gamma}$( was meaningfully (p<0.05) increased in comparison with the control group. Conclusions: According to the results, it is considered that electroacupuncture at Joksamni($ST_{36}$) is effective in increasing the activities of antioxidative enzyme and inhibiting lipid peroxides, and has an immunomodulatory reaction. In conclusion, it han an significant anti-aging effect and need more experimental study.

• 한국수산과학회지
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• 제42권5호
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• pp.434-441
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• 2009

This study was conducted to compare the biological activities of 7 melania snails from the family Pleuroceridae (Semisulcospira coreana, Koreanomelania nodifila, Semisulcospira forticosta, Koreoleptoxis globus ovalis, Semisulcospira libertina, Semisulcospira tegulata and Semisulcospira gottschei) in Korea. Among the 7 species, S. coreana, Korean. nodifila, S. forticosta and S. gottschei showed over 80% cytotoxicities on three cancer cell lines (SNU-1, A549 and Hep 3B) compared to the non-treatment, whereas S. libertina and S. tegulata showed almost no growth inhibition activities on the same cancer cell lines. In relation to ACE inhibition activity, only S. coreana, Korean. nodifila, and S. forticosta showed over 60% ACE inhibition activities, whereas other melania snails exhibited inhibition activities of lower than 25%. DPPH radical scavenging activities were also determined, and used to categories melania snails into three groups based on Duncan's multiple range test at P<0.05. The amount of TNF-${\alpha}$ produced by in vitro mouse peritoneal macrophage was determined according to bioactivity on L-929 cells. Three melania snails, S. coreana, Korean. nodifila and S. gottschei, exhibited 95.2%, 89.7% and 93.7% cell death(%) on L-929 cells, respectively. Glucose-6-phosphate dehydrogenase inhibitory activity was also obtained in the extract of S. coreana (31.9%) and Korean. nodifila (28.1%), showing that these extracts can be used as supplemental dietary health foods. In conclusion, we believe that the extracts of melania snails should be given due consideration in functional health food development.

• IMMUNE NETWORK
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• 제10권6호
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• pp.239-246
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• 2010

Background: Monoclonal antibodies (mAbs) recognizing Class III epitope of CD34 are essential for flow cytometric diagnosis of leukemia. Methods: 27H2 mAb was developed from a mouse alternatively immunized with human acute leukemia cell lines, KG1 and Molm-1. Using flow cytometric analysis of various leukemic cell lines and peripheral blood, immunohistochemical study of frozen tonsil, we characterized 27H2 mAb. Antigen immunoprecipitated with 27H2 mAb immunobloted with anti-CD34 mAb. A case of bone marrow sample of acute lymphoblastic leukemia (ALL) patient was obtained at CBNU Hospital. For epitope identification enzyme treatment with neuraminidase and O-sialoglycoprotein endopeptidase (OSGE) and blocking assay with known classIII mAb (HPCA-2) were done. Results: Only KG1 and Molm-1 revealed positive immunoreactivity. Immunohistochemical staining disclosed strong membranous immunoreactivity on high endothelial venules. Antigen immunoprecipitated by 27H2 mAb showed approximately 100 kDa sized band immunoblotted with anti-CD34 under non-reducing conditions. Epitope recognized by 27H2 mAb disclosed resistancy to both neuraminidase and OSGE treatment and completely blocked with known class III mAb preincubation. CD34 positive leukemic cells in BM of pre B cell ALL patient detected by FITC-conjugated 27H2 and HPCA-2 were identified with similar sensitivity. Conclusion: A novel murine mAb recognizing class III epitope of human CD34 with high affinity, which is useful for flow cytometric diagnosis of leukemia, was developed.

• 대한한의학방제학회지
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• 제24권3호
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• pp.163-174
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• 2016

Objectives : Rheum undulatum Linne and Glycyrriza uralensis Fischer are widely used herbal medicine. In this study, anti-oxidant and liver protective effects of R. undunlatum extract (RUE) and G. uralensis extract (GUE) were investigated in HepG2 cells, respectively. Oxidative stress and liver fibrosis were induced by arachidonic acid (AA) and iron, and CCl₄.Methods : MTT assay was assessed for cell viability, and immunoblotting analysis was performed to detect expression of apoptosis related proteins. In addition, reactive oxygen species (ROS) and mitochondrial dysfunction were measured. In vivo, BALB/c mouse were orally administrated with the aqueous extract of 10 mg/kg RUE and 100 mg/kg GUE for 3 days and then, injected with CCl₄ 0.5 ml/kg body weight to induce acute liver damage. Serum ALT level was measured, and histological change was observed in Harris's hematoxylin and eosin stainResults : RUE and GUE pre-treatment increased relative cell viability in concentration dependent manner and altered the expression levels of apoptosis-related proteins such as procaspase 3, PARP and Bcl-xL. RUE and GUE also inhibited the mitochondrial dysfunction and excessive reactive oxygen species (ROS) production induced by AA and iron. In addition, RUE and GUE activated liver kinase B1 (LKB1), by increasing phosphorylation. Moreover, RUE and GUE treatment decreased liver injuries induced by CCl₄, as evidenced by decreases in histological liver damage as well as serum alanine amino transferase (ALT) level.Conclusions : These data suggest that RUE and GUE has anti-oxidant and liver protective effects against AA and iron-induced oxidative stress and CCl₄-induced liver injury.