Two innovative methods to prepare target-sensitive immunoliposomes containing doxorubicin by coupling monoclonal antibodies (mAb DH2, SH1) specific to cancer cell surface antigens ($G_{M3}$, $Le^X$) have been developed and are described here. Firstly, liposomes containing N-glutaryl phosphatidylethanolamine (NGPE) were prepared, followed by the encapsulation of doxorubicin, DH2 or SH1 antibodies were conjugated to NGPE in the liposomes (direct coupling). Secondly, liposomes were prepared with NGPE/mAb conjugates by the detergent dialysis method (conjugate insertion), and then doxorubicin was encapsulated by proton gradient. The immunoliposomes prepared by both methods were able to specifically bind to the surface of the tumor cells - B16BL6 mouse melanoma cells. The efficiencies of doxorubicin-entrapping into liposomes prepared by direct coupling and conjugate insertion was about 98% and 25%, respectively. These types of liposomal formulation are sensitive to target cells, which can be useful for various clinical applications.
Bioassay-directed fractionations of the seed extracts of Trichosanthes kirilowii, have resulted in the isolation of two new compounds, 2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-1-propanol (2) and isoetin 5'-methyl ether (5,7,2',4'-tetrahydroxy-5'-methoxyflavone) (3), together with two known compounds, 7-hydroxychromone (1) and 5,7,4'-trihydroxy-3',5'-dimethoxyflavone (tricin, 4). Their structures were characterized by spectroscopic analysis such as 2D-NMR, HRTOFMS, and UV. Compound 3 showed cytotoxicity against human lung cancer cell line A549, human skin melanoma SK-Mel-2, and mouse melanoma B16F1, with IC50 of 0.92, 8.0, and 7.23 μg/mL, respectively.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1996.04a
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pp.176-176
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1996
축산식품중에 잔류하고 있는 sulfamethazine을 검출하기 위하여 sulfamethazine에 대한 단클론항체를 생산하고 이를 이용하여 효소면역측정법을 개발하였다. 면역원은 sulfamethazine에 KLH를 그리고 흡착항원은 BSA를 glutaraldehyde법으로 결합시켰다. 면역원으로 Balb/c mouse를 면역시킨 다음 비장 형질세포률 얻어 myeloma cell과 융합하여 융합잡종세포를 만들었다. Sulfamethazine에 대한 항체를 분비하는 융합잡종세포를 단계회석법과 ELISA를 이용하여 cloning하여 D2, A9, B8, Bl 클론을 얻었다. 이들 클론에서 얻어진 단클론항체를 사용하여 indirect competitive ELISA를 실시하여 표준곡선을 작성하여 본 결과 농도의존성 곡선을 얻을 수 있었다. 4클론중에서 A9 클론을 사용하여 다른 유사한 sulfonamide듣과 p-aminobenzoic acid와 교차반응을 조사한 결과 sulfamerazine에 12.5%의 교차반응을 보였으나 다른 설파제에 대해서는 교차 반응을 보이지 않았다.
Twenty two polyphenols containing ten gallotannins, seven ellagitannins, two phenylpropanoids and three stilbenes isolated from the higher plants were tested inhibitory effects on melanogenesis in cultured B-16 mouse melanoma cell lines. Among the tested samples, 1-desgalloyleugeniin exhibited the most potent inhibitory effect on melanogenesis in cultured cell lines.
In the purification of elaiophylin from a culture of Streptomyces hygroscopicus MCY -846, mono- and di-methyl-elaiophylin were obtained through a O-methylation of the hemiketal hydroxy group of elaiophylin. All the three elaiophylins showed cytotoxicity against several human tumor cell lines and murine cell lines. Elaiophylin and monomethyl-elaiophylin also showed antimicrobial activities against gram-positive bacteria and potent inhibitory effects on the activation of B cells by lipopolysaccharide as well as on the proliferation of mouse splenic lymphocytes stimulated by mitogens but dimethyl-elaiophylin did not. This result indicates that elaiophylin and monomethyl-elaiophylin would be strong immunosuppressants. Furthermore this result revealed an interesting structure-activity relationship suggesting that the lack of symmetry and/or the free OH group at C-11 of elaiophylin might be important in conferring biological activities.
A monoclonal antibody(MAb), KCT-23ER, with specificity for E-rosetted T cells of Korean native cattle was prepared by cell hybridization of myeloma P3/NS-1/1-Ag-4-1 and spleen cells from BALB/c mice hyperimmunized with E-rosetted lymphocytes. The isotype of KCT-23ER to T lymphocytes was mouse $IgG_{2b}$. KCT-23ER was reacted with 53.6% to peripheral blood lymphocytes and with 67.8% to nylon wool nonadherent blood lymphocytes. And it was reacted with 72.2%, 59.2% and 35.3% to thymocytes, prescapular lymph node cells and splenocytes, respectively. Immunocytological reactive rates to E-rosetted and non-E-rosetted cells were 72.5% and 22.4%, respectively. These results indicated that KCT-23ER reacted to E-rosetted cells was one of the MAb for investigate of $CD_2$ receptor positive cell subset in the Korean native cattle.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.17
no.5
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pp.1208-1216
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2003
Stress is known to influence the immune function via an effect on the central nervous system. To investigated the effects of Kwibitang water extract (KBT) on the specific immune response in C57BL/6 mice stressed by immobilization, we evaluated the changes in the cell viability, DNA fragmentation and subpopulation of thymocytes and splenocytes. KBT enhanced the cell viability of thymocytes and splenocytes decreased by immobilization stress. Also, KBT decreased DNA fragmentation of thymocytes and splenocytes increased by immobilization stress. KBT decreased the population of CD4/sup +/ cells and CD8/sup +/ cells in thymocytes and Thy1/sup +/ cells in splenocytes increased by immobolization stress, but increased the population of B220/sup +/ cells decreased by immobilization stress. In addition, KBT enhanced the production of ν-interferon and IL-2 decreased by immobilization stress. These results indicate that KBT may be useful for the prevention and treatment of stress via enhancement of the specific immune response
Kim, Hyuk Soon;Jang, Jong-Hwa;Lee, Min Bum;Jung, In Duk;Park, Yeong-Min;Kim, Young Mi;Choi, Wahn Soo
BMB Reports
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v.49
no.5
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pp.293-296
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2016
The immunoregulatory cytokine Interleukin 10 (IL-10) protein is produced by various cells during the course of inflammatory disorders. Mainly, it downregulates pro-inflammatory cytokines, antigen presentation, and helper T cell activation. In this study, we show that the ratio of IL-10-producing cells was significantly increased in lineage negative (i.e., not T, B, or leukocyte cell lineages) cells than in lineage positive cells in lymphoid and peripheral tissues. We further observed that IL-10-producing innate lymphoid cells (ILCs), here called firstly ILC10, were increased in number in oxazolone-induced contact hypersensitivity (CHS) mice. In detail, IL-10-producing lineage negative cells were elevated in the axillary, inguinal lymph node, and ear tissues of CHS mice. Notably, the cells expressed classical ILC marker proteins such as CD45, CD127, and Sca-1. Altogether, our findings suggest for the first time that ILC10s are present in various physiological settings and could be involved in numerous immune responses as regulatory cells.
Cell surface binding of epidermal growth factor(EGF) to EGF receptors was studied for a series of site-directed receptor mutants transfected into B82 mouse fibroblasts. Scatchard plots for truncation mutant receptors significantly lost nonlinearity for truncations below residue 1022. Transient plots of dissociation kinetics exhibited biphasic behavior for all receptor types, but the fraction of receptor in slow-dissociating form was reduced by an order of magnitude for the truncation mutants below residue 1022. Comparison of dissociation kinetics between control cells and cells treated with Triton X-100 revealed no significant variation for the slow-dissociating receptor form, but a noticeable variation was observed for the fast-dissociating receptor form when EGF receptors were truncated below residue 991. These results suggest that high affinity of EGF binding at cell surface depend on the EGF receptor cytoplasmic region.
Lactobacillus rhamnosus GG(ATCC 53103) is one of the best researched probiotic strains in the world. Studies in children have shown that Lactobacillus rhamnosus GG effectively prevents early atopic disease in patients with high risk. The active molecules associated with the immunostimulatory sequence and anti-allergy effects of L. rhamnosus GG have not yet been identified. Unmethylated CpG motifs in bacterial DNA have a mitogenic effect in mouse immune cells, CpG-containing ISS oligodeoxynucleotides are potent Th1 adjuvants, effective in both preventing and reversing Th2-biased immune deviation in allergy models. The genomic DNA of L. rhamnosus GG is a potent inducer of murine B cell and dendritic cell immunoactivation. In L. rhamnosus GG genomic DNA, ID35 shows high activity in ISS assays in both mice and humans. The effects of ID35 result from a unique TTTCGTT motif located at its 5'-end, and its effects are comparable with murine prototype CpG 1826. L. rhamnosus GG is known to secrete proteinaceous pili encoded by the spaCBA gene cluster. The presence of pili structures may be essential for its adhesion to human intestinal mucus, explaining the prolonged duration of intestinal residence of this bacterium, compared to that of non-piliated lactobacilli.
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