톡소포자충의 숙주-기생충 상호관계 연구의 일환으로 마우스 비장에서 분리한 T 림프구. B 림프 구 및 과립구(대부분 호중구로 구성)에 톡소포자층의 tachyzoites를 감염시킨 후 감염된 림프구와 호중구의 미세형태 변화를 관찰하는 한편 각 세포의 충체 감염에 대한 감수성을 동위원소 흡수시 험법을 이용하여 정량화하였다. 충체는 병원성이 강한 RH 주를 샤용하였고 각 세포는 BALB/c와 CBA 마우스의 비장에서 분리하여 사용하였다. 감염 후 24시간에 관찰한 결과, T 림프구, B 림프 구 및 호중구는 마우스 주에 상관없이 세포질 내에 tachyzoites가 한 개, 두 개 또는 7-8개까지 관찰되었다. 감염된 T 림프구는 충체 주변에 형성죈 parasitophorous vacuole로 인해 핵이 한 쪽으로 밀리며. 미토콘드리아의 수가 증가하였다 감염된 B 림프구는 조내형질세망(RER)이 대조군에 비해 발달하지 않았으며 감염된 호중구는 과립의 수가 현저히 감소하였다 림프구와 호중구의 톡소포자충 감염에 대한 감수성을 3H-uracil 흡수량으로 정량화한 결과. 마우스 주에 따른 차이는 없었고 모든 종류의 세포 내에서 충체가 활발히 증식함이 확인되었다. 이상의 결과로 볼 때, BALB/c와 CBA 마우스의 비장 T 림프구, B 림프구 및 호중구는 모두 톡소포자충의 tachyzoites 감염에 대해 감수성이 높음을 알 수 있었고, 감염된 면역세포는 그 기능이 저하될 것으로 추측된다.
Lethally irradited C3H/HeN mice were transplanted with syngeneic bone marrow. The B cell regeneration levels of spontaneous serum Ig, fecal igA and specific ig to diphtheria toxoid were determined at various time points. The number of B220+ cells reached normal range at 4 weeks after bone marrow transplantation(BMT) in spleen and lymph node. The B cell number of spleen returned to normal relatively soon than in the lymph node. Within 5 to 7 weeks after BMT, the transplanted mice contained nearly normal levels of spontaneous serum IgA, IgG2b and fecal IgA, but 2 fold lower levels of serum IgG2a, IgM and IgG3. Especially IgG3 levels were within low-normal range throughout the study. One to two weeks after immunization the predominant anti-diphtheria toxoid subtype was IgM. The levels of specific serum Ig were very low and after booster immunization at week 6, the short-lasting increase of Ig production was notd.
Kim, Jin;Ryu, Bokyeong;Kim, Ukjin;Kim, Chang-Hwan;Hur, Gyeung-Haeng;Kim, C-Yoon;Park, Jae-Hak
BMB Reports
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제53권9호
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pp.466-471
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2020
Several humanized mouse models are being used to study humanspecific immune responses and diseases. However, the pivotal needs of fetal tissues for the humanized mice model have been huddled because of the demand for ethical and medical approval. Thus, we have verified the hematopoietic and immunomodulatory function of HepaRG and developed a new and easy humanized mouse model to replace the use of fetal liver tissue. HepaRG co-transplanted Hu-NSG mice significantly increased CD45+ lymphocytes and CD19+ B cells and CD3+ T cells than normal Hu-NSG, suggesting enhanced reconstitution of the human immune system. These results have improved the applicability of humanized mice by developing new models easily accessible.
The meiotic process from the primordial stage to zygote in female germ cells is mainly adjusted by post-transcriptional regulation of pre-existing maternal mRNA and post-translational modification of proteins. Several key proteins such as the cell cycle regulator, Cdk1/cyclin B, are post-translationally modified for precise control of meiotic progression. The second messenger (cAMP), kinases (PKA, Akt, MAPK, Aurora A, CaMK II, etc), phosphatases (Cdc25, Cdc14), and other proteins (G-protein coupled receptor, phosphodiesterase) are directly or indirectly involved in this process. Many proteins, such as CPEB, maskin, eIF4E, eIF4G, 4E-BP, and 4E-T, post-transcriptionally regulate mRNA via binding to the cap structure at the 5' end of mRNA or its 3' untranslated region (UTR) to generate a closed-loop structure. The 3' UTR of the transcript is also implicated in post-transcriptional regulation through an association with proteins such as CPEB, CPSF, GLD-2, PARN, and Dazl to modulate poly(A) tail length. RNA interfering is a new regulatory mechanism of the amount of mRNA in the mouse oocyte. This review summarizes information about post-transcriptional and post-translational regulation during mouse oocyte meiotic maturation.
Cobrotoxin, a venom of Vipera lebetina turanica, is a group of basic peptidescomposed of 233 amino acids with six disulfide bonds formed by twelve cysteins. NF-kB is activated by subsequent release of inhibitory IkB and translocation of p50. Since sulfhydryl group is present in kinase domain of p50 subunit of NF-kB, cobrotoxin could modify NF-kB activity by protein-protein interaction. We therefore examined effect of cobrotoxin on NF-kB activities in lipopolysaccharide (LPS) and sodium nitroprusside (SNP)-stimulated Raw 264.7 mouse macrophages. Cobrotoxin suppressed the LPS and SNP-induced release of IkB and p50 translocation resulted in inhibition of DNA binding activity of NF-kB. Inhibition of NF-kB resulted in reduction of the LPS and SNP-induced production of inflammatory mediators NO and PGE2 generation. The inhibitory effect of cobrotoxin on the NF-kB activity were blocked by addition of reducing agents dithiothreitol and glutathione. These results demonstrate that cobrotoxin inhibits activation of NF-kB, and suggest that pico to nanomolar range of cobrotoxin could inhibit the expression of genes in the NF-kB signal pathway.
There are replete numbers of reports which have apparently shown that established patterns of methylation are critical for normal mammalian development. Here, we report expression of the DNA methyltransferases (Dnmts) family during mouse early development. Transcription of Dnmt1o occurs in one-cell and morula stage embryos, whereas Dnmtls transcripts were detectable in all cells and tissues examined during the study. Dnmt3a1 transcript was detected in all cells and Dnmt3a2 transcript was particularly detected in the oocyte and 1-cell stages. Low level Dnmt3b1 transcripts were expressed ubiquitously in oocyte, 1-cell, and preimplantation embryos except $2{\sim}4cell$ stages. Dnmt3b3 transcripts were only detected in E7.5 embryo and ovary. Furthermore, Dnmt31 transcripts were detectable in all cells and tissues examined. Unlike Dnmtl, both Dnmt3a and Dnmt3b proteins existed in the nucleus of preimplantation embryos till the morula stage. These Results suggest that differences Dnmts expression level exist and genomic DNA methylation patterns may be determined partly through differential expression of Dnmts during early development.
Hairless mouse에 자외선-B를 일회 조사한 후 시간에 따른 피부보호기능과 표면구조변화의 정도를 TEWL과 주름살밀도로 측정하였다. 자외선-B의 조사 량은 0.5, 1과 3 MED 였으며, 측정 및 관찰은 조사전과 조사 후 1, 3, 5, 7 및 14일에 수행하였다. TEWL은 Evaporimiter로, 주름살밀도는 silicone replica와 image-analyzer를 이용하여 측정하였다. 조사전과 0.5MED 그룹들의 TEWL값은 변화가 없었으나, 1과 3MED그룹들의 TEWL값은 현저한 변화를 보여 3일째에 극대 값을 보였고, 이후 감소하기 시작하여 14일째에는 거의 정상 값에 도달하였다. 반면 주름살밀도는 자외선-B의 조사량에 비례하는 경향을 보여 모든 조사 그룹에서 3-5일째까지 감소한 후 서서히 증가하였다. 결과로부터, 1) 자외선 조사 후 시간에 따른 TEWL과 주름살밀도의 최대, 소 값은 3일째에 나타났으며, 2) 주름살밀도의 회복정도가 조사량에 상관없이 시간에 따라 일정한 기울기를 보였으며, 3) 주름살밀도측정만이 Sub-erythemal 손상의 정도차를 유의하게 보여주었다.
In search for new antitumor agents, twelve 6-aziridinylbenzimidazole derivatives were synthesized and their cytotoxicities were tested against three cancer cell lines (mouse lymphocytic leukemia P388 and B16, and human gastric carcinoma SNU-16). From 4-amino-3-nitrotoluene as the starting material, 2-(acetoxymethyl)benzimidazoles (5a-d) were obtained by Phillips reaction. These benzimidazoles were then reacted with Fremy's salt to give a mixture of three 2-(acetoxymethyl) (8a-c) and four 2-(hydroxymethyl)benzimidazole-4,7-diones (9a-d). Addition of these quinones with aziridine afforded 6-aziridinyl-2-(acetoxymethyl) (10a-c) and 6-aziridinyl-2-(hydroxymethyl)benzimidazole-4,7-diones (11a-d). Utilizing 2-(hydroxymethyl)benzimidazole-4,7-diones (9b,d), esters 10d and 13e-h were prepared by the sequential reactions of esterification and addition. The synthesized compounds show potent cytotoxicity against all of three cell lines tested. The cytotoxicities of 10a-d or 11a-d against SNU-16 were wuperior to those of 13e-h, and were equal to or slightly higher than that of mitomycin C. compounds 11a-d were slightly more cytotoxic than 10a-d in all cell lines tested.
TGF-$\beta$1은 LPS 로 자극시킨 마우스의 spleen B cell 의 IgA와 IgG2b의 항체 합성을 선택적으로 증가시킨다고 알려져있다. 본 연구에서는 TGF-$\beta$1과 80%의 아미노산을 공유하는 TGF-$\beta$3가 마우스 spleen B cell 과 mesenteric lymph node B cell의 항체 합성에 미치는 영향을 IL-5와 함께 조사하였다. LPS로 활성화된 spleen B cell 에 TGF-$\beta$3만을 처리한 조건에서 IgA 항체합성이 약간 증가하였고, IL-5와 함께 넣어 준 배양조건에서는 IgA 항체가 현격히 증가하였다 IgG2b 합성의 증가는 TGF-$\beta$3 자극만으로도 가능하였고 IgA 와는 달리 IL-5 의 첨가 효과는 관찰되지 않았다. 한편, TGF-$\beta$3는 IgM 과 IgG1 항체 합성을 감소시켰고, IL-5와 함께 존재한 경우에도 의미있는 합성 증가는 볼 수 없었다. ELISPOT assay로 IgA 합성 세포수의 변화를 조사해본 결과, TGF-$\beta$3 단독으로도 IgA 합성세포수를 증가시켰으며, 이때 IL-5가 존재하였을 때 세포수가 조금 더 증가하였다. 이상의 결과는 TGF-$\beta$3가 약간의 차이는 있지만 TGF-$\beta$1과 유사하게 항체합성 패턴에 영향을 미침을 보여준다. 마지막으로, TGF-$\beta$3과 IL-5에 대한 MLN B cell 의 IgA와 IgG2b 항체합성 패턴은 spleen B cell 과 비슷하였다. 그러나 MLN B cell 의 IgG1 항체 합성은 spleen B cell과는 달리 TGF-$\beta$3에 의해 증가하였다. 본 실험의 결과는 전반적으로 TGF-$\beta$3가 TGF-$\beta$1과 비슷한 정도로 마우스 B cell의 항체합성에 영향을 미침을 보여준다. 그렇지만, 생체 내에서TGF-$\beta$3의 발현조절이 TGF-$\beta$1과 다를 것으로 예상됨으로 과연 TGF-$\beta$3가 B cell 분화에서 중요한 조절인자로 작용할지는 좀 더 연구되어야 할 것이다.
Ligand molecules that can recognize and interact with cancer cell surface marker proteins with high affinity and specificity should greatly aid the development of novel cancer diagnostics and therapeutics. HER-2/ErbB2/Neu (HER-2), a member of the epidermal growth factor receptor family, is specifically overexpressed on the surface of breast cancer cells and serves as both a useful biomarker and a therapeutic target for breast cancer. In this study, we aimed to isolate RNA aptamers that specifically bind to a HER-2-overexpressing human breast cancer cell line, SK-BR-3, using Cell-SELEX strategy. The selected aptamers showed strong affinity to SK-BR-3, but not to MDAMB- 231, a HER-2-underexpressing breast cancer cell line. In addition, we confirmed the specific targeting of HER-2 receptor by aptamers using an unrelated mouse cell line overexpressing human HER-2 receptor. The HER-2-targeting RNA aptamers could become a useful reagent for the development of breast cancer diagnostics and therapeutics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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