It is important to obtain semen with good quality for efficient fertilization and pregnancy. To obtain these semen, various methods have been developed but most of these methods are time consuming and require costly equipment. Therefore, the objective of this research is to investigate the usability of column filtration system as quick and simple method to get sperm with better quality. Ejaculates were obtained from 5 dogs and analyzed with basic quality parameters before each filtration. Sperm concentration was adjusted to $5{\times}10^7/ml$ after dilution. The experimental groups were divided into non-filtered group(control) and filtered groups(glass wool, Sephadex 5% and Sephadex 20%). Ejaculates were filtered through each filter system and assessed by recovery rate of sperm, motility, normal morphology, CFDA/PI stain and plasma membrane integrity(hypo-osmotic swelling test, HOST). The lowest recovery rate of spermatozoa was recorded in glass wool filtration group, followed by 20% Sephadex filtration group(p<0.05). There was no significant difference between control(non-filtered) and 5% Sephadex filtration poop. Also, there was no significant difference of sperm motility assessed under light microscope among experimental groups. Morphological normality of canine spermatozoa was the highest in the glass wool filtration group and the lowest in the 5% Sephadex filtration group with no significant differences versus 20% Sephadex filtration and control group, respectively(p<0.05). Viability of canine sperm assessed by CFCA/PI staining was the highest in the glass wool filtration poop with no significant difference versus the control group, and the lowest in the 20% Sephadex filtration group with no significant difference versus 5% Sephadex filtration group, respectively(p<0.05). HOS values of canine sperm was the highest in the 20% Sephadex filtration group with no significant difference versus 5% Sephadex filtration group, and the lowest in the control poop with no significant difference versus glass wool filtration group, respectively(p<0.05). Therefore, these results indicated that filtration treatment for extended canine sperm would be useful method to get sperm with better quality by trapping the damaged sperm, consequently filter would be physical barrier against injured or immotile sperm.
Lin, Chai-Ching;Huang, Chia-Cherng;Chen, Ming-Cheng;Huang, Andrew Jeng-Fang;Chiou, Hung-Yi
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제15권1호
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pp.19-25
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2002
The objectives of this study were to understand the possible mechanism of duck sperm toxicity induced by arsenic exposure in vivo, and to investigate the roles of the antioxidant L-ascorbic acid in ameliorating the arsenic-induced sperm impairment. To test the acute toxicity, the percentages of mortality of mature drakes treated with different concentrations of trivalent sodium arsenite, As (III), and pentavalent sodium arsenate, As (V) were measured. The LD50 value of As (III) for mature drakes was $4.89{\pm}1.49$ ppm. Although As (V) didn't cause any deaths even at a concentration of 40 ppm, the chronic toxicity of As (V) on sperm quality was shown by a decreased fertilization rate. When the concentrations of As (V) were above 0.4 ppm, fertilization rates were lower than those of 0.04 ppm and control. Drakes treated with 40 ppm of As (V) had the highest malondialdehyde (MDA) level in the testis tissue, $3.100{\pm}0.218{\mu}mole/g$ testis. This showed that 40 ppm of As (V) significantly induced lipid peroxidation in testis tissue. For the 1.2 ppm As (III) treatment, several significant effects were observed: (1) sperm motility was decreased most dramatically by $52.0{\pm}9.1$% after three days of incubation; (2) fertilization rate of artificially inseminated semen was the lowest, $26.4{\pm}15.4$; (3) the MDA concentration in testis tissue, $7.846{\pm}0.246{\mu}mole/g$ testis, was significantly higher than the others (p<0.05); (4) the sperm number, $1.17{\pm}0.40({\times}10^9)$, was significantly lower than with the 60 ppb and control treatments (p<0.05); (5) a black appearance and soft texture was observed in the testis tissue. The antioxidant L-ascorbic acid administered along with 1.2 ppm As (III) decreased the toxicity of arsenic. The ameliorating effects included: improved sperm motility, increased sperm number and fertilization rate, and decreased MDA concentration in the testis tissue. This study suggests that the toxicity of the trivalent arsenic on sperm quality is partly from free radicals generated by its metabolic pathway, and the antioxidant ascorbic acid ameliorates arsenic-caused sperm impairment.
The MTT assay is one of superior evaluation methods widely used to analyze the viability of metabolically active cell. It can be used to determine the percentage of viable sperm through measurement of the reduction of MTT granules at mitochondria in sperm tail. The purpose of this study is to determine the optimal condition of a simple and easy MTT assay to validate boar sperm viability and compare the accuracy of this test with microscopic examination. The MTT reduction rate for sperm viability were analyzed in microtiter plates (96 well) from 1 hr to 5 hr incubation periods at $37^{\circ}C$ using spectrophotometer (microplate reader) at 550 nm wavelength. The remainder of semen sample was simultaneously examined to compare the correlation of accuracy between MTT assay and other sperm parameters. Those sperm parameters were included the motility, survival rates, membrane integrity, mitochondria activity and acrosome integrity. The OD values of MTT assay (MTT reduction rates) did not greatly change at 1 hr to 5 hr incubation periods in different proportion of live and freeze-killed sperms (dead sperm). The MTT reduction rates or survival rates were decreased according to the different concentration of live and dead sperm. The linear regression at 1 hr and 4 hr incubation periods in sperm MTT assay was y=291.55x-72.176 and y= 180.64x-44.569, respectively. There are high correlation between 1 hr and 4 hr incubation periods (p<0.001). The results of MTT assay and other sperm parameters has a positive correlation (p<0.01 or 0.05). The correlation coefficients for MTT assay was 0.88115 for motility, 0.89868 for survival rates, 0.91722 for membrane integrity and 0.77372 for acrosome integrity, respectively. In conclusion, the MTT assay can be used as a reliable and efficient evaluation method for boar sperm viability. It can be use practical means to evaluate the quality of boar sperm by a fast, inexpensive and easy method.
Background/Aims MicroRNAs (miRNAs) were reported to be responsible for intestinal permeability in diarrhea-predominant irritable bowel syndrome (IBS-D) rats in our previous study. However, whether and how miRNAs regulate visceral hypersensitivity in IBS-D remains largely unknown. Methods We established the IBS-D rat model and evaluated it using the nociceptive visceral hypersensitivity test, myeloperoxidase activity assay, restraint stress-induced defecation, and electromyographic (EMG) activity. The distal colon was subjected to miRNA microarray analysis followed by isolation and culture of colonic epithelial cells (CECs). Bioinformatic analysis and further experiments, including dual luciferase assays, quantitative real-time polymerase chain reaction, western blot, and enzyme-linked immunosorbent assay, were used to detect the expression of miRNAs and how it regulates visceral hypersensitivity in IBS-D rats. Results The IBS-D rat model was successfully established. A total of 24 miRNAs were differentially expressed in the distal colon of IBS-D rats; 9 were upregulated and 15 were downregulated. Among them, the most significant upregulation was miR-200a, accompanied by downregulation of cannabinoid receptor 1 (CNR1) and serotonin transporter (SERT). MiR-200a mimic markedly inhibited the expression of CNR1/SERT. Bioinformatic analysis and luciferase assay confirmed that CNR1/SERT are direct targets of miR-200a. Rescue experiments that overexpressed CNR1/SERT significantly abolished the inhibitory effect of miR-200a on the IBS-D rats CECs. Conclusions This study suggests that miR-200a could induce visceral hyperalgesia by targeting the downregulation of CNR1 and SERT, aggravating or leading to the development and progression of IBS-D. MiR-200a may be a regulator of visceral hypersensitivity, which provides potential targets for the treatment of IBS-D.
본 연구에서는 닭 동결 정액의 융해 방법에 따라 정자 운동성의 변화도를 분석하였고, 적절한 융해방법에 대한 자료를 확보하였다. 동결정액을 융해하는 방법은 축종에 따라 서로 다른 열전달 효율을 제시하기도 하나, 닭 동결 정액에 대한 연구는 미진한 상태이다. 특히 닭 정액은 고 농도의 정액을 필요하기 때문에 이러한 요인에 대한 정자 운동성은 변이가 많은 것으로 알려져 있다. 그러므로, 닭 정액 융해에 필요한 온도는 $5^{\circ}C$임을 알 수 있었으며, 닭 농장에서 동결정액의 융해를 실시할 때, 알코올이 함유된 냉각수를 이용하게 되면 냉각수의 과냉각 생태를 방지할 수 있음을 관찰하였다. 또한, 동결정액을 이용한 인공수정을 실시할 때, 현장에서 직접 닭 정액을 융해하여 시간을 절약할 수 있으며, 인공 수정 작업시간이 30분을 넘기게 되면 정자의 운동성은 감소하여 수정율에 영향을 미치는 것으로 판단된다. 그러므로, 농가에서 동결정액을 활용할 경우, 융해에 신경을 써야 하며 정확한 방법을 적용하여야 수정란의 부화율 감소현상을 막을 수 있을 것으로 보인다. 이와 같이 본 연구에서 제시된 방법으로 동결정액을 이용할 때, 동결정액의 수정율이나 부화율의 변이를 막을 수 있고, 동결 정액을 활용한 가금종축생산 효율이 높아질 것으로 판단된다.
The general and some pharmacological actions of DWP 302 were investigated in animals and the following results were obtained. In central nervous system, DWP 302 had no effects on the pentobarbital induced anaesthesia, locomotor activity, rotarod test, traction test, analgesic action in the mice and body temperature in the rat. DWP 302 showed no depressive action on the convulsion induced by strychnine and electronic shock. From these results, DWP 302 was considered to have no or little pharmacological effect on the central nervous system. Furthermore, DWP 302 had no influences on the normal blood pressure and heart rate. In the isolated ileum of guinea pig, DWP 302 showed neither contractive nor relaxing effects against the acetylcholine ($10^{-6}g/mι$), histamine ($10^{-6}g/mι$) and $BaCl_2$ ($10^{-4}g/mι$) at a concentration of $1.9{\times}10^{-4}g/mι$ in bath. But it caused a slight increase in basal tone at a concentration of $6.3{\times}10^{-4}g/mι$ and this effect was inhibited by atropine $10^{-7}g/mι.$ In the isolated trachea and vas deference, DWP 302 showed no effect on the contractions produced by histamine and norepinephrine, respectively. And DWP 302 showed no effect on the contractions produced by acetylcholine and oxytocin in the isolated nonpregnant rat uterus. DWP 302 had no effect on bile excretion, urine volume, pH and gastrointestinal motility, But, DWP 302 showed a significant inhibitory effect on gastric secretion in the rat.
Purpose: The purpose of this study was to explore the effects of Patient Controlled Analgesia (PCA) on the postoperative patient's pain management and recovery of bowel movement with gastrointestinal cancer Method: The participants were 249 patients diagnosed with gastrointestinal disease and scheduled for elective surgery, who were recruited to either the postoperative patient-controlled analgesia group or epidural analgesia group. Participants aged 20 and above were recruited from P, K, D, and I university hospitals in B city. Pain visual analogue scale, and recovery of bowel movement according to PCA-related characteristics were measured using structured questionnaires from April 2005 through December 2005. Descriptive statistics t-test and F-test were used to analyze the data. SPSS WIN 10.0 program was used. Results: Mean score for pain was 62.31. Scores for pain on the visual analogue scale were significantly lower in the epidural-PCA than in the intravenous PCA, and also significantly lower in the absence of side effect of PCA than in the presence of side effect. Recovery time for bowel movement was significantly faster in the absence of side effect of PCA than in the presence of side effect. Conclusion: Based on the findings, there is a significant difference in pain and no difference in first passage of flatus according to PCA infusion route in patients who are post-operative for gastrointestinal cancer.
This study was carried out to investigate the necrotic enteritis of chicken in Korea. Epidemiological, pathological and microbiological examination were done on 12 naturally occurred cases of necrotic enteritis of chicken. And the susceptibility of isolated bacteria to antimicrobial agents was also examined. The results obtained were as follows; 1. The Clostridium perfringens infection, necrotic enteritis of chicken, occurred in the chickens mainly raised in floor pens. Necrotic enteritis of chicken was occurred coincidently with coccidiosis and Gumboro disease frequently. And several cases were recurred at 2-3 weeks after recovery. 2. Clinical signs of the infected chickens were depression, decreased appetite, reluctance to move, diarrhea, ruffled feathers and acute death within several hours. 3. The characteristic biochemical properties of isolates were 2-band hemolysis, no motility, positive reaction of reverse CAMP test and the formation of LV precipitate in egg yolk medium. 4. Gross lesions of the infected chickens were distention of intestine with gas, thickened mucosa and formation of thick pseudomembrane in intestine. Livers were friable with yellowish brown color and, in some case, showed demarcated necrotic foci. 5. Histopathological findings of the infected chickens were severe necrosis of the intestinal mucosa and attachment of numerous large bacilli to the mucosal surface of necrotic villi. In liver, necrosis of liver tissue and numerous large bacilli in the necrotic foci were also observed. 6. In susceptibility test to antimicrobial agents, 12 isolates of Clostridium perfringens were highly sensitive to ampicillin, baytril, cephalothin and penicillin.
난지도 하수처리장내 슬러지로부터 페놀을 유일한 탄소 및 에너지원으로 이용하는 세균을 분리하여 그 특성을 조사하고 동정하였다. 본 세균은 그람 음성 구균으로 운동성을 가지며 페놀의 농도가 0.05%, 0.10%, 0.15%인 배지에서 성장을 보였으며, BBL Test를 실시한 결과 유사성을 가진 세균이 나타나지 않았다. 세균의 계통분류학적 분석을 위하여 세균의 염색체로부터 16s rDNA를 클로닝한 후 DNA 염기서열을 파악하고 이를 비교 및 분석한 결과 본 세균은 Proteobacteria의 Gamma (${\gamma}$) Subdivision에 속한 Xanthomonas Group의 Stenotrophomonas maltophilia strain과 99%의 유사성을 보이는 것으로 나타났다. 또한 Nitrogen-Fixing bacterium MAGDE3, Pseudomonas cissicola strain과는 98%의 상동성을, Stenotrophomonas sp. LMG 198, Xanthomonas cucurbitae과는 97%의 상동성을 보였다.
The purpose of this study is to estimate how much the motility of affected and unaffected lower limb respectively would have effects on their ambulation through comparing the difference between their affected and unaffected lower limb and studying the correlation between such difference and their ambulation. In addition, the study also intends to find out remedial measures suitable for improving their ambulation with relevant physical treatment. To do this, a quantitative electromyogram(QEMG) test was done to hamstring of affected and unaffected lower limb so as to yield IP values. Based on such IP values, RMS(root mean square) values as the total sum of IP values were found with QEMG analysis system (made by Medelec Co.) and then the ambulation depending on the difference in muscular strength were analyzed by ink-foot print method as well as the corresponding statistics were processed by T-test through SPSS. The differences in muscular strength of hamstring in unaffected limbs of hemiplegic patients only affect stride length. It was statistically significant. The effect of difference in muscular strength of the hamstring in affected limb of hemiplegic patients on their ambulation was very different between strong and weak group in terms of walking velocity, step per minute, stride and step length, showing statistically significant difference(p<.05). Although there was a difference in the step length of the affected limb, it was not statistically significant(p>.05). For the unaffected hamstring, there were significant differences of stride length between in unaffected limb and in affected limb. For the affected hamstring, there were also significant differences in walking velocity, step per minute, stride and step length. Besides, it was found that the difference of the muscular strength between strong and weak group was at the highest.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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