• 제목/요약/키워드: monooxygenase

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Role of metabolism by flavin-containing monooxygenase in thioacetamide-induced immunosuppression

  • Lee, Jeong W.;Ki D. Shin;Shin W. Cha;Kim, Jong-C.;Kim, Eun J.;Sang S. Han;Tae C. Jeong;Woo S. Koh
    • 한국독성학회:학술대회논문집
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    • 한국독성학회 2001년도 International Symposium on Signal transduction in Toxicology
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    • pp.121-121
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    • 2001
  • Thioacetamide has been known to cause immune suppression. In this report we studied the role of metabolic activation by flavin-containing monooxygenase in the thioacetamide-induced immune response. To determine whether the metabolites of thioacetamide produced by flavin-containing monooxygenase result in the immunosuppression, methimazole, a flavin-containing monooxygenase inhibitor, was used to block the flavin-containing monooxygenase pathway.(omitted)

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미생물 유래 Styrene monooxygenase를 이용한 광학활성 styrene oxide 유도체의 비대칭합성 (Microbial styrene monooxygenase-catalyzed asymmetric synthesis of enantiopure styrene oxide derivatives)

  • 이은열;박성훈
    • KSBB Journal
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    • 제24권3호
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    • pp.239-245
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    • 2009
  • 광학활성 styrene oxide는 친전자성반응, 친핵성반응, 산 염기반응, 산화 환원반응 등 다양한 반응을 유도할 수 있어 광학활성 중간체로 널리 사용될 수 있다. Styrene monooxygenase (SMO)를 생촉매로 이용하여 styrene의 side-chain 이중결합에 입체선택적으로 에폭사이드 링을 도입시켜 광학활성 styrene oxide 유도체를 제조할 수 있다. 다양한 기질 특이성을 가진 신규 SMO 생촉매 개발, 이상계 반응 시스템, in situ 분리 공정, multimeric oxygenase 효소발현 및 안정화 기술 개발, NADH 등 cofactor regeneration 등에 대한 연구개발이 활발히 진행되고 있어, 미생물유래의 SMO를 생촉매로 활용하는 광학활성 styrene oxide 유도체 제조 기술의 상업화가 기대된다.

Genetic Variation of Hemoglobin and Ganglioside Monooxygenase in Korean Sapsarees (Canis familiaris)

  • Kim, Jong-Bong;Yuichi Tanabe
    • Journal of Life Science
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    • 제10권2호
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    • pp.14-16
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    • 2000
  • Genetic variation of hemoglobin and erythrocyte ganglisoside monooxygenase were analyzed in Korean nature dog Sapsarees by horizontal starch gel electrophoresis and thin layer chromatography. Hemoglobin has three phenotypes A, B and AB, which are controlled by two codominant alleles, {TEX}$Hb^{a}${/TEX} and {TEX}$Hb^[b}${/TEX}, at one autosomal locus. Gene frequencies of {TEX}$Hb^{a}${/TEX} and {TEX}$Hb^{b}${/TEX} were 0.537 and 0.4625. Ganglioside monooxygenase has two phenotypes, dominant and recessive. They are controlled by a dominant allele {TEX}$Gmo^{a}${/TEX} and a recessive allele {TEX}$Gmo^{g}${/TEX}. Frequencies of {TEX}$Gmo^{a}${/TEX} and {TEX}$Gmo^{g}${/TEX} were 0.5477 and 0.4523.

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사람 Flavin-containing Monooxygenase의 셀레니움화합물에 대한 기질 특이성에 관한 연구 (Substrate Specificity of the Human Flavin-containing Monooxygenase for Organic Selenium Compounds)

  • Kim, Young-Mi
    • Environmental Analysis Health and Toxicology
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    • 제15권4호
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    • pp.139-145
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    • 2000
  • FMO (Flavin-containing Monooxygenase, EC1.14.13.8)는 다양한 종류의 식품, 약물이나 기타 외래 유래물질(xenobiotics)을 산화시키는 NADPH와 $O_2$의존성 약물대사 효소이다 현재까지 5종의 subfamility가 존재하는 것으로 보고되어지고 있으며 그 중 가장 잘 알려진 FMO3는 대표적인 subfamility로서 주로 간에 존재한다. 사람 FMO에 관한 연구는 최근들어 활성화되기 시작했으며 질소, 황이나 인 등을 포함하는 친핵성 (nucleophilic)화합물이 대표적인 기질로 보고되어 있다. 본 연구에서는 항 산화작용이 있는 것으로 알려진 selenium을 포함하고 있는 화합물에 대한 사람의 FMO3의 기질특이성을 알아보고자 하였다. 사람 FMO3를 baculovirus system을 이용하여 발현시킨 후 그 microsomal FMO3을 이용하여 thiochline assay를 시행하였다. 그 결과 기질의 크기에 따라 활성의 차이가 있었으며 크기가 작은 selenium화합물은 기존의 질소나 인 등을 포함하는 기질보다 더 낮은 $K_{m}$ 값을 보였다.

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Ceriporia sp. ZLY-2010에 의한 폴리염화비페닐류의 생분해 : 균체 외 효소활성 및 cytochrome P450 monooxygenase 영향 (Ceriporia sp. ZLY-2010 in Biodegradation of Polychlorinated Biphenyls : Extracellular Enzymes Production and Effects of Cytochrome P450 Monooxygenase)

  • 홍창영;곽기섭;이수연;김선홍;정한섭;최인규
    • Journal of the Korean Wood Science and Technology
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    • 제39권6호
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    • pp.469-480
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    • 2011
  • 본 연구에서는 Ceriporia sp. ZLY-2010을 이용하여 폴리염화비페닐류의 생분해와 효소 시스템간의 상관관계에 대해 알아보고자 하였다. 폴리염화비페닐 동족체 첨가에 따라 단백질 정량 및 manganese peroxidase (MnP)와 laccase의 활성을 비교하였으며, cytochrome P450 monooxygenase의 저해 정도를 평가함으로써 균체 내 효소가 폴리염화비페닐의 생분해에 끼치는 영향을 구명하였다. 단백질 정량 및 균체 외 효소 활성을 측정해 본 결과, 대조구에 비해 폴리염화비페닐 동족체를 첨가한 실험구에서 단백질 농도 및 효소활성이 더 높게 측정되었다. 단백질 농도의 경우, 2,2',4,4',5,5'-hexachlorobiphenyl을 첨가했을 때, 가장 높은 단백질 농도가 측정되었다. 하지만 MnP와 laccase 활성에서는 상대적으로 염소원자가 적게 치환된 2,3',4',5-tetrachlorobiphenyl을 첨가한 실험구에서 높게 나타나는 경향을 보였다. Cytochrome P450 monooxygenase의 저해 정도를 평가한 결과, 2,3',4',5-tetrachlorobiphenyl을 첨가한 실험구의 경우, 배양 1일째, 저해제 1-aminobenzotriazole 0.1 mM에서 2.73%의 분해율을 나타냈으며, 저해제 첨가 시 생분해율이 크게 감소하는 것으로 나타났다. 2,2',4,4',5,5'-hexachlorobiphenyl 역시, 저해제의 존재 하에 20% 내외의 분해율을 보였으며, 이는 대조구에 비해 약 40% 감소한 비율이다.

A Spectrophotometric Assay for Cytochrome P450 Monooxygenase Activity

  • Lee, Sung-Eun;Choi, Won-Sik;Park, Byeoung-Soo;Lee, Byung-Ho
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제41권4호
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    • pp.213-217
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    • 1998
  • An assay for cytochrome P450 monooxygenase activity by determination of the products of organophosphate oxidation via inhibition of acetylcholinesterase was described. Extracts from strains of Oryzaephilus surinamensis selected for resistance to chlorpyrifos-methyl (QVOS 102), fenitrothion (VOS F) and malathion (VOS 3), and a standard susceptible strain VOS 48, were incubated with an organophosphate in the presence of a NADPH-generating system and acetylcholinesterase. The degree of inhibition of the acetylchoinesterase activity was converted to manooxygenase activity using standard curves for the inhibition of acetylcholiesterase by chlorpyrifos-methyl-oxon, fenitrooxon and malaoxan. Activity was detectable in VOS 48 and was present at different increased levels with the different organophosphates in the three resistant strains, suggesting that different forms of P450 might be involved in organophosphate oxidation in these insects. The assays were carried out using crude insect homogenates and much smaller samples of insect material than the standard aldrin to dieldrin assay. It should be possible to use the method for determination of monooxygenase activity in single insert.

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Production of Bioactive 3'-Hydroxystilbene Compounds Using the Flavin-Dependent Monooxygenase Sam5

  • Heo, Kyung Taek;Lee, Byeongsan;Son, Sangkeun;Ahn, Jong Seog;Jang, Jae-Hyuk;Hong, Young-Soo
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제28권7호
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    • pp.1105-1111
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    • 2018
  • The flavin-dependent monooxygenase Sam5 was previously reported to be a bifunctional hydroxylase with coumarate 3-hydroxylase and resveratrol 3'-hydroxylase activities. In this article, we showed the Sam5 enzyme has 3'-hydroxylation activities for methylated resveratrols (pinostilbene and pterostilbene), hydroxylated resveratrol (oxyresveratrol), and glycosylated resveratrol (piceid) as substrates. However, piceid, a glycone-type stilbene used as a substrate for bioconversion experiments with the Sam5 enzyme expressed in Escherichia coli, did not convert to the hydroxylated compound astringin, but it was converted by in vitro enzyme reactions. Finally, we report a novel catalytic activity of Sam5 monooxygenase for the synthesis of piceatannol derivatives, 3'-hydroxylated stilbene compounds. Development of this bioproduction method for the hydroxylation of stilbenes is challenging because of the difficulty in expressing P450-type hydroxylase in E. coli and regiospecific chemical synthesis.

담수토양내 미생물에 의한 Dazinon의 분해 (Microbial Degradation of Diazinon in Sudmerged Soil)

  • 김중호;이영하;최종우;이규승
    • 미생물학회지
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    • 제27권2호
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    • pp.139-146
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    • 1989
  • 담수상태의 논토양에 처리한 유기인계 살충제 diazinon의분해기작과 그 분해산물에 대하여 조사하였다. 항온조건($30^{\circ}C$)하에서 살균토양에 비하여 비살균토양에서의 diazinon 분해가 보다 빠르게 일어남으로써 담수토양내 diazinon 분해에 미생물의 대사활동이 매우 종요한 것으로 나타났는데, 비살균토양내 diazinon의 반감기는 약 2일이엇고 항온반응 7일만에 95% 이상의 분해가 이루어졌다. 또한 diazinon 분해기간 중 미생물 개체수와 아울러 토양내 monoxygenase 및 esterase 활성의 증가가 이루어졌으며 이는 토양내 diazinon 처리가 이 약제의 분해와 관련된 미생물학적 요인의 생장 또는 활성을 촉진시키고 있음을 보여준다. 이와 관련하여 담수토양내 diazinon 분해산물로서 esterase 작용에 의한 2-isopropyl-6-methyl-4-hydroxy pyrimidine 이외에 monooxygenase에 의한 diazoxon과 hydroxydiazinon, 그리고 sulfotep 등이 mass spectrometry에 의하여 확인되었다.

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돼지 간중의 Monooxygenase 가 Diazinon 의 분해에 미치는 영향 (The degradation o Diazinon by hepatic monooxygenase of Pig)

  • 류종국;이규승
    • 한국환경농학회지
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    • 제9권2호
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    • pp.153-159
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    • 1990
  • 돼지간을 두 fraction($105,000{\time}g$ pellet, superatant)으로 나누어 Diazinon의 분해에 관여하는 두 효소(Monooxygenase와 esterase)의 활성 및 저해제(EPN, Beam, PBO)첨가에 따른 Diazinon의 분해억제 능력을 비교 검토하였다. 1. 돼지간의 microsomal fraction과 soluble fraction에서 M. O.와 β-esterase 활성은 20분과 60분에 최고활성을 나타내었다. 2. Microsomal fraction에서의 M. O.활성은 NADPH generating system의 첨가로 1.6배의 활성증가와 지속성이 확인되었다. 3. Microsomal fraction에서의 Diazinon분해량은 30분에 최고량(0.060nM/ mg/ min)을 보였으나, soluble fraction에서는 60분에 최고량(0.018nM/ mg/ min)을 보여 1/3수준이었다. 4. M. O.활성에 미치는 Diazinon에 대한 EPN, Beam, PBO의 첨가효과는 Beam(14%)< EPN(15%)

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Electron Transfer to Hydroxylase through Component Interactions in Soluble Methane Monooxygenase

  • Lee, Chaemin;Hwang, Yunha;Kang, Hyun Goo;Lee, Seung Jae
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제32권3호
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    • pp.287-293
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    • 2022
  • The hydroxylation of methane (CH4) is crucial to the field of environmental microbiology, owing to the heat capacity of methane, which is much higher than that of carbon dioxide (CO2). Soluble methane monooxygenase (sMMO), a member of the bacterial multicomponent monooxygenase (BMM) superfamily, is essential for the hydroxylation of specific substrates, including hydroxylase (MMOH), regulatory component (MMOB), and reductase (MMOR). The diiron active site positioned in the MMOH α-subunit is reduced through the interaction of MMOR in the catalytic cycle. The electron transfer pathway, however, is not yet fully understood due to the absence of complex structures with reductases. A type II methanotroph, Methylosinus sporium 5, successfully expressed sMMO and hydroxylase, which were purified for the study of the mechanisms. Studies on the MMOH-MMOB interaction have demonstrated that Tyr76 and Trp78 induce hydrophobic interactions through π-π stacking. Structural analysis and sequencing of the ferredoxin domain in MMOR (MMOR-Fd) suggested that Tyr93 and Tyr95 could be key residues for electron transfer. Mutational studies of these residues have shown that the concentrations of flavin adenine dinucleotide (FAD) and iron ions are changed. The measurements of dissociation constants (Kds) between hydroxylase and mutated reductases confirmed that the binding affinities were not significantly changed, although the specific enzyme activities were significantly reduced by MMOR-Y93A. This result shows that Tyr93 could be a crucial residue for the electron transfer route at the interface between hydroxylase and reductase.