In order to effectively utilize the by-products of sea-food, the utilization of enzyme-modified flounder(Limanda aspera) skin gelatin as an emulsifier was investigated. In the experiment, the gelatin was extracted from the flounder skin with the heat-treatment at $60^{\circ}C$ and in pH 5.0 for 3 hrs with four volumes of distilled water and emulsifiers were enzymatically modified L-leucine alkyl esters$(L-leucine-OC_n$ : n= 2, 4, 6, 8 and 10) to the gelatin$(EMFSG-C_2,\;EMFSG-C_4,\;EMFSG-C_6,\;EMFSG-C_8,\;EMFSG-C_{10})$ for improving the functional properties such as emulsifying activity, emulsifying viscosity, whippability, electric conductivity, critical micelle concentration and interface tension, etc. Also, the functional properties of the L-leucine alkyl ester modified gelatins were compared with those of Tween-60 as reference. Molecular weights of the enzymatically modified flounder skin gelatin(EMFSG) were 20.5kDa. in $EMFSG-C_2.\;19.5 kDa.\;in\;EMFSG-C_4\;and\;16.5kDa.\;in\;EMFSG-C_6,\;EMFSG-C_8$ and $EMFSG-C_{10}$. respectively. Emulsifying activity and emulsifying viscosity in the modified gelatins were risen with increase of carbon number of the introduced L-leucine alkyl esters. Among the modified gelatins, $EMFSG-C_6$ exhibited the highest emulsifying stability and foaming stability, whereas $EMFSG-C_8$ showed the highest whippability. The electric conductivities of the all $EMFSG-C_n$ were linearly risen to critical micelle concentration(CMC) , therefore $EMFSG-C_{10}$ exhibited the lowest CMC value and interface tension, and dense particles in the microscopic observation. In conclusion, the best quality in functional properties was assured on $EMFSG-C_{10}$.
Stable cell preservation is an essential factor in the regenerative medicine for cell therapies and transplantation of biologic materials. In this study, we studied to provide more stable hypothermic preservation by protection of cell damage during the preservation at $4^{\circ}C$. The result of searching for key components that have excellent efficacy in hypothermic preservation of cells, we have identified the fact that the hypothermic preservation adding protein hydrolysates such as yeast hydrolysate is far superior to others. All protein hydrolysates that are derived from animal, plant and microbe sources have superior efficacy, especially the peptides which have molecular weights under 10 kDa have the best efficacy among the components of protein hydrolysate. The protein hydrolysates prevented the decrease of ATP level in the cells caused by hypothermic environment and they inhibited the generation of ROS. Adding antioxidants and control agents of osmotic pressure were showed to have more superior efficacy in hypothermic preservation. Finally, KUL261 solution (DMEM/F12 1 : 1 medium, yeastolate 1%, $\alpha$-tocopherol $100{\mu}M$, dextran 2.5%), the preservation solution developed in this study, showed the best efficacy in both cell viability and cell growth more than other conventional preservation solutions. In conclusion, the improved hypothermic preservation solution that contains the protein hydrolysates as a key component provide the best preservation efficacy. It provides better efficacy than other preservation solutions and will contribute to both the development of regenerative medicine and global commercialization in this therapeutic field.
Lee Ye-Kyung;Park Bum-Ho;No Hong-Kyoon;Kim Soon-Dong
Journal of the East Asian Society of Dietary Life
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v.15
no.5
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pp.598-605
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2005
Effects of chitosan-ascorbate(CA) and calcium lactate(CL) on fermentation and quality of squid sikhae were investigated CA and LA were added at $0.5\%$ (designated CA1 and CL1) and $1.0\%$(CA2 and CL2) concentrations, respectively and fermented for 12 days at $10^{\circ}C$. pH of CA-added sikhae was higher than that of control, while acidity of the former was lower than that of the latter. During 12 days of fermentation, CA-added sikhae showed higher protease activity than control by $2.3\~2.6$ times and CL-added sikhae by $2.8\~3.6$ times. At 12 days of fermentation, CA-added sikhae revealed higher protease activity than control by $1.2\~1.4$ times and CL-added sikhae by $1.5\~1.9$ times. CA-added sikhae also showed higher amino-nitrogen content than control by $1.4\~1.7$ times and CL-added sikhae by $1.9\~3.5$ times. In comparison of CA1 with CA2, CA2 showed all higher pH, protease and amylase activity, and amino-nitrogen content than CA1. In analysis of electrophoresis, molecular weights of major proteins in ~w squid were $116.9\~119.0$, 96.5 and 59.3kDa. However, after fermentation for 12 days, a protein band of 119.0kDa disappeared but a new protein band with below 14 kDa appeared in sikhae, especially CA-added sikhae. In sensory evaluation, the intensity of sour taste was the highest for control and the lowest for CA2. Softness of squid was the highest for control and the lowest for CA2. Overall acceptability was the best for CA2. In conclusion, these results suggest use of $1\%$ CA in sikhae preparation as addition of CA(CA2) increased the protease and amylase activity, nitrogen content of amino form, sensory acceptability as well as shelf-life of sikhae.
Bacterial colonies which were able to oxidize the manganese were isolated from six soil samples in Byungchon area. Among them, one bacterial strain was selected for this study based on its high manganese oxidation activity. This selected bacterial strain was identified as Pseudomonas sp. MN5 through physiological-biochemical test and analysis of its 16s rRNA sequence. This selected bacterial strain was able to utilize fructose and maltose, but they doesn't utilizing various carbohydrates as a sole carbon source. Pseudomonas sp. MN5 showed a very sensitive to antibiotics such as kanamycin, chloramphenicol, streptomycin and tetracycline, but a high resistance up to mg/ml unit to heavy metals such as lithium, manganese and barium. Optimal manganese oxidation condition of Pseudomonas sp. MN5 was pH 7.5 and manganese oxidation activity was inhibited by proteinase K and boiling treatment. The manganese oxidizing protein produced by Pseudomonas sp. MN5 was purified by ammonium sulfate precipitation, HiTrap Q FF anion exchange chromatography and G3000sw $_{XL}$ gel filtration chromatography. By sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, three manganese oxidizing protein with estimated molecular weights of 15 kDa, 46.7 kDa and 63.5 kDa were detected. Also, it was estimated that manganese oxidizing protein produced by Pseudomonas sp. MN5 were a kind of porin proteins through internal sequence and N-terminal sequence analysis.
Kim, Hyun-Wook;Yeo, In-Jun;Hwang, Ko-Eun;Song, Dong-Heon;Kim, Yong-Jae;Ham, Youn-Kyung;Jeong, Tae-Jun;Choi, Yun-Sang;Kim, Cheon-Jei
Food Science of Animal Resources
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v.36
no.5
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pp.665-670
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2016
The objectives of this study were conducted to characterize pepsin-soluble collagen (PSC) extracted from bones (PSC-B), skins (PSC-S), and tendons (PSC-T) of duck feet and to determine their thermal and structural properties, for better practical application of each part of duck feet as a novel source for collagen. PSC was extracted from each part of duck feet by using 0.5 M acetic acid containing 5% (w/w) pepsin. Electrophoretic patterns showed that the ratio between α1 and α2 chains, which are subunit polypeptides forming collagen triple helix, was approximately 1:1 in all PSCs of duck feet. PSC-B had slightly higher molecular weights for α1 and α2 chains than PSC-S and PSC-T. From the results of differential scanning calorimetry (DSC), higher onset (beginning point of melting) and peak temperatures (maximum point of curve) were found at PSC-B compared to PSC-S and PSC-T (p<0.05). Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) presented that PSC-S and PSC-T had similar intermolecular structures and chemical bonds, whereas PSC-B exhibited slight difference in amide A region. Irregular dense sheet-like films linked by random-coiled filaments were observed similarly. Our findings indicate that PSCs of duck feet might be characterized similarly as a mixture of collagen type I and II and suggest that duck feet could be used for collagen extraction without deboning and/or separation processes.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.27
no.7
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pp.753-761
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2005
In this study, pretreatment of organic matters with $MIEX^{(R)}$ was evaluated using bench-scale experimental procedures on four organic matters to determine its effect on subsequent UF membrane filtration. For comparison, coagulation process was also used as a pretreatment of UF membrane filtration. Moreover, the membrane fouling potential was identified using different fractions and molecular weights of organic matters. From the removal property of MW organic matters by coagulation process for the sample water NOM and AOM, the removal efficiency of high MW organic matters were much higher than those of low MW organic matters. It was shown that the removal efficiency of high MW organic matter more than 10 kDa was lower than that of low MW organic matter for $MIEX^{(R)}$ process. For the change of permeate flux by the pretreatment process, $MIEX^{(R)}$+UF process showed high removal efficiency of organic matter as compared with coagulation-UF processes, but high reduction rate of permeate flux was presented through the reduction of removal efficiency of high MW organic matter. From sequential filtration test results in order to examine the effect of MW of organic matter on membrane fouling, it was found that the membrane foulant was occurred by high MW organic matter, and the DOC of organic matter less than 0.5 mg/L was working as the membrane foulant. In the case of sample water composed of low MW organic matter less than 10 kDa, since the low MW organic matter less than 10 kDa has high removal efficiency by $MIEX^{(R)}$, low reduction rate of permeate flux is obtained as compared with coagulation-UF processes. In summary, it is required to conduct the research on physical/chemical characteristic of original water before pretreatment process of membrane process is selected, and a pertinent pre-treatment process should be employed based on the physical/chemical characteristic of original water.
A marine bacterial strain producing agar-degrading enzymes was isolated from a mud flat in Jeboo-do (Korea) using a selective artificial sea water (ASW) agar plate containing agar as the sole carbon source. The isolate, designated as SH-1, was gram-negative, aerobic, and motile with single polar flagellum. 16S rRNA gene sequence similarity analysis showed the isolate SH-1 had the highest homology (96.5%) to marine bacterium Neiella marina J221. Cells could grow at $28-37^{\circ}C$ but not at $42^{\circ}C$, and the agarase activity of the cell culture supernatant was higher when grown at $28^{\circ}C$ than when grown at $37^{\circ}C$. Cells could grow when concentrations of 1-5% (w/v) NaCl were added to the growth media with the best growth observed at 3% NaCl, and the agardegrading enzyme activity of the cell culture supernatant was best when grown at 3% NaCl-containing growth media under the conditions we examined. The crude enzyme prepared from 48-h culture broth of strain SH-1 exhibited an optimum pH and temperature for agar-degrading activity at 7.0 and $40^{\circ}C$, respectively. Zymogram analysis of the crude supernatant and cell extract showed that strain SH-1 produced at least 3 agar-degrading enzymes with molecular weights of 15, 35, and 52 KD. Thinlayer chromatography (TLC) analysis also suggested that HS-1 produces ${\beta}$-agarase to degrade agarose to neoagarooligosaccharides.
White kidney bean, Phaseolus vulgaris, contains proteinaceous inhibitors of ${\alpha}-amylase$. Two inhibitors have been purified by conventional protein fractionation methods such as ethanol precipitation, ammonium sulfate fractionation, DEAE-Sephadex ion exchange chromatography and Sephadex G-100 gel chromatography. The inhibitors were purified as I-1 and I-2 based on their elution order from the DEAE-Sephadex column. The overall purification ratio were about 15.0 and 14.8 for I-1 and I-2, respectively. The molecular weights of purified ${\alpha}-amylase$ inhibitors were 50,000 and 45,000 determined by Sephadex G-100 gel filtration and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. They contain $17.6{\sim}17%$ of carbohydrate, $70{\sim}80%$ of protein. The carbohydrates were composed of glucose : xylose : mannose : N-acetylglucosamine (5 : 3 : 50 : 42).
Kim, Tae-Wook;Joo, Sang-Min;Oh, Ah-Reum;Park, So-Jin;Han, Sang-Hyun;Oh, Hong-Shik
Korean Journal of Environment and Ecology
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v.27
no.5
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pp.550-560
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2013
This study was investigated the morphological characters, secondary sexual dimorphism, and habitat patterns of Korean Rattus animals collected on Jeju Island from April 2005 to October 2012. Two wild rat species, namely R. norvegicus and R. tanezumi were identified on Jeju Island based on morphological characteristics and molecular data; however, R. rattus, which had recorded formerly, was not found in this study. Individuals of R. norvegicus were captured from urban, rural, and natural habitats, while those of R. tanezumi were specially found in animal farms and the surrounding areas. Comparing of morphological characters of two species, R. norvegicus had a shorter tail and ears than R. tanezumi (p<0.05), and the ratios of tail length and ear length to those of head-body length showed significantly differences between two species (p<0.05). The body weights (BW) of urban populations of R. norvegicus were significantly heavier than those of rural populations (p<0.05). No secondary sexual dimorphism was found in R. norvegicus, but females of R. tanezumi showed heavier BW than those of males (p<0.05). These findings suggest that it is necessary to revise the records for the existence of R. tanezumi and to confirm the animal fauna and elucidate the distribution and ecological characteristics from further studies using extensive sampling and detailed investigations on Jeju Island and also on the Korean Peninsula.
Ipriflavone (IP) stimulates proliferation and differentiation of osteoblast and also enhances calcitonin secretion in the presence of estrogen. Poly(lactide-co-glycolide) (PLCA) due to its controllable biodegradability and relatively good biocompatibility is one of the most significant candidates for the study of drug controlled release system. In this study, IP-loaded PLGA microspheres (MSs) was prepared by using conventional O/W solvent evaporation method. The size of MSs was in the range of 5~200 $mu extrm{m}$. The morphology of MSs was characterized by SEM. And, in vitro release amounts of IP were analyzed by HPLC. The highest encapsulation efficiency were obtained by using gelatin and polyvinyl alcohol (PVA) as emulsifiers. The morphology, size distribution, and in vitro release pattern of MSs were changed by several preparation parameters such as molecular weights (8, 20, 33 and 90 kg/mol), polymer concentrations (2.5, 5, 10 and 20%), emulsifier types (PVA, gelatin and Tween 80), initial drug loading amount (5, 10, 20 and 30%) and stirring speed (250, 500 and 1000 rpm). The release of IP in vitro was more prolonged over 30 days, with close to zero-order pattern by controlling the preparation parameters. The physicochemical properties of IP-loaded PLGA MSs were investigated by XRD and DSC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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