Cotto, Ada;Looper, Jessica K.;Mota, Linda C.;Son, Ahjeong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.11
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pp.1928-1935
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2015
Microbial growth kinetics is often used to optimize environmental processes owing to its relation to the breakdown of substrate (contaminants). However, the quantification of bacterial populations in the environment is difficult owing to the challenges of monitoring a specific bacterial population within a diverse microbial community. Conventional methods are unable to detect and quantify the growth of individual strains separately in the mixed culture reactor. This work describes a novel quantitative PCR (qPCR)-based genomic approach to quantify each species in mixed culture and interpret its growth kinetics in the mixed system. Batch experiments were performed for both single and dual cultures of Pseudomonas putida and Escherichia coli K12 to obtain Monod kinetic parameters (μmax and Ks). The growth curves and kinetics obtained by conventional methods (i.e., dry weight measurement and absorbance reading) were compared with that obtained by qPCR assay. We anticipate that the adoption of this qPCR-based genomic assay can contribute significantly to traditional microbial kinetics, modeling practice, and the operation of bioreactors, where handling of complex mixed cultures is required.
Two bacterial strains capable of degrading trichloroethylene (TCE), isolated form soils contaminated with various chlorinated alkenes, were identified as Alcaligenes odorous N6 and Nocardia sp. Hl7. In addition, four KCTC strains, including three strains of Pseudomonas putida and one strain of Sphingomonas chlorophenolica, exhibited an ability to degrade toluene. A. odorans N6 and Nocardia sp. H17 degraded 84% of the initial amount of TCE in a basal salts medium (BSM), containing 0.2 mM TCE as the sole source of carbon and energy, in a day. The optimal pH for growth was within a range of 7.0-8.0. A mixed culture of the four toluene-degrading isolates degraded 95% of 0.2 mM TCE with 1.5 mM toluene as an inducer, whereas no TCE was degraded by the same mixture without an inducer. When a mixed culture of all 6 isolates was used, the degradation efficiency of 0.2 mM TCE was 72% without an inducer, in a day, and 82% with toluene as an inducer. In a continuous treatment, 1,000 mg/1 of TCE in an artificial wastewater was completely removed within 18 h when an activated sludge was used along with the microbial mixture, which was 27 h laster than when only an activated sludge was used. Accordingly, it would appear that such a microbial mixture could be effectively applied to the biological treatment of wastewater containing TCE with or without an inducer.
The objective of this study was to select yogurt starter from Korean traditional fermented foods. The 2 strains (KM24, KM32) among 50 strains of isolated lactic acid bacteria selected as starter based on milk clotting ability, antimicrobial activity against various pathogens, tolerance in artificial gastric and bile juice and growth in 10 % skimmed milk. The strains were identified as Lacobacillus plantarum (KM32) and Pediococcus pentosacesus (KM24) by 16S rRNA gene sequencing. Viable cell number of yogurt fermented with mixed strains (KM24 and KM32) was 9.66 log CFU/mL after fermentation for 48 h and maintained $10^9CFU/mL$ during fermentation for 72 h at $37^{\circ}C$. The pH and titratable acidity of mixed cultured yogurt were 4.25% and 0.83% after fermentation for 48 h at $37^{\circ}C$, respectively. The physico-chemical characteristics of mixed cultured yogurt after fermentation for 48 h were $38.45{\mu}g/mL$ (polyphenol content), 48.57% (DPPH radical scavenging activity) and 465.40 cp (viscosity), respectively. The mixed cultured yogurt maintained $10^9CFU/mL$ of lactic acid bacteria during storage 10 days at $4^{\circ}C$. The viable cell number of yogurt prepared with mixed culture(KM32+KM24) maintained higher and than that of control (L. casei) during storage. These results indicated the potential use of selected strains (KM32+KM24) isolated from kimchi as a yogurt starter with strong acid tolerance and probiotics properties.
The purpose of this study was to investigate the degradation of PVA (polyvinyl alcohol) contained in dyeing wastewater by a mixed culture of Microbacterium barkeri KCCM 10507 and Paenibacillus amylolyticus KCCM 10508. Firstly, synthetic wastewater which contained different initial concentrations of PVA varying from 50 to 3,500 mg/l were tested to obtain optimal PVA biodegradation activity of isolated strains, and the above two strains were found to degrade PVA up to 90%, when the initial concentration of PVA was 750 mg/l and below. Next, dyeing wastewater was tested by a nixed culture of the two isolated strains, and 42% and 55% of the initial concentrations of PVA and COD, respectively, was removed after five days. MLSS was gradually increased from an initial 1,400 to 2,500 mg/l, and the pH was also increased from 5.1 to 7.8. Sterilized dyeing wastewater was tested to find the effect of strains only on the biodegradation of PVA, and PVA degradation ratio and COD removal ratio were 50% and 72.8%, respectively. Thus, the results indicated that these two strains have good ability to degrade PVA and remove COD in dyeing wastewater, Finally, it is expected that if these two strains were used in the dyeing wastewater treatment, good efficiency for PVA degradation and COD removal could be achieved.
This study was per-formed to screen lactic acid bacteria poultry for the probiotic use. Among the previously obtained acid tolerant, 139 strains, 111 strains were selected with MRS medium containing 0.3% oxgall. 34 strains of 111 was re-selected by Gram-staining and acid producing ability. These strains was identified by MIDI Sherlock Microbial Identification System. Among the identified 34 strains Lactobacillus fermenum YL-3 was selected for the final pro-biotic use because of the good growth and high survival rate at pH 2.0. 60%, 50% and 40% cells of Lactobacillus fermentum YL-3 survived at pH 3.0, 2.5 and 2.0, respectively. More than $10^{7}$ / CFU/ml survived when exposed with the number of $10^{8}$ CFU/ml at pH 2.0 after 12 hr. L.fermenum YL-3 maintained growth in MRS broth containing 0.3, 0.5, 1.0 and 2.0% oxgall for 24 hr. L.fermenum YL-3 showed an inhibitory effect against pathogenic strains of Sal. enteritidis and E. coli O157:H7. In mixed culture with L.fermenum YL-3 Sal. enteritidis lost ability com-pletely in 15 hrs and E. coil O157:H7 in 16 hrs.
Objective: This study aimed to develop and evaluate the effectiveness of a water-soluble microencapsulation method for probiotic strains using gum Arabic (GA) and skim milk (SKM) over a three-month storage period following processing. Methods: Four strains of Pediococcus acidilactici (BYF26, BYF20, BF9, and BF14) that were typical lactic acid bacteria (LAB) isolated from the chicken gut were mixed with different ratios of GA and SKM as coating agents before spray drying at an inlet temperature 140℃. After processing, the survivability and probiotic qualities of the strains were assessed from two weeks to three months of storage at varied temperatures, and de-encapsulation was performed to confirm the soluble properties. Finally, the antibacterial activity of the probiotics was assessed under simulated gastrointestinal conditions. Results: As shown by scanning electron microscopy, spray-drying produced a spherical, white-yellow powder. The encapsulation efficacy (percent) was greatest for a coating containing a combination of 30% gum Arabic: 30% skim milk (w/v) (GA:SKM30) compared to lower concentrations of the two ingredients (p<0.05). Coating with GA:SKM30 (w/v) significantly enhanced (p<0.05) BYF26 survival under simulated gastrointestinal conditions (pH 2.5 to 3) and maintained higher survival rates compared to non-encapsulated cells under an artificial intestinal juices condition of pH 6. De-encapsulation tests indicated that the encapsulated powder dissolved in water while keeping viable cell counts within the effective range of 106 for 6 hours. In addition, following three months storage at 4℃, microencapsulation of BYF26 in GA:SKM30 maintained both the number of viable cells (p<0.05) and the preparation's antibacterial efficacy against pathogenic bacteria, specifically strains of Salmonella. Conclusion: Our prototype water-soluble probiotic microencapsulation GA:SKM30 effectively maintains LAB characteristics and survival rates, demonstrating its potential for use in preserving probiotic strains that can be used in chickens and potentially in other livestock.
As a series of fundamental research projects to produce doenjang (Korean fermented soy paste) of better quality, two kinds of doenjang were manufactured from a traditional meju (Korean soy bean koji) and the mixed with Aspergillus oryzae and Bacillus natto, and histological changes in the cell structures of soy bean of the two were reported doenjang samples were observed and compared during the entire period of fermentation processes. Cell walls of the soy bean were ruptured by pressure and heat during the pressure cooking process and some of them were observed to have the ghost-like shapes. Remarkable differences in the plasmolysis of the cytoplasms were observed between the seed coat and the inner part of soy bean. Small vacuoles resulting from the fusion of the glycoprotein globules by protease and from the hydrolysis of the starch granules by amylase were also observed. Penetration of microorganisms was transferred from the seed coat to the inside of soy bean as the fermentation proceeded. Slimy substances were observed on the seed coat and the parenchyma cells of soy bean fermented with the mixed with Aspergillus oryzae and Bacillus natto. Cell walls of soy bean became difficult to stain and they showed unusual, polygonal shapes as the fermentation proceeded. Samples fermented with the mixed with Aspergillus oryzae and Bacillus natto showed more remarkable tendencies than traditional meju.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.42
no.8
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pp.1175-1182
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2013
The purpose of this study was to evaluate the functional characteristics of fermented mixed grain beverages obtained using different microbial species and to evaluate their suitability for consumption. Various fermented mixed grain beverages were prepared through fermentation with Aspergillus (A.) oryzae CF1003 (A), A. acidus KACC46420 (B), Rhizopus (R.) delemar KACC46149 (C), R. oryzae KACC45714 (D), R. oryzae KACC46148 (E), A-E mixed strains (F), A. oryzae CF1001 (G), A. acidus CF1005 (H) and A+H mixed strains (I). The visual appearance, flavor, taste, and the antioxidant capacity of each fermented beverage were then assessed. The chromaticity and aesthetic quality of the fermented beverage was measured and all fermented beverages appeared yellow. The C-, G-, H- and I-fermented beverages received scores of 3.319, 3.206, 3.170 and 3.025 points, respectively, following a sensory evaluation, while the others received less than 3 points. The polyphenol content of the different beverages were similar, while the flavonoid content significantly differed. In particular, the flavonoid content of the C- and E-fermented beverages was significantly higher than other beverages. Although the electron donating ability and reducing power of the fermented beverages was very low, the superoxide dismutase (SOD)-like activity of all beverages (except the E-fermented beverage) increased in a concentration-dependent manner. Specifically, the SOD-like activity from the F-fermented beverage at 10,000 ppm was more than 50%. Interestingly, the antioxidant activities of the beverages were unrelated to their polyphenol or flavonoid levels. This study also found that the aesthetic qualities of G- and H-fermented beverages were the highest and that this was completely independent of their antioxidant capacity. Therefore, our results suggest that further studies are required to develop mixed grain-derived fermented beverages that can also fulfill a useful functional purpose.
The influences of mixed strain mode of bending-tension on the critical current. Ic in externally reinforced Bi-2223 tapes and their interaction were investigated in this study. A test fixture which providing a mixed deformation mode of bending-tension to HTS tapes has been newly devised. When the total strain induced in the tape in the mixed strain mode was expressed by the superposition of the bending and tensile strains the irreversible strain for the critical current degradation of Bi-2223 tapes increased, as compared with the simple bending mode case. The $I_c$ degradation at the region exceeding the irreversible strain showed a medium between the simple bending case and the simple tension case. As the initial bending strain imparted increased , namely as the diameter of mandrel adopted decreased. the apparent irreversible strain in Bi-2223 tapes increased . but the increment became smaller As a result. it can be found that the tension to be applied to bent Bi-2223 tapes during cabling should be smaller. as the mandrel diameter becomes smaller.
Experiments were carried out to find the possibility of an economic production of single cell protein(SCP) in mixed culture by Cellulomonas sp. KL-6 and a second organism. The second organism, strain LI-10, was isolated from the large intestines of a mouse. 1. When these strains were mixed, cell growth and carboxymethyl cellulase (CMCase) activity were increased to about 63% and 161%, respectively compared with that of single culture of strain KL-6. We found the mixed culture as a proper method of degradation of cellulose in our study. 2. Strain LI-10 was identified as E. coli. 3. This strain produced trace amounts of cellobiose, but glucose was not found in detectable amounts in the filter paper(FP) medium. 4. $CaCO_3$ injected in the medium at the ratio of 0.1% not only enhanced cell growth but also was effective as an acid neutralizing agent. 5. When this organism was cultured under the optimal medium (glucose 0.1%, $NH_4Cl$ 0.1%, yeast extract 2.0%, $KH_2PO_4$ 0.1%, KCl 0.05%, pH 7.2 and a temperature 30$\circ$C) for 5 days, a cell mass produced 1.18 g/l. The results showed the increase of cell mass up to 300% compared to 0.28 g/l produced in CMC medium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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