Biochemical consequence of the accumulation in cells of superoxide $(O^{-}_{2})$ which was proposed to be probably a common chemical factor in the secondary process of the mechanism of chilling injury as well as in the visible light photodamage in cells of higher plants, has been investigated in the present work. Especially focused was the destructive effect of $O^{-}_{2}$ on the biochemical activity of mitochondria, as informations which support the suggestion that mitochondrial inner membrane is the major site of $O^{-}_{2}$ production have been collected. Mitochondria and submitochondrial particles (SMP) were prepared from soybean hypocotyls for this case study. When SMP were treated with the electrolytically produced $O^{-}_{2}$ they suffered not only inhibition of the membrane-bound enzymes as demonstrated by cytochrome c oxidase, but also lipid peroxidation of membrane as proved by malondialdehyde production. Malate dehydrogenase present in the protein extract from mitochondrial matrix was also inhibited by the $O^{-}_{2}$ treatment. These results exhibited the chaotic effect of the overproduction and accumulation of $O^{-}_{2}$ in cells under a certain abnormal circumstance such as environmental stress on the physiological function of mitochondrial; disruption of the cellular metabolic pathways and the structural integrity of membrane.
Genetic variants of Hanwoo mtDNA in the region of cytochrome oxidase subunit I, II and III complex were detected using restriction enzymes. PCR primers were designed based on the bovine mtDNA sequence, and 6 primer sets (Mt4, Mt5, Mt6, Mt7, Mt8 and Mt9) were used. A total of 20 restriction enzymes were used, and 6 restriction enzymes, which were Hinf I, Pvu II, Rsa I, Eco RI, Bgl II, and Msp I, showed genetic polymorphisms. Significant associations between genetic variants and weight traits were observed at WT15 (p<0.05) and WT18 (p<0.01) with Pvu II for Mt9, Bgl II for Mt6 and Rsa I for Mt8 segments in the region of cytochrome oxidase subunit complex. Significant associations were also observed at Mt9-Pvu II and Mt6-Bgl II segments for WT9 (p=0.01), WT12 (p=0.02), respectively. These results suggest that genetic variants of mtDNA in the region of cytochrome oxidase subunit complex may be candidate segments for improvement of animal growth as weight traits.
Jang, Sun Hee;Yoon, Hyun Min;Kim, Bum Hoi;Jang, Kyung Jeon;Kim, Cheol Hong
Journal of Acupuncture Research
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v.32
no.1
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pp.13-22
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2015
Objectives : Alcohol-related liver disease is a major cause of morbidity and mortality worldwide. The present study was undertaken to determine whether Ganoderma lucidum pharmacopuncture(GLP) could protect against chronic liver injury induced by ethanol intoxication in rats. Methods : Sprague-Dawley rats were divided into 4 groups: normal, control, normal saline pharmacopuncture(NP), and GLP, with 8 animals in each. Each group, except normal, received ethanol orally. The NP and GLP groups were treated daily with NP and GLP respectively. The control group was not treated. All rats except the normal group were intoxicated for 4 weeks by oral administration of EtOH(6 g/kg BW). Two acupuncture points were used: Qimen($LR_{14}$) and Taechung($LR_3$). Body weight, histopathological analysis, liver function, activities of antioxidant enzymes, and immunohistochemistry were assessed. Results : GLP reduced the histological changes due to chronic liver injury induced by EtOH and significantly reduced the increase in the alanine aminotransferase(ALT) and aspartate aminotransferase(AST) enzymes. It significantly reversed the superoxide dismutase(SOD) and the catalase activities(CAT). It also significantly decreased BAX and increased Bcl-2 immunoreactivity expression. Conclusions : This study showed the protective efficacy of GLP against EtOH-induced chronic liver injury in SD rats by modulating ethanol metabolizing enzymes activity, attenuating oxidative stress, and inhibiting mitochondrial damage-mediated apoptosis.
Some of the edible plants like apricot kernel, flaxseed, and cassava generate hydrogen cyanide (HCN) when cyanogenic glycosides are hydrolyzed. Rhodanese (thiosulfate: cyanide sulfurtransferases of TSTs; EC: 2.8.1.1) is a sulfide-detoxifying enzymes that converts cyanides into thiocyanate and sulfite. This enzyme exists in a liver and kidneys in abundance. The present study is to evaluate the conversion of apricot cyanogenic glycosides into thiocyanate by human hepatic (HepG2) and colonal (HT-29) cells, and the induction of the enzymes in the rat. The effects of short term exposure of amygdalin to rats have also been investigated. Cytosolic, mitochondrial, and microsomal fractions from HepG2 and HT-29 cells and normal male Spraque-Dawley rats were used. When apricot kernel extract was used as substrate, the rhodanese activity in liver cells was higher than the activity in colon cells, both from established human cell line or animal tissue. The cytosolic fractions showed the highest rhodanese activity in all of the cells, exhibiting two to three times that of microsomal fractions. Moreover, the cell homogenates could metabolize apricot extract to thiocyanate suggesting cellular hydrolysis of cyanogenic glycoside to cyanide ion, followed by a sulfur transfer to thiocyanate. After the consumption of amygdalin for 14 days, growth of rats began to decrease relative to that of the control group though a significant change in thyroid has not been observed. The resulting data support the conversion to thiocyanate, which relate to the thyroid dysfunction caused by the chronic dietary intake of cyanide. Because Korean eats a lot of Brassicaceae vegetables such as Chinese cabbage and radish, the results of this study might indicate the involvement of rhodanese in prolonged exposure of cyanogenic glycosides.
Changes of thiol methyltransferase (TMT) activity in cholestatic rat liver were studied. Hepatic subcellular and serum TMT activities were determined in cholestatic rat induced by common bile duct (CBD) ligation over a period 28 days. The mitochondrial and microsomal TMT activities in cholestatic rat liver were found to be significantly increased between the 1st and the 28th day after CBD ligation. The TMT activity in serum was significantly increased throughout the experiments. The Vmax values of the above hepatic TMT in cholestatic rat were significantly increased at the 7th day after CBD ligation. However, the Km values of the above hepatic enzymes did not vary in all the experimental groups. Therefore, the results indicate that the biosynthesis of TMT was increased in cholestatic rat liver. The elevated serum TMT activity is most likely caused by increased hepatocytes membrane permeability due to cholestasis mediated liver cell necrosis.
The possible mechanisms of increased aryl sulfotransferase (AST) isozymes activities in cholestatic rat liver were studied. Hepatic AST-I, II and -III, IV activities were determined from the experimental rats with common bile duct ligation (CBDL). The Michaelis-Menten constants in these hepatic enzymes were also measured. The activities of mitochondrial AST-I, II and -III, IV, and microsomal AST-III, IV as well as their Vmax values were found to be increased significantly in CBDL plus taurocholic acid (TCA) injected group than in the control group, such as CBDL alone groups. However, their Km values in the experimental groups did not vary. The results suggest that TCA stimulates biosynthesis of the AST in the liver.
The possible mechanisms of decreased monoamine oxidase (MAO) A and B activities in cholestatic rat liver were studied. Hepatic and serum MAG activities were determined from the experimental rats with common bile duct ligation (CBDL). The Michaelis-Menten constants in these hepatic enzymes were also measured. The activities of mitochondrial MAO A and B, and mircosomal MAO B as well as their Vmax values were found to be decreased significantly in CBDL plus taurocholic acid (TCA) injected group than in the control group, such as CBDL alone groups. However, their Km values in the experimental groups did not vary. Serum MAO activity increased significantly in the CBDL plus TCA injected group than in the control group. The above results suggest that TCA represses biosynthesis of the MAO in the liver. The elevated activity of the serum MAO is believed to be caused by the increment of membrane permeability ofhepatocytes upon TCA mediated liver cell necrosis.
We previously reported that caffeic acid isolated from Lonicera japonica showed potent neuroprotective activities against glutamate injured neuronal cell death in primary cortical cells. In this study, we tried to confirm the neuroprotective activity in glutamate injured HT22 cells and elucidate mechanisms of neuroprotective action of caffeic acid. We used glutamate induced HT22 cell death as a bioassay system. The compound decreased reactive oxygen species increased by high concentration of glutamate treatment in HT22 cells. Also, Ca2+ concentration was decreased by this compound. This compound made mitochondrial membrane potential maintain to normal condition. This also affected anti-oxidative enzymes and glutathione contents. Treatment of this compound increased not only glutathione reductase and peroxidase to the control level and also amount of glutathione, an endogeneous antioxidant. These experimental results showed that caffeic acid isolated from L. japonica exerted potent neuroprotective activity through the anti-oxidative pathway.
To infer phylogenetic relationships between species of Trichaptum (Polyporaceae), RFLP analyses of PCR-amplified DNAs were accomplished. Regions coding for ITSs of nuclear SSU rRNA genes and for mitochondrial SSU rRNA genes from thirteen strains of four Trichaptum species (T. abietinum, T. biforme, T. fusco-violaceum, and T. laricinum) were amplified and digested with eight restriction enzymes. All the fragmentation patterns were characterized and coded as 0/1 for the absence/presence of fragments. A phylogenetic tree based on the combined data sets was constructed using the Dollo parsimony method. While every two strains of T. abietinum, T. biforme, T. fusco-violaceum, and T. laricinum formed an independent group, the other strains of T. abietimum and T. fusco-violaceum made mixed groupings among compared strains. It is inferred that T. abietinum and T. fusco-violaceum have more variations, possibly geographic or physiological ones, than other species in the genus.
Effects of panaxydol, panaxynol and panaxytriol isolated from Panax ginseng C.A. Meyer on some enzyme activities were determined. Activities of ATPase, membrane-bound enzyme from Sarcoma 180 and rat liver were slightly inhibited by panaxydol. Activities of 5'-nucleotidase, membrane-bound enzyme and succinate cytochrome c reductase in mitochonidria from sarcoma 180 and rat livers were significantly inhibited in a dose-dependent manner by panaxynol. The inhibitory effects of panaxydol and panaxynol on succinate cytochrome c reductase activities were more potent than those on 5'-nucleotidase activities and panaxynol was found to be a very potent inhibitor of succinate cytochrome c reductase. Activities of glucose-6-phosphatase in endoplasmic reticulum from Sarcoma 180 and rat livers were not affected by all three polyacetylenes. These results suggested that the inhibitory effects of panaxydol and panaxynol on enzyme activities might contribute to their biological activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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