The aceB gene, encoding for malate synthase, one of the key enzymes of glyoxylate bypass, was isolated from a pMT1-based Corynebacterium glutamicum gene library via complementation of an Escherichia coli aceB mutant on an acetate minimal medium. The aceB gene was closely linked to aceA, separated by 598 base pairs, and transcribed in divergent direction. The aceB expressed a protein product of Mr 83, 000 in Corynebacterium glutamicum which was unusually large compared with those of other malate synthases. A DNA-sequence analysis of the cloned DNA identified an open-reading frame of 2, 217 base pairs which encodes a protein with the molecular weight of 82, 311 comprising 739 aminoo acids. The putative protein product showed only limited amino acid-sequence homology to its counteliparts in other organisms. The N-terminal region of the protein, which shows no apparent homology with the known sequences of other malate synthases, appeared to be responsible for the protein s unusually large size. A potential calciumbinding domain of EF-hand structure found among eukaryotes was detected in the N-terminal region of the deduced protein.
Vinclozolin, an endocrine disrupting chemical, is a chlorinated fungicide widely used to control fungal diseases. However, its metabolite 3,5-dichloroaniline is more toxic and persistent than the parent vinclozolin. For the biodegradation of vinclozolin, vinclozolin- and/or 3,5-dichloroaniline-degrading bacteria were isolated from pesticide-polluted agriculture soil. Among the isolated bacteria, a Rhodococcus sp. was identified from a 16S rDNA sequence analysis and named Rhodococcus sp. T1-1. The degradation ratios for vinclozolin or 3,5-dichloroaniline in a minimal medium containing vinclozolin $(200{\mu}ml)$ or 3,5-dichloroaniline $(120{\mu}g/ml)$ were 90% and 84.1%, respectively. Moreover, Rhodococcus sp. T1-1 also showed an effective capability to biodegrade dichloroaniline isomers on enrichment cultures in which they were contained. Therefore, these results suggest that Rhodococcus sp. T1-1 can bioremediate vinclozolin as well as 3,5-dichloroaniline.
A bacterial strain which formed a distinct colony on agar plate containing naphthalene as a vapor phase and grew well ina liquid minimal medium was isolated and identified as Alcaligenes sp. A111. Optimum temperature and pH for the cultivation of Alcaligenes sp. A111 were 30$\cir$C and 7.0, respectively. Cell growth increased dramatically from 12 hours after inoculation and revealed a stationary phase at about 48 hours. Relative growth rate ($\mu$')increased hyperbolically depending on the conceration of naphthalene up to 500 ppm and reached to the maximum value pf 2.8/day, but $\mu$' didn't change within a range of 500~4000 ppm naphthalene. NH$_{4}$Cl or NH$_{4}$NO$_{3}$ was preferrd as a nitrogen source and a P : N ratio by weight og 6 : 1 was favorable to cell growth. Alcaligenes sp. A111 utilized the intermediates of degradation of naphthalene and showed tolerance to benzene, toluene, and octane. therefore, it is suggested that Alcaligenes sp. A111 could be effectively used for the biological treatment of wastewater containing naphthalene in the presence of some aromatic compounds.
The tissue blot immunobinding assay (TBIA) is widely used for the detection and localization of plant viruses in various plant tissues. The basic experimental procedures of TBIA sampling and blotting were simplified using commercially available micropipette tips. This method was termed the ring-blot immunobinding assay (R-BIA), as the blot on the membrane forms a ring shape. The detection efficacy of R-BIA was tested for two chili pepper viruses, pepper mild mottle tobamovirus (PMMoV) and pepper mottle potyvirus (PepMoV), following the optimized serological procedures of TBIA (length of the incubation period and BSA concentration, and primary and secondary antibodies). Sensitivity of the R-BIA was about 1 ng/ml of purified PMMoV in pepper leaf sap from a healthy pepper plant. R-BIA also showed high specificity in the detection of PMMoV and PepMoV. Moreover, the modified sampling and blotting procedures were simpler and more reliable than other TBIA methods (such as whole-leaf blotting and crushed-leaf blotting), suggesting that the R-BIA may be used for medium- to large-scale detection of plant viruses in laboratories with minimal facilities.
This study was undertaken with the intent to describe the influence of water temperature and food concentration on the filtration rates of the Asiatic clam, Corbicula fluminea. The clams were collected at Lake Geumho near Yeongsan river, during March 2001. Food organism, Scenedesmus sp. (KMCC FC-34), was indoor-cultured in f/2 medium, and was used to measure the filtration rate of the clams. Filtration rate of the clams was measured by indirect method. Cell concentrations of food organisms were determined by direct counting cells using the hemacytometer under the light microscope. The filtration rate of the clams increased with water temperature up to circa $25^{\circ}C$. Above this temperature, the filtration rate decreased rapidly. The minimal filtration rate of the clams was recorded at $5^{\circ}C$. Thermal coefficient, $Q_10$ values at low temperature range were much higher than those at high temperature range. These results indicate the asiatic clam is more sensitive in cold water like most of marine bivalves. There was a strong reversed correlation between filtration rate and food concentration. Filtration rate of the clams was reduced as food concentration was increased.
본 연구에서 분리된 phenanthrene 분해균주의 대부분이 소수성을 나타내었고, 미생물계면활성제를 생산하면서 분해하는 균주보다 phenanthrene 분해능이 높았다. 균주 H6의 경우 phenanthrene 분해시 생산되는 미생물계면활성제는 포도당을 분해할 때도 생산되면 미생물의 성장과 더불어 증가하다가 stationary phase에서 일정하게 유지되었다. H6는 Bacillus subtilis로서 분리된 미생물계면활성제는 lipopeptide이었으며 H6에서 추출한 미생물계면활성제는 pH 2 이하에서 거의 회수되었고, 분산력이 Tween 80이나 Brij 30 등 화학계면활성제보다 높았고 열에 강한 특성을 보였다.
The Escherichia coli mixed-function serC-aroA operon encodes biosynthethic enzymes for unrelated pathways leading to the syntheses of serine and aromatic amino acids. It has been proposed that the operon is expressed in a cAMP-dependent manner. In this work experiments were performed to investigate the cAMP-dependent expression of the operon. Exogenous cAMP increased ${\beta}$-galactosidase synthesis in the $cya^+$ and cya strains harboring the serC-aroA-lac fusion plasmid. This enhancement was more dramatic in the $cya^-$ strain grown in a minimal medium. In a dot blot assay the serC-aroA mRNA content increased in a concentration-dependent pattern after the addition of exogenous cAMP. The activity of phosphoserine aminotransferase, encoded by the serC gene, apparently increased in E. coli cells after the addition of cAMP. All results obtained confirmed that the expression of the E. coli serC-aroA operon is positively regulated by cAMP at the level of transcription.
Kim, Woan-Sub;Kim, Pyeung-Hyeun;Shimazaki, Kei-ichi
한국축산식품학회지
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제36권4호
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pp.487-493
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2016
The antimicrobial activity of bovine lactoferrin hydrolysates (bLFH) was measured against Pseudomonas strains (P. syringae and P. fluorescens) in vitro. To compare susceptibility to bLFH, minimal inhibitory concentration (MIC) values were determined using chemiluminescence assays and paper disc plate assays. Antimicrobial effect against P. fluorescens was not observed by either assay, suggesting that bLFH did not exhibit antimicrobial activity against P. fluorescens. However, a significant inhibition of P. syringae growth was observed in the presence of bLFH. The addition of bLFH in liquid or solid medium inhibited growth of P. syringae in a dose-dependent manner. Furthermore, a bLFH peptide with antimicrobial activity toward P. syringae was isolated and identified. The N-terminal amino acid sequences of thus obtained antimicrobial bLFH peptides were analyzed by a protein sequencer and were found to be Leu-Arg-Ile-Pro-Ser-Lys-Val-Asp-Ser-Ala and Phe-Lys-Cys-Arg-Arg-Trp-Gln-Trp-Arg-Met. The latter peptide sequence is known to be characteristic of lactoferricin. Therefore, in the present study, we identified a new antimicrobial peptide against P. syringae, present within the N-terminus and possessing the amino acid sequence of Leu-Arg-Ile-Pro-Ser-Lys-Val-Asp-Ser-Ala.
Rusty root of ginseng has been known as one of the limiting factors in ginseng production in Korea. An attempt was, therefore, made to elucidate biological and chemical natures of the rusty root, and the redox Potential of the ginseng cultivated soils were measured and compared with diseased and non-diseased soils. Reddish discoloration was most frequently observed on the epidermis of ginseng root and the pigments were accumulated in all epidermal cells of the diseased lesions. The lower the redox potential of the ginseng cultivated soil was, the more severe the rusty root was observed. Fe content in the diseased epidermis was 3 times higher than that of healthy one. Organic acids such as oxalic, malonic, succinic, and citric acids were also higher in the mss root than in the healthy one. Thin layer chromatogram of phenolic acid fractions obtained from the epidermal cells of the rusty root of ginseng exhibited 3 to 4 unidentified substances not found in the healthy root. Also lignification of the epidermal cells and the activity of phenylalanine ammonia lyase were greater in the rusty root than the healthy root. Colony formation and conidia production of F. solani, And mycelial growth and sclerotium formation of Sclerotinia sp. isolated from ginseng root were suppressed in a nutritionally minimal medium supplemented with water extract of rusty ginseng root epidermis. It is, therefore, suggested that rusty root of ginseng is caused by unfavorable rhizosphere environmental stress or stresses resulting abnormal metabolism in the root as a selfdefence mechanism of non-specific resistance responses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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