When S. fradiae was cultured in S medium, it stavted to produce neomycin in the middle of stationary phase of growth. Antibitoic production is regulated not only by glucose but also by metabolites formed from glucose. A chemically defined minimal salt broth was developen for the study of metabolites activating produition of antibiotic in a neomycin producer. When growth and production or antibiotic in minimal salt broth was examined with a full grown or a vefctativc mycelium, the medium was found not to be good for the growth, but to be good enough for the production of antibiotic with a full grown mycelium. When many carbotlydrates, organic acids, or alcohol were supplmented with instead of glucose in the medium suspcndcn with a full grown mycelium, the amount of antibiotic produced in the medium containing fumaratc was 5 times more than that in the medium with glucose. Further study indicated that the medium is not good also for the growth but good for the production of antibiotic. The antibiotic produced in this medium was identified to be neomycin. The activation of the production of neomycin by fumarate was further confirmed in a complex medium. Fuinarate is suspected to initiate and to activate the biosynthesis of neomycin at the gene level.
Ko, Hyun-Sun;Tindwa, Hamisi;Jin, Rong De;Lee, Yong-Seong;Hong, Seong-Hyun;Hyun, Hae-Nam;Nam, Yi;Kim, Kil-Yong
한국토양비료학회지
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제44권4호
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pp.650-656
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2011
Lysobacter antibioticus HS124 isolated from pepper rhizosphere soil produced catechol type siderophore. Purified siderophore by Diaion HP-20 and silica gel column chromatography showed several hydroxyl functional groups adjacent to benzene rings by analysis of $^1H$ NMR spectroscopy. The strain HS124 showed different activities to suppress Phytophthora capsici with different concentrations of exogenous Fe (III) in minimal medium where antifungal activity with $100{\mu}M$ Fe (III) was approximately 1.5 times higher than in absence of Fe (III). Bacterial population in this Fe (III)-amended medium was also highest with $8.9{\times}10^8\;CFU\;ml^{-1}$ which also corresponded to the strongest siderophore activity. When grown in rich medium (minimal medium with N, $P_2O_5K_2O$ and glucose), HS124 exhibited approximately 2 times stronger antifungal activity compared to minimal medium. In pot trials, treatments of bacterial culture grown in rich medium with (C1) or without (C2) $100{\mu}M$ Fe (III) exhibited a high protection of pepper plants from disease, compared to medium only with (M1) or without (M2) $100{\mu}M$ Fe (III). Especially, treatment C1 showed the best disease control effect of about 70 %. Thus, the strain HS124 should be recommended as a potential biocontrol agent against P. capsici in pepper.
From 5 forest soil samples, the isolation frequency of oligotrophic Actinomycetes was investigated with nutrient and minimal media. The frequency of soil Actinomycetes by the minimal media. The frequency of soil Actinomycetes by the minimal media of DHV, WA, BA and NA was similar to the value by HV nutrient medium. In addition, different Actinomycetes were isolated from all the media used in this experiment and then their growth were tested on nutrient (Bennett's agar) and minimal media(WA). In consequent, the number of different Actinomycetes from minimal media was 26.1 strains, whereas the number of from nutrient medium (HV) was 26.6 strains. Furthermore, the percentage of facultative and obligate strains among the oligotrophic Actinomycetes was 90% and 10%, respectively.
A synthetic defined medium, fortified with amino acids, was developed for the stable production of the kringle fragments of human apolipoprotein(a) (apo(a)), rhLK68. Using a complex rich medium containing yeast extract and a high-cell-density fed-batch culture, the expression level of rhLK68 reached 17% of the total cellular protein, which corresponded to $5\;g\;l^{-1}$ of the culture. To replace the complex media with chemically defined media, several amino acids that positively affect cell growth and gene expression were chosen by a statistical method. The various combinations of the selected amino acids were tested for its fortifying effect on a minimal defined medium. When glutamine only was added, the overall expression level of rhLK68 reached 93% of the complex rich medium increasing the specific expression level by 22.4% and decreasing the cell growth by 24%. Moreover, the addition of glutamine resulted in a 2-fold increase in the concentration of rhLK68 in the culture broth, compared with the minimal defined medium. The synthetic defined media developed in this study could be generally applied to high-cell-density cultures of the recombinant Escherichia coli BL21(DE3), especially for the production of therapeutic proteins that require a strict quality control of the culture media and fermentation processes.
Nuclei were isolated from the protoplasts of Trichoderma harzianum T95 and treated with colchicine, a polyploid inducer. The nuclei were transferred into the protoplast of multi-auxotrophic Gliocladium virens G88 which cannot grow in minimal medium. The protoplast of G. virens G88 carrying the transferred nuclei were regenerated in a regeneration minimal medium containing $17{\mu}g/ml$ of chloroneb as a haploid inducer. Six intergeneric hybrids between G. virens and T. harzianum were isolated from the regeneration minimal medium. The hybrids could be classified into three types according to morphology, those with an isozyme pattern, those with an protein band and those with an randomly amplified polymorphic DNA(RAPD) pattern produced by random primers and repetitive sequences. The first group was identified to be a haploid recombinant, the second group a heterokaryon, and the third appeared to be petite.
Four chitinase producing bacteria, Arthrobacter nicotinae CH4, Arthrobacter nicotinae CHI3, Arthrobacter sp. CH5 and Micrococcus sp. CH3, were isolated from small crabs and shrimps. We investigated the optimum medium condition for the production of enzyme and high cell mass. The preferable medium composition was as follows: colchitin 0.1 %(w/v), glycerol 0.25%(w/v) and yeast extract 0.05%(w/v) in minimal midium ($K_{2}HPO_{4}$ 0.7 g/l, $KH_{2}PO_{4}$ 0.3 g/l, $MgSO_{4}{\cdot}5H_{2}O$ 0.5 g/l, $FeSO_{4}}{\cdot}7H_{2}O$ 0.01 g/l, $ZnSO_{4}$ 0.001 g/l, $MnCI_2$ 0.001 g/l, pH 7.0). This cell culture medium could be used directly as sample for measuring chitinase activity. Because it hardly conreducing sugar such as glucose (blank value=0), the detected reducing sugar can be considered as a chitinase reaction product. The results can be used for easy preparation method for determination of enzyme activity and analysis of enzyme-substrate reaction in step of screening of chitinase producing bacteria.
Lee, Min Ju;Chun, Se-Jin;Kim, Hye-Jung;Kwon, An Sung;Jun, Soo Youn;Kang, Sang Hyeon;Kim, Pil
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권12호
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pp.1653-1658
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2012
We have reported previously that a recombinant Escherichia coli co-expresses aminolevulinic acid (ALA) synthase, an NADP-dependent malic enzyme, and a dicarboxylate transporter-produced heme, an iron-chelated porphyrin, in a succinate-containing complex medium. To develop an industrially plausible process, a chemically defined medium was formulated based on M9 minimal medium. Heme synthesis was enhanced by adding sodium bicarbonate, which strengthened the C4 metabolism required for the precursor metabolite, although a pH change discouraged cell growth. Increasing the medium pH buffering capacity (100mM phosphate buffer) and adding sodium bicarbonate enabled the recombinant E. coli to produce heme at rates 60% greater than those in M9 minimal medium. Adding growth factors (1 mg/l thiamin, 0.01 mg/l biotin, 5 mg/l nicotinic acid, 1 mg/l pantothenic acid, and 1.4 mg/l cobalamin) also induced positive heme production effects at levels twice of heme production in M9-based medium. Porphyrin derivatives and heme were found in the chemically defined medium, and their presence was confirmed by liquid chromatography/mass spectroscopy (LC/MS). The formulated medium allowed for the production of $0.6{\mu}M$ heme, $29{\mu}M$ ALA, $0.07{\mu}M$ coproporphyrin I, $0.21{\mu}M$ coproporphyrin III, and $0.23{\mu}M$ uroporphyrin in a 3 L pH-controlled culture.
20 bacterial strains capable of growing on phenol minimal medium were isolated from soil and wastewater by the enrichment culture technique, and among them, one isolate which was the best in the cell growth was selected and identified as Bacillus sp. SH3 by its characteristics. Strain SH3 could grow with phenol as the sole carbon source up to 15 mM, but did not grow in minimal medium containing above 20 mM of phenol. The optimal conditions of temperature and initial pH for growth and phenol degradation were 30$^{\circ}$C and 7.5, respectively. This strain could grow on various aromatic compounds such as catechol, protocatechuic acid, gentisic acid, o-, m-, p-cresol, benzoic acid, p-hydroxybenzoic acid, anthranilic acid, phenyl acetate and pentachlorophenol, and the growth-limiting log P value of strain SH3 on organic solvents was 3.1. In batch culture, strain SH3 degraded 97% of 10 mM phenol in 48 hours. In continuous culture under the conditions of 20 mM of influent phenol concentration and 0.050 hr$^{-1}$ of dilution rate, the treatment rate of phenol was 94%.
Erwinia rhapontici causes soft-rot disease in a number of plants such as rhubarb, onion, hyacinth and garlic. Pectate lyase (Pel) depolymerizes pectin and other polygalacturonates, which is though to play a role in bacterial invasion of plants. Pel activity was not detected in E. rhapontici cultured in a minimal salts medium containing glycerol, polygalacturonate, or citrus pectin as a carbon source. However, when sterilized potato tuber and Chinese cabbage slices were added to minimal salts polygalacturonate (0.5%) medium, E. rhapontici produced pectate lyase enzyme. Also Pel activity was consistently detected from macerated potato tubers, Chinese cabbage leaves, lettuce leaves and celery petioles tissue. Pel in the extract of macerated Chinese cabbage caused by E. rhapontici strain 1, resulted in electrolyte loss, tissue maceration and cell death of potato tuber tissue. These results indicate that E. rhapontici produces pectate lyase only in the presence of non-diffusible plant components, and that this enzyme probably contributes to its pathogenicity.
26 bacterial strains capable of growing on Terephthalic acid (TPA) in minimal medium were isolated from soil and wastewater by selective enrichment culture, and among them, one isolate which was the best in the cell growth and TPA degradation was selected and identified as Pseudomonas sp. T-1 by its characteristics. Cell growth almost revealed a stationary phase at 24 hrs after cultivation. Cell growth dramatically increased in a minimal medium containing 0.1% of TPA as a sole carbon source and TPA was not detected any more at 80 hrs after cultivation. Therefore, it is suggested that Pseudomonas sp. T-1 could be effectively used for the biological treatment of wastewater containing TPA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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