• 생명과학회지
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• 제12권4호
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• pp.496-503
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• 2002

곤충에서 유래한 항균 펩티드, defensin을 항균활성이 있는 활성적인 형태로 분비하는 Pichia 균주를 개발하기 위한 일환으로서 MF$\alpha$1 prerpo sequence와 defensin 합성유전자를 pichia 발현 벡터에 재조합하여 형질전환하고 아미노산 histidine을 첨가하지 않은 최소 배지에서 형질전환체를 일차적으로 선별하였다. 선별한 형질전환체를 대상으로 항생제 G-418에 대한 내성과 M. luteus를 시험균으로 사용하여 생육환 저해를 통한 defensin의 세포 외 분비를 조사하여 4 균주를 선택하고 분석하였다. Southern hybridizaion을 통해 숙주의 염색체 DNA에 삽입한 defensin 유전자가 유지됨을 확인하였으며 전체 RNA를 분리하고 RT-PCR을 수행하여 defensin mRNA를 증폭하고 Southern hybridization을 실시한 결과 증폭된 밴드는 probe로 사용한 defensin 유전자에 의해 양성 신호가 나타났다. 배양시간에 따른 4 균주의 세포성장과 항균활성을 비교하기 위해 BMMY 배지에서 96시간 배양하였다. 세포성장은 모두 유사한 양상을 보였다. 세포성장은 48시간 동안 급격하게 증가한 후 그 이후로는 정지기에 도달되었다. 항균활성도 48시간까지 급격히 증가하였으며 항균활성이 가장 높은 형질전환체 균주 3는 72시간 배양 시 550 AU/$m\ell$을 나타내었다.

• Journal of Microbiology
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• 제37권3호
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• pp.128-135
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• 1999

Among oil-degrading microorganisms isolated from oil-polluted industrial areas, one yeast strain showed high degradation activity of aliphatic hydrocarbons. From the analyses of 18S rRNA sequences, fatty acid, coenzyme Q system, G+C content of DNA, and biochemical characteristics, the strain was identified as Yarrowia lipolytica 180. Y. lipolytica 180 degraded 94% of aliphatic hydrocarbons in minimal salts medium containing 0.2% (v/v) of Arabian light crude oil within 3 days at 25$^{\circ}C$. Optimal growth conditions for temperature, pH, NaCl concentration, and crude oil concentration were 30$^{\circ}C$, pH 5-7, 1%, and 2% (v/v), respectively. Y. lipolytica 180 reduced surface tension when cultured on hydrocarbon substrates (1%, v/v), and the measured values of the surface tension were in the range of 51 to 57 dynes/cm. Both the cell free culture broth and cell debris of Y. lipolytica 180 were capable of emulsifying 2% (v/v) crude oil by itself. They were also capable of degrading crude oil (2%). The strain showed a cell surface hydrophobicity higher than 90%, which did not require hydrocarbon substrates for its induction. These results suggest that Y. lipolytica has high oil-degrading activity through its high emulsifying activity and cell hydrophobicity, and further indicate that the cell surface is responsible for the metabolism of aliphatic hydrocarbons.

• 미생물학회지
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• 제47권3호
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• pp.225-230
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• 2011

유일 탄소원으로 palm kernel meal (PKM)과 밀기울을 함유한 최소배지에서 농후배양하여 작물 재배 토양으로부터 xylan과 locust bean gum (LBG)에 대한 분해활성이 있는 균을 분리하였다. 분리균 YB-1106의 16S rRNA 유전자 염기서열을 조사한 결과 Microbacterium arabinogalactanolyticum와 98% 유사도를 보였다. 분리균의 xylanase는 밀기울, oat spelt xylan, 미강 및 xylose와 같은 부가탄소원에 의해 생산성이 증가된 반면에 mannanase는 LBG와 PKM에 의해 생산성이 증가되었다. 특히 Xylanase는 밀기울 2%를 첨가한 배지, mannanase는 1% LBG를 첨가한 배지에서 각각 생산성이 가장 높았으며 모두 정지기에서 생산이 되었다. 분리균의 배양 상등액은 $50^{\circ}C$와 pH 6.0에서 mannanase의 최대활성을 보였으며, $50^{\circ}C$와 pH 6.5에서 xylanase의 최적반응 활성을 나타냈다. Mannanase에 의해 분해된 LBG와 xylanase에 의해 분해된 xylan으로부터 각각 분해산물로 올리고당이 관찰되었다.

• Natural Product Sciences
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• 제21권1호
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• pp.49-53
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• 2015

Eight isoflavonoid compounds were isolated from the EtOAc fraction of Maackia amurensis which had shown the highest anti-Helicobacter pylori activity among the fractions, using medium pressure liquid chromatography and recrystallization. Based on the spectroscopic data including $^1H$-NMR, $^{13}C$-NMR, HMBC and MS data, the chemical structures of the isolates were determined to be (-)-medicarpin (1), afromosin (2), formononetin (3), tectorigenin (4), prunetin (5), wistin (6), tectoridin (7) and ononin (8). Anti-H. pylori activity of each compound was evaluated with broth dilution assay. As a result, (-)-medicarpin (1), tectorigenin (4) and wistin (6) showed anti-H. pylori activity. (-)-Medicarpin (1) exhibited the most potent growth inhibitory activity against H. pylori with the minimal inhibitory concentration $(MIC)_{90}$ of $25{\mu}M$, and tectorigenin (4) with $MIC_{90}$ of $100{\mu}M$ ranked the second. This is the first study to show the anti-H. pylori activity of M. amurensis, and it is suggested that the stem bark of M. amurensis or the EtOAc fraction or the isolated compounds can be a new natural source for the treatment of H. pylori infection.

• 한국수산과학회지
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• 제53권3호
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• pp.443-450
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• 2020

No established method can be used to select effective antibiotics in antibiotic susceptibility tests for fish bacterial pathogens quickly and accurately. Here, we established the optimal conditions for determining the minimal inhibitory concentration (MIC) of major fish bacterial pathogens (Streptococcus spp., Edwardsiella tarda, Vibrio spp., Aeromonas spp., and Pseudomonas spp.) using the KRAQ1 and CAMPY2 panels. The MIC panel used 18 antibiotics of two types and we conducted experiments to establish the optimal culture medium and temperature for each species. The optimal conditions for incubating Streptococcus spp. were in cation-adjusted Mueller-Hinton broth with TES buffer (CAMHBT) at 28℃, using 5% lysed horse blood (LHB) as recommended by the Clinical Laboratory Standards Institute. For Vibrio spp., the optimal culture conditions were 28℃ in CAMHBT supplemented with 1% NaCl. The optimal conditions for culturing E. tarda, Aeromonas spp., and Pseudomonas spp. were in CAMHBT at 28℃.

• 미생물학회지
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• 제51권4호
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• pp.444-447
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• 2015

본 연구는 $SeO_2$의 메티실린-내성 S. aureus에 대한 항세균활성을 규명하고자 수행하였다. Disc diffusion method를 이용하여 $SeO_2$의 항세균 활성을 측정한 결과, 그람 양성 세균이 그람 음성 세균과 비교시 우수하였다. 사용한 그람 양성 세균 중 Streptococcus, Staphylococcs 속 세균이 Bacillus 속 간균과 비교시 더 우수하였다. 사용한 모든 MRSA에 항균활성이 나타났다. 항생제의 생육저지환을 측정한 결과, 사용한 모든 항생제에 대해 MRSA의 항균활성이 작게 나타났다. $200-500{\mu}g/disc$ 범위의 $SeO_2$ 적용시 S. aureus 및 S. aureus CCARM (MRSA)에 대한 생육저지환의 직경은 각각 20-32.7 mm 및 13.5-17.9 mm이었다. $SeO_2$의 MRSA에 대한 최소생육억제농도는 $40{\mu}g/ml$이었다. 액체배지에 0.5% 및 1%의 $SeO_2$를 첨가한 결과, MRSA의 생육이 억제 되었다. 본 $SeO_2$의 항균활성 실험 결과는 추후, $SeO_2$의 항균활성 기작의 규명, 병원성 세균 및 항생제-내성 미생물에 적용될 수 있다고 판단된다.

• 미생물학회지
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• 제53권3호
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• pp.193-199
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• 2017

This study was aimed to evaluate the antimicrobial activity of Penicillium purpurogenum ED76 on several clinically important microorganisms. The endophytic fungus P. purpurogenum ED76 was previously isolated from Swietenia macrophylla leaf. The antimicrobial efficacy of P. purpurogenum ED76 dichloromethane extract was determined via disc diffusion and broth microdilution assay. A kill curve study was conducted and the morphology of extract treated bacterial cells were viewed under scanning electron microscope. The dichloromethane extract showed significant inhibitory activity on 4 test bacteria and 2 test yeasts. The minimal inhibitory concentration of the extract ranged from 125 to $1,000{\mu}g/ml$, which indicates the different susceptibility levels of the test microorganisms to the fungal extract. The kill curve study has revealed a concentration-dependent inhibition for all test microorganisms. With the increase of the extract concentration, the microbial growth was significantly reduced. The scanning electron micrograph of dichloromethane extract-treated Staphylococcus aureus cells showed the total damage of the cells. The cell wall invagination of the bacterial cells also indicates the loss of cellular materials and metabolic activity. The gas chromatography mass spectrometry analysis of the extract also showed that the major compound was stigmasterol, which constitutes 45.30% of the total area. The dichloromethane extract of P. purpurogenum ED76 exhibited significant inhibitory activity on several clinically important bacteria and yeasts. The study proposed a possible mode of action that the extract cause significant damage to the morphology of S. aureus cells.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제6권1호
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• pp.6-9
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• 2001

Minimal inhibitory concentrations (MIC) and antimicrobial effects of glycerol monolaurate (monolaurin) and organic acids, either alone or in combination, against Escherichia coli O157:H7 in tryptic soy broth were determined. MIC values of monolaurin(ML), acetic (AA), citric (CA), lactic (LA) and hydrochloric acid (HCl) were 300$\mu\textrm{g}$/mL (0.03%), 1250$\mu\textrm{g}$/mL(0.125%), 5000$\mu\textrm{g}$/mL(0.5%), 2500$\mu\textrm{g}$/mL(0.25%) and 2500$\mu\textrm{g}$/mL(0.25), respectively. When 150$\mu\textrm{g}$/mL of ML was combined with 50$\mu\textrm{g}$/mL AA, 250$\mu\textrm{g}$/mL HCl and 125$\mu\textrm{g}$/mL LA, the combined agents did not increase the inhibitory effect of the most active single compound alone. This result indicates that there was little interaction between ML and A, HCl and LA. However, the combination of 150$\mu\textrm{g}$/mL ML and 250$\mu\textrm{g}$/mL CA synergistically inhibited growth of E. coli O157:H7. The present study showed that the nature of combined antimicrobial response against E. coli O157:H7 was complex, but this information would be useful for determining interaction that could compromise effectiveness in food systems.

• 미생물학회지
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• 제50권1호
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• pp.67-72
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• 2014

담배식물과 담배재배 토양으로부터 최소배지에 유일 탄소원으로 니코틴을 첨가한 배지(MB/N)를 이용하여 니코틴을 분해하는 새로운 균주의 분리를 시도하였다. 16S rRNA 유전자의 염기서열 분석과 표현형 시험 및 형태학적 시험으로 분리균주들은 Micrococcaceae 과의 Arthrobacter 속에 포함되는 균주로 판명되었다. NU15는 Arthrobacter nicotinovorans와 99.8%의 상동성을 보였고, NU11는 Arthrobacter equi와 98.2%의 상동성을 보여 신주일 가능성이 있었다. 두 균주 모두 양성의 간구균이며, catalase 양성, oxidase 음성이었다. 신주일 가능성이 있는 NU11균주의 니코틴 분해를 확인하기 위하여 MB/N 액체배지에서 배양하면서 니코틴 특이적으로 나타내는 260 nm에서의 흡광도가 감소를 측정한 결과, 니코틴이 균주에 의해 특이적으로 분해되는 것을 확인 할 수 있었으며, 분해균들은 니코틴 오염을 복원하는데 사용될 수 있을 것으로 생각된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제30권2호
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• pp.243-249
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• 2001

본 연구는 독성과 안정성의 문제가 없는 천연식품 보존제의 개발을 위하여 신걸나무 잎 추출물을 이용하여 천연보존제로서의 특성 및 간으성을 조사하였다. 신갈나무 잎 에탄올 추출물은 그람양성균에 대해서 $250\;\mu\textrm{g}/mL$, 그람음성균에 대해서는 $500\;\mu\textrm{g}/mL$ 농도에서 40시간 동안 식중독균의 증식을 억제하였다. 신갈나무 잎 추출물의 항균활성 물질은 pH와 열에 매우 안정하였다. 신갈나무 잎 에탄올 추출물과 합성보존제가 솔잎 음료, 당근 쥬스, 된장 및 막걸리의 보존성에 미치는 영향을 비교한 결과, 솔잎 음료 및 당근 쥬스의 경우 0.1% 첨가시 합성보존제와 유사한 미생물 생육억제 효과를 나타내었고, 된장은 추출물을 2~3% 첨가하였을 경우 7주까지는 미생물 중식이 억제되어 에틸알코올과 비슷한 보존효과를 보였다. 막걸리의 경우는 추출물 0.5% 이상 첨가시 합성보존제인 안식향산과 유사한 미생물 생육 억제효과를 나타내었다. 따라서 이와같은 결과로 미루어 보아 신갈나무 잎은 향후 천연보존제의 원료로서 사용할 수 있을 것으로 기대된다.