This experiment was designed to investigate the effect of the SSJHT hot water extract & ultra-fine Powder on Alzheimer's Disease Model Induced by ${\beta}A$. The effects of the SSJHT hot water extract on expression of IL-1RA, $IL-1{\beta}$$, IL-6, IL-10, $TNF-{\alpha}$, NOS-II, COX-2 mRNA and production of $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$ in BV2 microglial cell line treated by lipopolysacchaide(LPS). The effects of the SSJHT hot water extract & ultra-fine powder on (1) the behavior (2) expression of $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$, MDA, CD68, CD11b and AChE (3) and the infarction area of the hippocampus in Alzheimer's diseased mice induced with ${\beta}A$ were investigated. The SSJHT hot water extract suppressed the expression of $IL-1{\beta}$, IL-6 and $TNF-{\alpha}$, NOS-II, COX-2 mRNA and increased IL-1RA, IL-10 in BV2 microglia cell line treated with LPS. The SSJHT hot water extract suppressed the production of $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$ significantly in BV2 microglial cell line treated with LPS. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder a significant inhibitory effect on the memory deficit was shown for the mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$ in the Morris water maze experiment, which measured step-through latency. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder suppressed the expression of $TNF-{\alpha}$$, $L-1{\beta}$ protein significantly in the microglial cell of mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder reduced the MDA and suppressed the over-expression of CD68, CD11b in the mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder significantly decreased AChE activity in the serum of the mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$. The SSJHT hot water extract & ultra-fine powder reduced infarction area of hippocampus. and controlled the injury of brain tissue in the mice with Alzheimer's disease induced by ${\beta}A$. The results suggest that the SSJHT hot water extract & ultra-fine powder may be effective for treatment of Alzheimer's disease. Investigation into the clinical use of the SSJHT hot water extract & ultra-fine powder for Alzheimer's disease is suggested for future research.
임신 중 감염에 의한 산모의 면역 활성화는 조현병과 자폐 스펙트럼 장애를 포함한 신경 발달 질환의 위험을 증가시킨다. 여러 연구에서 poly (I:C) 또는 LPS를 사용하여 모체 면역 활성화 유도한 자손에서 비정상적인 행동과 뇌 발달을 관찰하였다. 또한 최근 뇌에 상주하며 면역 세포로 기능하는 미세아교세포가 MIA 유발 자손의 행동 이상과 뇌 발달에 중요한 역할을 한다는 것이 보고되고 있으나 아직 메커니즘은 명확하지 않다. 본 연구에서는 GPCR의 구성원인 GPR56의 미세아교세포 특이적 억제가 행동 이상과 뇌 발달을 유발하는지 여부를 조사하였다. 먼저, MIA 유도는 발달 중인 뇌의 미세아교세포 집단에 영향을 미치지 않으나, 미세아교세포를 분리하여 GRP56의 발현을 조사한 결과, MIA 유도 태아에서 성별에 관계 없이 E14.5와 E18.5 사이에서 GPR56 발현이 억제됨을 관찰하였다. 그리고 미세아교세포 특이적 GPR56 억제는 MIA 유도 자손에게서 나타나는 사교성 결손, 반복적인 행동 패턴 및 증가된 불안 수준과 같은 비정상적인 행동을 관찰하였다. 미세아교세포 GPR56 억제 마우스에서는 MIA 유도 자손과 같은 비정상적인 피질 발달이 관찰되지 않았지만, c-fos 염색을 통해 뇌 활동이 관찰되었다. 따라서 본 연구는 미세아교세포 특이적 GPR56 결핍이 이상 행동을 유발함을 시사하며, 추후 연구를 통해 MIA 자손의 행동 결손 진단 및/ 치료 표적을 위한 바이오마커로 활용될 수 있음을 시사한다.
In the present study, we examined whether Lactobacillus johnsonii CJLJ103 (LJ) could alleviate cholinergic memory impairment in mice. Oral administration of LJ alleviated scopolamine-induced memory impairment in passive avoidance and Y-maze tasks. Furthermore, LJ treatment increased scopolamine-suppressed BDNF expression and CREB phosphorylation in the hippocampi of the brain, as well as suppressed $TNF-{\alpha}$ expression and $NF-{\kappa}B$ activation. LJ also increased BDNF expression in corticosterone-stimulated SH-SY5Y cells and inhibited $NF-{\kappa}B$ activation in LPS-stimulated microglial BV2 cells. However, LJ did not inhibit acetylcholinesterase activity. These findings suggest that LJ, a member of human gut microbiota, may mitigate cholinergic memory impairment by increasing BDNF expression and inhibiting $NF-{\kappa}B$ activation.
본 연구에서는 국내에 자생하는 대나무 중 3종(왕대, 조릿대, 오죽)의 죽엽을 4종의 추출용매(물, 30% 주정, 70% 주정, 100% 주정)를 이용하여 추출 후 추출물별 항산화 활성 탐색, 신경염증 억제 효과 및 HPLC-UV 분석 방법에 의한 3가지 지표성분(caffeic acid, p-coumaric acid 및 Tricin)의 함량을 측정하였다. FRAP 방법과 DPPH 라디칼 및 ABTS 라디칼 소거능 측정방법을 이용하여 항산화 활성을 탐색하였으며, 3종의 대나무 중에서는 오죽 추출물이 총폴리페놀 및 총플라보노이드 함량이 가장 높았다. FRAP 방법, DPPH 라디칼 및 ABTS 라디칼 소거능 방법을 이용하여 항산화 활성을 측정한 결과 또한 오죽 추출물이 가장 우수하였다. Caffeic acid의 함량은 오죽의 물추출물이 6.247±0.049 ㎍/mg으로 가장 높았으며, p-coumaric acid의 함량은 오죽의 70% 주정추출물이 10.931±1.467 ㎍/mg으로 가장 높았으며 다음으로는 오죽의 100% 주정추출물이 9.374±1.140 ㎍/mg으로 높게 나타났으며 3종 죽엽의 물추출물을 제외한 주정추출물은 모두 p-coumaric acid 함량이 높음을 확인하였다. Tricin의 함량을 측정한 결과 또한 물추출물에서는 함량이 낮았으나, 70% 주정추출물이나 100% 주정추출물은 3종의 죽엽추출물 모두에서 3.094±0.875-5.233±2.698 ㎍/mg로 비슷한 함량을 나타내었다. LPS를 사용하여 미세아교세포의 활성화를 유도하여 신경염증반응의 지표인 NO의 생성량을 측정한 결과 3종의 죽엽추출물(70% 주정추출물) 모두 농도 의존적으로 NO의 생성량을 억제하였다. 따라서 본 연구의 결과는 죽엽추출물이 미세아교세포의 과도한 신경염증 활성화로 인해 발생되는 뇌 신경질환의 치료 소재로서 활용 가능성을 제시하였다.
미세교세포(Microglial cells)에서 신경염증반응(neuroinflammatory responses)의 억제는 알츠하이머질환, 파킨슨질환, 헌팅턴질환과 같은 신경퇴행성질환(neurodegenerative diseases)을 치료하기 위한 주요 표적으로 고려되고 있다. 천문동(Asparagus cochinchinesis)은 열, 기침, 신장 질환, 유방암, 염증성질환 및 뇌질환을 치료하는 데 오랫동안 사용 되어온 전통 치료제(Traditional medicine)이다. 본 연구에서는 lipopolysaccharide (LPS)로 활성화된 BV-2 미세교세포에서 항염증효과가 있는 천문동 뿌리 열수추출물(Aqueous extract from A. cochinchinesis root, AEAC)의 신경보호 메커니즘을 연구하였다. 먼저, 어떤 유의적인 세포독성은 플라보노이드(flavonoid), 페놀(phenol), 사포닌(saponin)을 함유하는 AEAC를 4가지 농도로 처리된 BV-2세포에서 검출되지 않았다. 또한, nitric oxide (NO), cyclooxygenase-2 (COX-2) mRNA 및 inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA 수준은 AEAC+LPS 처리군에서 비하여 21%정도 감소하였다. 전염증성 사이토카인(TNF-α과 IL-1β) 및 항염증성 사이토카인(IL-6와 IL-10)농도에 대한 유사한 감소는 비록 감소비율은 다르지만, Vehicle+LPS 처리군에 비해 AEAC+LPS 처리군에서 검출되었다. 더불어, LPS 처리 후 mitogen-activated protein (MAP) kinase의 인산화수준의 증가는 AEAC 전처리군에서 유의하게 회복되었고, 세포주기에서 G2/M의 억제(arrest)는 AEAC+LPS 처리군에서 개선되었다. 또한, LPS 처리로 유도된 ROS의 증가도 AEAC 전처리군에서 감소되었다. 따라서, 이러한 결과는 AEAC가 MAPK 신호전달 경로, 세포주기 및 ROS (reactive oxygen species) 생성의 조절을 통해 LPS 자극에 대한 항신경염증 활성을 유도함을 제시하고 있다.
Objectives : Jakyakgamcho-tang (JGT) has been traditionally used to treat muscular convulsion and pain in South Korea. According to recent studies, JGT has been reported to have anti-depression, anti-inflammation, anti-oxidative, anti-diabetics, anti-spasm and analgesic effects, but studies on its anti-neuroinflammatory and neuroprotective effect have not been deeply conducted. Thus, we investigated the anti-neuroinflammatory activity of JGT on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated mouse microglia cells. Methods : To investigate the anti-neuroinflammatory effects of JGT on BV2 microglial cells, we examined the production of nitric oxide (NO) using griess assay, and mRNA expressions of pro-inflammatory cytokines such as interleukin (IL)-1𝛽, IL-6, and tumor necrosis factor (TNF)-𝛼 using real time RT-PCR. Furthermore, to determine the regulating mechanisms of JGT, we investigated the heme oxygenase (HO)-1 by real time RT-PCR. Results : Pre-treatment of JGT effectively decreased NO production in LPS-stimulated BV2 cells at concentrations without cytotoxicity. Additionally, JGT significantly suppressed the production of IL-1𝛽, IL-6, and TNF-𝛼 in LPS-stimulated BV2 cells. Furthermore, JGT activated the HO-1 expression, which is one of the immunomodulatory signaling molecules. And the abolishment of HO-1 by tin protoporphyrin IX (SnPP, the HO-1 inhibitor) reversed the anti- inflammatory activity of JGT in LPS-stimulated BV2 cells. Conclusions : Our results suggest that the JGT has anti-neuroinflammatory effect through the activation of HO-1 in LPS-stimulated BV2 cells. Thereby, JGT could expected to be used for the prevention and treatment of neurodegenerative disease related to neuroinflammation.
Abeliophyllum distichum is a medicinal plant used in regional traditional medicine to relieve pain in inflammatory processes. In this study, anti-inflammatory effects of Abeliophyllum distichum stem (ADS) ethyl acetate extract were examined. Furthermore, possible molecular mechanisms of the anti-inflammatory effects were dissected. The anti-inflammatory activity was investigated by inhibition of lipopolysaccharide (LPS) induced pro-inflammatory cytokine production in murine macrophage-like cell line Raw264.7 cells and human microglial cell line BV2 cells. The measurement of the induced pro-inflammatory cytokine levels were carried out by ELISA. The phosphorylation of ERK1/2, JNK, and MAPK, and the nuclear expression of nuclear factor $NF-{\kappa}B$ p65 were investigated by Western blot analysis. The extract of ADS significantly decreased the production of pro-inflammatory cytokines. In addition, the extract suppressed the phosphorylation of ERK1/2, JNK, and p38 MAPK, and the nuclear translocation of $NF-{\kappa}B$ p65 in activated cells. Our findings provide evidence for the popular use of Abeliophylli distichum in inflammation around Goesan region and also suggest that the stem extract has potential therapeutic benefits against several inflammatory diseases.
Park, Dawon;Shin, Hyeji;Byun, Youngjoo;Lee, Ki Yong
Natural Product Sciences
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제27권4호
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pp.293-299
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2021
The ethyl acetate fractions prepared from the leaves of Thuja orientalis significantly inhibited nitric oxide (NO) production in lipopolysaccharide-stimulated BV2 microglial cells. According to bioassay-coupled LC-QTOF MS/MS, the components near 22 and 25 mins in the mass chromatogram highly inhibited NO production and were expected to be labdane diterpenes, and the active components were characterized via further isolation. The results of the NO production inhibitory assay of the isolated compounds correlated well with the results of bioassay-coupled LC-QTOF MS/MS. Among the identified constituents, NO production inhibitory activities of 16-hydroxy-labda-8(17),13-diene-15,19-dioic acid butenolide (2) and 15-hydroxypinusolidic acid (3) were newly reported. Taken together, these results demonstrated that LC-QTOF MS/MS coupled with NO production inhibition assay was a powerful tool for accurately predicting new anti-inflammatory constituents in the extracts from natural products. Moreover, it provided a potential basis for broadening the application of bioassay-coupled LC-QTOF MS/MS in natural product research.
Objectives: Rehmanniae Radix Preparata (RRP) has been used as a traditional remedy to treat gynecology and endocrine diseases. Recently, studies on antioxidant and anti-inflammatory effects of RRP have been reported, so it was judged that RRP extracts would have an anti-depressive effect. Methods: We investigated the anti-neuroinflammatory and anti-depressive effect of RRP on lipopolysaccharide (LPS)-induced depression and LPS-stimulated BV2 microglia. RRP inhibited the LPS-stimulated excessive release of nitrite in the BV2 cells. RRP also significantly inhibited the inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor (TNF)-alpha, interleukin (IL)-1beta and IL-6 in LPS-stimulated BV2 microglial cells. Results: RRP significantly suppressed the LPS-induced mitogen-activated protein kinase (MAPKs) and nuclear factor (NF)-𝜅B activation. In addition, administration of RRP not only inhibited the immobility time in the forced swimming test (FST) but also increased the total travel distance in the open field test (OFT). Also, RRP inhibited the elevation of TNF-alpha, IL-1beta, and IL-6 in brain of LPS-injected mice. Conclusions: Considering the overall results, our study showed that RRP exhibited the anti-neuroinflammatory and anti-depressive activities via deactivation of MAPKs and NF-𝜅B.
치자 열매는 아시아에서 음식과 옷의 염료로 사용되어 왔다. 본 연구에서는 BV-2 소교세포에서 치자열매 열수추출물(GJ)의 항염증 효과를 관찰하고 그 작용 기전을 연구하였다. GJ는 세포에 독성을 유도하지 않으면서 lipopolysaccharide로 인한 nitric oxide (NO) 분비와 inducible nitric oxide synthase (iNOS) 생성 및 활성산소 생성을 억제하였다. 또한 GJ는 농도의존적으로 heme oxygenase-1 (HO-1)의 발현을 유도하였다. 더군다나 HO-1 siRNA를 처리했을 때는 GJ가 iNOS의 발현을 억제하지 못하였다. GJ는 HO-1의 발현에 관여하는 전사인자인 nuclear factor E2-related factor 2를 핵으로 이동시켰다. 또한 GJ에 의한 HO-1의 발현은 phosphatidylinositol 3-kinase(PI-3K) 및 p38 kinase 억제제에 의해 감소되었으며, GJ가 Akt와 p38 kinase의 인산화를 유도하였다. 이상의 결과를 종합해보면, GJ는 PI3K/Akt 및 p38 신호전달과정을 통해 HO-1의 발현을 유도함으로써 NO와 같은 염증매개물질의 생성을 억제한다는 것을 알 수 있다. 이러한 연구결과는 치자열매가 신경염증을 억제하는 새로운 기전을 밝힌 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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