Recombinant human tissue plasminogen activator deletion mutein (Reteplase) is a clinically promising thrombolytic drug. Reteplase cDNA was subcloned into a bacteria expression system, and the resultant recombinant was biologically characterized. The Reteplase was expressed in Escherichia coli as an inclusion body, and the downstream processes of the Reteplase inclusion body included denaturation, renaturation, and purification. A protein disulfide isomerase (PDI) was used to assist the refolding of Reteplase, and it was found to increase the refolding rate from less than 2% to more than 20%. The refolded Reteplase was purified through two chromatography steps, including lysine-coupled agarose affinity chromatography and then CM-sepharose cation-exchange chomatography. The purity of r-PA was analyzed by Western bolt analysis, and N-terminal amino acid and amino acid composition analyses confirmed the end-product. Reteplase showed higher thrombolytic potency in an animal thrombus model.
Glutathione (GSH) is a vital compound composed of glutamic acid, cysteine, and glycine, crucial for cellular functions including oxidative stress defense and detoxification. It has widespread applications in pharmaceuticals, cosmetics, and food industries due to its antioxidant properties and immune system support. Two primary methods for GSH synthesis are enzymatic and microbial fermentation. Enzymatic synthesis is efficient but costly, while microbial fermentation, particularly using yeast strains like Candida albicans, offers a cost-effective alternative. This study focuses on genetically modifying C. albicans mutants, specifically targeting glutathione reductase (GLR1) and gamma-glutamylcysteine synthetase (GCS1) genes, integral to GSH synthesis. By optimizing these mutants, the research aims to develop a model for efficient GSH production, potentially expanding its applications in the food industry.
This paper describes and assesses the parameterisation of MP, the microplankton compartment of the carbonnitrogen microplanktondetritus model. The compartment is 'the microbial loop in a box' and includes pelagic bacteria and protozoa as well as phytoplankton. The paper presents equations and parameter values for the autotroph and microheterotroph components of the microplankton. Equations and parameter values for the microplankton as a whole are derived on the assumption of a constant 'heterotroph fraction'. The autotroph equations of MP allow variation in the ratios of nutrient elements to carbon, and are largely those of the 'cellquota, thresholdlimitation' algal growth model, which can deal with potential control of growth by several nutrients and light. The heterotroph equations, in contrast, assume a constant elemental composition. Nitrogen is used as the limiting nutrient in most of the model description, and is special in that MP links chlorophyll concentration to the autotroph nitrogen quota.
Cheese is generally considered a safe and nutritious food, but foodborne illnesses linked to cheese consumption have occurred in many countries. Several microbial risk assessments related to Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, and Escherichia coli infections, causing cheese-related foodborne illnesses, have been conducted. Although the assessments of microbial risk in soft and low moisture cheeses such as semi-hard and hard cheeses have been accomplished, it has been more focused on the correlations between pathogenic bacteria and soft cheese, because cheese-associated foodborne illnesses have been attributed to the consumption of soft cheeses. As a part of this microbial risk assessment, predictive models have been developed to describe the relationship between several factors (pH, Aw, starter culture, and time) and the fates of foodborne pathogens in cheese. Predictions from these studies have been used for microbial risk assessment as a part of exposure assessment. These microbial risk assessments have identified that risk increased in cheese with high moisture content, especially for raw milk cheese, but the risk can be reduced by preharvest and postharvest preventions. For accurate quantitative microbial risk assessment, more data including interventions such as curd cooking conditions (temperature and time) and ripening period should be available for predictive models developed with cheese, cheese consumption amounts and cheese intake frequency data as well as more dose-response models.
Objective: This study aims to identify the relationship between odd- and branched-chain fatty acids (OBCFAs) and microbial nucleic acid bases in the rumen, and to establish a model to accurately predict microbial protein flow by using OBCFA. Methods: To develop the regression equations, data on the rumen contents of individual cows were obtained from 2 feeding experiments. In the first experiment, 3 rumen-fistulated dry dairy cows arranged in a $3{\times}3$ Latin square were fed diets of differing forage to concentration ratios (F:C). The second experiment consisted of 9 lactating Holstein dairy cows of similar body weights at the same stage of pregnancy. For each lactation stage, 3 cows with similar milk production were selected. The rumen contents were sampled at 4 time points of every two hours after morning feeding 6 h, and then to analyse the concentrations of OBCFA and microbial nucleic acid bases in the rumen samples. Results: The ruminal bacteria nucleic acid bases were significantly influenced by feeding diets of differing forge to concentration ratios and lactation stages of dairy cows (p<0.05). The concentrations of OBCFAs, especially odd-chain fatty acids and C15:0 isomers, strongly correlated with the microbial nucleic acid bases in the rumen (p<0.05). The equations of ruminal microbial nucleic acid bases established by ruminal OBCFAs contents showed a good predictive capacity, as indicated by reasonably low standard errors and high R-squared values. Conclusion: This finding suggests that the rumen OBCFA composition could be used as an internal marker of rumen microbial matter.
Park, Tae-Jung;Choi, Soo-Keun;Jung, Heung-Chae;Lee, Sang-Yup;Pan, Jae-Gu
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.5
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pp.495-501
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2009
A new spore display method is presented that enables recombinant proteins to be displayed on the surface of Bacillus spores via fusion with InhA, an exosporium component of Bacillus thuringiensis. The green fluorescent protein and $\beta$-galactosidase as model proteins were fused to the C-terminal region of InhA, respectively. The surface expression of the proteins on the spores was confirmed by flow cytometry, confocal laser scanning microscopy, measurement of the enzyme activity, and an immunogold electron microscopy analysis. InhA-mediated anchoring of foreign proteins in the exosporium of Bacillus spores can provide a new method of microbial display, thereby broadening the potential for novel applications of microbial display.
Seo, Chang-Seob;Shin, Hyeun-Kyoo;Kim, Jung-Hoon;Shin, Kwang-Soo
The Journal of Korean Medicine
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v.32
no.5
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pp.41-49
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2011
Objectives: To optimize the preservation method of herbal decoction, we investigated the content of principle components of Pyungwi-san, liquiritin, glycyrrhizin, and hesperidin according to preservation temperature and period. We also investigated the changing patterns of pH and microbial population in Pyungwi-san decoction as a model case. Methods: With samples preserved at different temperatures, the content of liquiritin, glycyrrhizin, and hesperidin was determined using HPLC and microbial population was determined as viable counting method up to 8 times every month. Identification of isolated bacteria was performed by 16S rDNA analysis. Results: The content of liquiritin and glycyrrhizin did not change according to the preservation temperature and period, but that of hesperidin was severely decreased at room temperature. The isolate from the decoction was identified as Bacillus licheniformis by 16S rDNA sequence analysis. Microbial population appeared after 3 months' preservation and reached maximum value at 4 months; at all tested temperatures, the pH showed the lowest value (4.4-4.5) simultaneously. Conclusion: From the results, it seems to be that the microbial growth affects the pH of preserved decoction but not the change of liquiritin and glycyrrhizin content.
Environmental Sciences Bulletin of The Korean Environmental Sciences Society
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v.3
no.3
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pp.151-158
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1999
Biogenic source emissions refer to naturally occuring emissions from vegetation, microbial activities in soil, lightening, and so on. Vegetation is especially known to emit a considerable amout of volatile organic compounds into the atmosphere. Therefore, biogenic source emissions are an important input to photochemical air quality models. since most biogenic source emissions are calculated at the county-level, they should be geographically allocated to the computational grid cells of a photochemical air quality model prior to running the model. The traditional method for the spatial allocation for biogenic source emissions has been to use a "spatial surrogate indicator" such as a county area. In order to examine the applicability of such approximations, this study developed more detailed surrogate indicators to improve the spatial allocation method for biogenic source emissions. Due to the spatially variable nature of biogenic source emissions, Geographic Information Systems(GIS) were introduced as new tools to develop more detailed spatial surrogate indicators. Use of these newly developed spatial surrogate indicators for biogenic source emission allocation provides a better resolution than the standard spatial surrogate indicator.indicator.
The present study aimed to develop growth prediction models of Listeria monocytogenes in processed meat products, such as mixed pressed hams, to perform accurate microbial risk assessments. Considering cold storage temperatures and the amount of time in the stages of consumption after opening, the growth of L. monocytogenes was determined as a function of temperature at 0, 5, 10, and $15^{\circ}C$, and time at 0, 1, 3, 6, 8, 10, 15, 20, 25, and 30 days. Based on the results of these measurements, a Baranyi model using the primary model was developed. The input parameters of the Baranyi equation in the variable temperature for polynomial regression as a secondary model were developed: $SGR=0.1715+0.0199T+0.0012T^2$, $LT=5.5730-0.3215T+0.0051T^2$ with $R^2$ values 0.9972 and 0.9772, respectively. The RMSE (Root mean squared error), $B_f$ (bias factor), and $A_f$ (accuracy factor) on the growth prediction model were determined to be 0.30, 0.72, and 1.50 in SGR (specific growth rate), and 0.10, 0.84, and 1.35 in LT (lag time), respectively. Therefore, the model developed in this study can be used to determine microorganism growth in the stages of consumption of mixed pressed hams and has potential in microbial risk assessments (MRAs).
This study was performed to assess the microbiological quality and safety of microgreen sampled from harvesting farms and food processing plant in Korea. The samples were analyzed for total viable counts, coliforms, Enterobacteriaceae, Escherichia coli, Salmonella spp., Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus, Bacillus cereus, and Staphylococcus aureus. Total viable counts were highly contaminated in samples collected from farms (7.7~8.2 log CFU/g) and the final products (5.8~7.8 log CFU/g), respectively. B. cereus was detected less than 100 CFU/g, which was satisfied with Korean standards (<1,000 CFU/g) of fresh-cut produce. A predictive model was developed for the changes of total viable counts in microgreens during storage at 5~35℃. The predictive models were developed using the Baranyi model for the primary model and the square root model for the secondary model. The results obtained in this study can be useful to develop the safety management options along the food chain, including fresh-cut produce storage and distribution.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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