Objective: MicroRNAs (miRNAs) play important roles in carcinogenesis. The aim of the present study was to explore the effects of miR-181b on gastric cancer. Methods: The expression level of miR-181b was quantified by qRT-PCR. MTT, flow cytometry and matrigel invasion assays were used to test proliferation, apoptosis and invasion of miR-181b stable transfected gastric cancer cells. Results: miR-181b was aberrantly overexpressed in gastric cancer cells and primary gastric cancer tissues. Further experiments demonstrated inducible expression of miR-181b by Helicobacter pylori treatment. Cell proliferation, migration and invasion in the gastric cancer cells were significantly increased after miR-181b transfection and apoptotic cells were also increased. Furthermore, overexpression of miR-181b downregulated the protein level of tissue inhibitor of metalloproteinase 3 (TIMP3). Conclusion: The upregulation of miR-181b may play an important role in the progress of gastric cancer and miR-181b maybe a potential molecular target for anticancer therapeutics of gastric cancer.
Yun, Jieun;Han, Sang-Bae;Kim, Hong Jun;Go, Se-il;Lee, Won Sup;Bae, Woo Kyun;Cho, Sang-Hee;Song, Eun-Kee;Lee, Ok-Jun;Kim, Hee Kyung;Yang, Yaewon;Kwon, Jihyun;Chae, Hee Bok;Lee, Ki Hyeong;Han, Hye Sook
Journal of Gastric Cancer
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v.19
no.3
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pp.301-314
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2019
Purpose: Peritoneal carcinomatosis in gastric cancer (GC) patients results in extremely poor prognosis. Malignant ascites samples are the most appropriate biological material to use to evaluate biomarkers for peritoneal carcinomatosis. This study identified exosomal MicroRNAs (miRNAs) differently expressed between benign liver cirrhosis-associated ascites (LC-ascites) and malignant gastric cancer-associated ascites (GC-ascites), and validated their role as diagnostic biomarkers for GC-ascites. Materials and Methods: Total RNA was extracted from exosomes isolated from 165 ascites samples (73 LC-ascites and 92 GC-ascites). Initially, microarrays were used to screen the expression levels of 2,006 miRNAs in the discovery cohort (n=22). Subsequently, quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction (qRT-PCR) analyses were performed to validate the expression levels of selected exosomal miRNAs in the training (n=70) and validation (n=73) cohorts. Furthermore, carcinoembryonic antigen (CEA) levels were determined in ascites samples. Results: The miR-574-3p, miR-181b-5p, miR-4481, and miR-181d were significantly downregulated in the GC-ascites samples compared to the LC-ascites samples, and miR-181b-5p showed the best diagnostic performance for GC-ascites (area under the curve [AUC]=0.798 and 0.846 for the training and validation cohorts, respectively). The diagnostic performance of CEA for GC-ascites was improved by the combined analysis of miR-181b-5p and CEA (AUC=0.981 and 0.946 for the training and validation cohorts, respectively). Conclusions: We identified exosomal miRNAs capable of distinguishing between non-malignant and GC-ascites, showing that the combined use of miR-181b-5p and CEA could improve diagnosis.
Objective : The purpose of the study was to identify expression profiling of miRNAs associated with cancers after treating allergen-removed Rhus Verniciflua Stokes and allergen-removed Rhus Verniciflua Stokes fumigaed Angelica gigas on leukemia cell lines. Methods : miRNA expression has been analyzed using miRNA array method through denaturation and hybridization after isolating the total RNA from leukemic cell line treated with 100 ㎍/㎖ of aRVS and aRVS-A each. Microarray expressions were interpreted as 'significant' on miRNAs when decreased less than 0.5 fold or increased more than 1.5 fold compared with the control group. Results : Among 158 miRNAs in total, 32 miRNAs were significantly presented in miRNAs expression. miRNA has been activated with a variety of genes for predicted targets, and the overexpressed miRNAs were categorized according to proliferation and metastasis of cancer in this study. The findings were reported that seven miRNAs (let-7b, miR-193a-5p, 296-3p, 26a, 22, 124a, 92b) showed significant expressions on proliferation and growth, seven miRNAs (miR-193a-5p, 26a, 200c, 183, 124a, 198, 210) presented meaningful expressions on invasion and metastasis, two miRNAs (let-7b, miR-210) were highly expressed on angiogenesis, five miRNAs (let-7b, miR-26a, 181d, 181c, 296-5p) related with apoptosis, and six miRNAs (let-7b, miR-200c, 183, 370, 124a, 191) were associated with prognosis of cancer and early diagnostic factors for cancer. Conclusion : The mechanism of miRNA takes a role in diagnosis, treatment, and prognotic factors for cancer as well. This study suggested that further detailed research on overexpression of specific miRNA should be carried out continuously in the future.
Bhin, Jinhyuk;Jeong, Hoe-Su;Kim, Jong Soo;Shin, Jeong Oh;Hong, Ki Sung;Jung, Han-Sung;Kim, Changhoon;Hwang, Daehee;Kim, Kye-Seong
Molecules and Cells
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v.38
no.10
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pp.895-903
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2015
Non-coding microRNAs (miRNAs) regulate the translation of target messenger RNAs (mRNAs) involved in the growth and development of a variety of cells, including primordial germ cells (PGCs) which play an essential role in germ cell development. However, the target mRNAs and the regulatory networks influenced by miRNAs in PGCs remain unclear. Here, we demonstrate a novel miRNAs control PGC development through targeting mRNAs involved in various cellular pathways. We reveal the PGC-enriched expression patterns of nine miRNAs, including miR-10b, -18a, -93, -106b, -126-3p, -127, -181a, -181b, and -301, using miRNA expression analysis along with mRNA microarray analysis in PGCs, embryonic gonads, and postnatal testes. These miRNAs are highly expressed in PGCs, as demonstrated by Northern blotting, miRNA in situ hybridization assay, and miRNA qPCR analysis. This integrative study utilizing mRNA microarray analysis and miRNA target prediction demonstrates the regulatory networks through which these miRNAs regulate their potential target genes during PGC development. The elucidated networks of miRNAs disclose a coordinated molecular mechanism by which these miRNAs regulate distinct cellular pathways in PGCs that determine germ cell development.
Objective: As one of the most important metabolic organs, the liver plays vital roles in modulating the lipid metabolism. This study was to compare miRNA expression profiles of the Large White liver between two different developmental periods and to identify candidate miRNAs for lipid metabolism. Methods: Eight liver samples were collected from White Large of 70-day fetus (P70) and of 70-day piglets (D70) (with 4 biological repeats at each development period) to construct sRNA libraries. Then the eight prepared sRNA libraries were sequenced using Illumina next-generation sequencing technology on HiSeq 2500 platform. Results: As a result, we obtained 346 known and 187 novel miRNAs. Compared with the D70, 55 down- and 61 up-regulated miRNAs were shown to be significantly differentially expressed (DE). Gene ontology and Kyoto encyclopedia of genes and genomes enrichment analysis indicated that these DE miRNAs were mainly involved in growth, development and diverse metabolic processes. They were predicted to regulate lipid metabolism through adipocytokine signaling pathway, mitogen-activated protein kinase, AMP-activated protein kinase, cyclic adenosine monophosphate, phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinase B, and Notch signaling pathway. The four most abundantly expressed miRNAs were miR-122, miR-26a and miR-30a-5p (miR-122 only in P70), which play important roles in lipid metabolism. Integration analysis (details of mRNAs sequencing data were shown in another unpublished paper) revealed that many target genes of the DE miRNAs (miR-181b, miR-145-5p, miR-199a-5p, and miR-98) might be critical regulators in lipid metabolic process, including acyl-CoA synthetase long chain family member 4, ATP-binding casette A4, and stearyl-CoA desaturase. Thus, these miRNAs were the promising candidates for lipid metabolism. Conclusion: Our study provides the main differences in the Large White at miRNA level between two different developmental stages. It supplies a valuable database for the further function and mechanism elucidation of miRNAs in porcine liver development and lipid metabolism.
Purpose: The aim of this study was to compare microRNA (miRNA) gene expression in saliva using miRNA polymerase chain reaction (PCR) arrays in healthy and aggressive periodontitis (AP) patients. Methods: PCR arrays of 84 miRNAs related to the human inflammatory response and autoimmunity from the saliva samples of 4 patients with AP and 4 healthy controls were performed. The functions and diseases related to the miRNAs were obtained using TAM 2.0. Experimentally validated targets of differentially expressed miRNAs were obtained from mirTarBase. Gene ontology terms and pathways were analyzed using ConsensusPathDB. Results: Four downregulated miRNAs (hsa-let-7a-5p, hsa-let-7f-5p, hsa-miR-181b-5p, and hsa-miR-23b-3p) were identified in patients with AP. These miRNAs are associated with cell death and innate immunity, and they target genes associated with osteoclast development and function. Conclusions: This study is the first analysis of miRNAs in the saliva of patients with AP. Identifying discriminatory human salivary miRNA biomarkers reflective of periodontal disease in a non-invasive screening assay is crucial for the development of salivary diagnostics. These data provide a first step towards the discovery of key salivary miRNA biomarkers for AP.
ICT-convergence cluster is considered as critical policy means because it can create higher value-added products and services in the era of creative economy. Previous research has focused on comprehensive ICT-convergence cluster strategy based on Porter's diamond model. This paper adopted AIDA(Attention, Interest, Desire, Action) model and investigated a specific domain of government supporting policies related to non-R&D support. For two weeks, we gathered and analyzed 181 data from companies located in Chungbuk province. The results showed that support for technology, commercialization, and participation conditions positively leads to companies' interest in ICT-convergence cluster, which, in turn, makes positive impact on their intention to participate in it. It is significant that this paper verified AIDA model in the Government-to-Business(G2B) context. Future research will need to adapt AIDA model to national projects.
Park, Yong-Chjun;Kim, Mi-Ra;Kim, Yong-Sang;Lee, Ho-Yeon;Kim, Kyu-Heon;Lee, Jae-Hwang;Kim, Jae-I;Lee, Sang-Jae;Lee, Hwa-Jung
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.28
no.2
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pp.181-187
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2013
Identification of main ingredients in starches has been investigated using physicochemical analysis method mainly. However, physicochemical properties such as particle size have limitations in determining the differences among mixed starches. Therefore, we developed a molecular biological method to identify materials used in starch, as a sample, 11 kinds of starches including sweet potato starch, potato starch, corn starch, and tapioca starch. DNeasy plant mini kit, magnetic DNA purification system, and CTAB methods were used to extract DNA from samples. After gene extraction, whole genome amplification (WGA) was performed to amplify the extracted DNA. Species-specific primers were used as followings: ib-286-F/ib-286-R (105 bp), Pss 01n-5'/Pss 01n-3' (216 bp), SS11b 3-5'/SS11b 3-3' (114 bp), and SSRY26-F/SSRY26-R (121 bp) gene for sweet potato, potato, corn, and tapioca, respectively. In this study, we could confirm the main ingredients using WGA and PCR method.
Statement of the problem. The interest in all-ceramic restorations has increased as more techniques have become available. With the introduction of machinable dental ceramics and CAD/CAM systems or Copy-milling systems there is a need for evaluating the quality levels of these new fabrication techniques. Purpose. This study was to evaluate the fitting accuracy of machined all-ceramic crowns made out of an industrially prefabricated feldspathic porcelain. Material and Methods. Three master models with different cutting depth (0.8mm/1.0mm/1.2mm)were produced using a palladium-silver alloy. A total of 36 working dies, 12 of each form, was used for the modellation of prototype resin copings and 36 additional crowns, 12 of each cutting depth, were produced by using the $CEREC^{(R)}2$ system for all crowns. The maginal fit of all 72 crowns was then evaluated on their respective master die at 54 circularly staggered points of measurement per crown under a fixation pressure of 30 N by using a computerized video image system. Results. The medians of the copy-milled $CELAY^{(R)}$ crowns ranged from 29 to $36{\mu}m$. The highest value for the marginal gap was found in group B (cutting depth 1.0mm) at $107{\mu}m$. The median for the $CEREC^{(R)}2$ crowns was found between 43.5 and $70{\mu}m$. The maximum values for all three groups ranged from $181{\mu}m$ to $286{\mu}m$. With $286{\mu}m$ the highest value for marginal gap was found in group C. the Kruskal-Wallis test and multiple comparisons analysis procedure revealed a significant influence of the production technique on the marginal fit in all three groups (p<0,02). Conclusion. 1. The $CELAY^{(R)}$ system is capable to produce all-ceramic crowns with a significantly better marginal fit than the $CEREC^{(R)}2$ system. 2. As far as premolar crowns produced with the $CEREC^{(R)}2$ system are concerned, the cutting depth has a significant influence on fitting accuracy. 3. The production of crowns with an acceptable marginal fit is possible with both systems. However, adhesive luting is recommended for milled feldspathic porcelain crowns.
In previous study for correlation between P-wave Signal Averaged Electrocardiography (SAECG) and Paroxysmal Atrial Fibrillation (PAF) subjects, we showed that the duration of P-wave in subjects is longer than in controls. In this respect, the P-wave SAECG is a new method proving to be an accurate and independent noninvasive marker for the risk of PAF. To prove this suggestion, accurate detection and alignment of P-wave are indispensible. In previous study, we measured P-wave duration by manual. So it was not accurate and consistent. To measure the P-wave duration accurately and automatically, we have developed an automatic algorithm for P-wave duration measurement. We showed that the duration of P- wave in the subjects is longer than in controls with this algorithm.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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