To estimate the inhibitory effect of Rubus coreanum extract on melanin biosynthesis, we tested its inhibitory effects on tyrosinase promoter in B16 mouse melanoma cells. Rubus coreanum extract by methanol had inhibitory effect approximately 10% on tyrosinase promoter at $100{\mu}g/mL$. In the MTT assay, the same extract exhibited very low cytotoxicity under $100{\mu}g/mL$. The fractions of methylene chloride, butyl alcohol and water did not showed the inhibitory effect on tyrosinase promoter, but the fraction of ethyl acetate exhibited inhibitory effect approximately 11% at $100{\mu}g/mL$.
The antioxidant activity of solvent extracts isolated from barley leaves was investigated by measuring peroxide value. The fractions of methanol extract obtained from preparative TLC was also studies, with UV-Visible spectrum, total phenol contents and hydrogen donating ability(HDA) The antioxidant activity of various solvent extracts was, in decreasing order, methanol> ethyl ether> methylene chloride $\geq$ ethyl acetate $\geq$acetone> hexane. The antioxidant activity of the fractions of methanol extract was, in decreasing order, fraction 2> fraction 3> fraction 1 and their activity was all superior to that of tocopherol at 500 ppm level. All fraction(1, 2 and 3) exhibited a strong UV absorption at 280 m which would be specifically produced by phenolic compound. UV absorption at 280 m of fraction 2 was greater than those of fraction 1 and 3. In the visible spectrum of these fractions, the maximum .absorption wavelengths of fraction 1, 2 and 3 were 660, 460 and 460 m, respectively. Antioxidant activity of barley leaves seemed to be due to the flavonoids containing phenolic group by UV spectrum and total phenol content.
Objectives : This study was undertaken to define the effect of Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium on phenylephrine-induced arterial contraction and the mechanism of Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Foliuminduced relaxation. Methods : In order to investigate the effect of Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium on contracted rabbit carotid arterial strips, transverse strips with intact or damaged endothelium were used for the experiment using organ bath. Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium extract was infused into contracted arterial strips induced by phenylephrine. To analyze the mechanism of Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium-induced relaxation, Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium extract was infused into contracted arterial strips induced by phenylephrine after treatment with indomethacin, $N{\omega}-nitro-L-arginine$, methylene blue or tetraethylammonium chloride, and $Ca^{2+}$ was infused into contracted arterial strips induced by phenylephrine after treatment of Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium in a $Ca^{2+}$-free solution. Results : Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium showed relaxation effect on arterial strip with endothelium contracted by phenylephrine, but in the strips without endothelium, Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium-induced relaxation was significantly inhibited. The endothelium-dependent relaxation induced by Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium was decreased by pretreatment with $N{\omega}-nitro-L-arginine$ or methylene blue but it was not observed in the strips pretreated with indomethacin or tetraethylammonium chloride. When $Ca^{2+}$ was applied to the strips which were contracted by phenylephrine in a $Ca^{2+}$-free solution, arterial contraction was increased. However, pretreatment with Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium inhibited contractile response to $Ca^{2+}$. Conclusions : Diospyros kaki L. Radix or Diospyros kaki L. Folium may suppress influx of extra- cellular $Ca^{2+}$ through the formation of nitric oxide in the vascular endothelial cells.
As a part of our search for novel antioxidants from the seaweeds, we have investigated radical scavenging effect for their crude extracts using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical, authentic peroxynitrite, and 3-morpholinsydnonimine (SIN-1), a peroxynitrite-generating species in vitro. Thirty-four seaweeds were screened for $ONOO^-$ and DPPH radical scavenging activities. A potent inhibitory effect against peroxynitrite generated by SIN-1 at $5{\mu}g/ml$ of methanol extracts was observed in order of Ishige okamurae(95.3%), Sargassum hemiphyllum(90.2%), Symphyocladia latiuscula(89.6%), Porphyra suborbiculata(86.7%), and Gelidium amamsii(85.9%), Also, a significant scavenging effect against direct authentic peroxynitrite was revekaled for methanol extracts of Ishige okamurae(66.2%) and Sargassum hemiphyllum(55.2%) and the acetone/methylene chloride(1:1) extract of Gigatina tenella (61.0%). In our measurement for evaluating the capacity to scavenge the stable free radical of DPPH, acetone/methylene chloride(1:1) extracts of Symphyocladia latiuscula, Gloiopeltis furcata, and Sargassum thunbergii and the methanol extract of Sargassum sp. showed an inhibitory potency of 85.8%, 82.8%, 74.1%, and 64.0%, respectively.
Numerous natural herbal compounds have been reported to inhibit adhesion and migration of leukocytes to the site of inflammation Licorice extracts, which have been widely used in traditional Chinese medicinal preparation, possess various pharmacological effects. Isoliquiritigenin, a biogenetic precursor of flavonoids with various pharmacological effects, is a natural pigment present in licorice. We attempted to explore whether licorice extracts and isoliquiritigenin mitigate monocyte adhesion to tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$)-activated human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). In addition, it was tested whether the inhibition of monocyte adhesion to the activated HUVEC accompanied a reduction in vascular cell adhesion molecule-l expression(VCAM-l). Dry-roasted licorice extracts in methylene chloride but not in ethanol markedly interfered with THP-l monocyte adhesion to INF-$\alpha$-activated endothelial cells. licochalcone A compound isolated from licorice extract in methylene chloride appeared to modestly inhibit the interaction of THP-l monocytes and activated endothelium. In addition, isoliquiritigenin abolished the monocyte adhesion with attenuating VCAM-l protein expression on HUVEC induced by INF-$\alpha$. These results demonstrated that non-polar components from dry-roasted licorice extracts containing licochalcone A as well as isoliquiritigenin were active in blocking monocyte adhesion to cytokine-activated endothelimn, which appeared to be mediated most likely through the inhibition of VCAM-l expression on HUVEC. Therefore, licorice may hamper initial inflammatory events on the vascular endothelium involving induction of endothelial cell adhesion molecules.
수수 줄기에 함유된 타감물질의 특성을 구명하기 위해서 극성, 비극성 용매로 분획한 결과 사용한 용매에 따라 억제 효과가 달리 나타났는데 ethyl ehter 분획에서 억제작용이 가장 크게 나타났으며 또 methylene chloride와 ethyl acetate 분획에서도 8mg/ml과 16mg/ml 농도에서 상당한 억제 효과가 나타났으나 hexane과 남은 수용층 분획에서는 거의 억제 효과가 나타나지 않았다. Ethyl ether 분획을 pH에 따라 알칼리성, 중성 및 산성으로 다시 분획한 결과 산성 분획에서 억제 효과가 가장 크게 나타났다. 이상의 결과에서 수수 줄기와 함유하고 있는 타감물질은 비극성이며 산성 특성을 가진 물질이라 추측된다.
This study was conducted to investigate the relaxation effects and its mechanisms of Nelumbinis Semen(NS) extract in isolated rabbit corpus cavernous tissues. In order to examine the relaxation effects and its mechanisms of NS, we treated the ethanol extract of NS(0.01-3.0 mg/ml) and indomethacin(IM), tetraethylammonium chloride(TEA), Nω -nitro-L-arginine (L-NNA), methylene blue(MB) were treated before NS extract to contracted strips induced by PE 1 μM. We also treated calcium chloride(Ca) 1 mM after pretreatment of NS extract in Ca2+-free krebs-ringer solution to contracted strips induced by PE. Cell viability and NO concentration on human umbilical vein endothelial cell(HUVEC) was measured by MTT assay, Griess reagent system. eNOS production was investigated by histochemical and immunohistochemical staining. NS extract was significantly affected on the relaxation of cavernous strips and NS extract-induced relaxation was not different by pretreatment of IM, TEA, MB, but inhibited by the pretreatment of L-NNA. And increase of contraction induced by Ca2+ addition, in a Ca2+-free solution, was decreased by pretreatment of NS. NO concentration on HUVEC was increased. When NS extract was applicated on corpus cavernosum of penis(CCP) in SHR, ratio of smooth muscles to collage fibers by PE was decreased and formation of eNOS around helicine artery was increased. These results suggest that CCP relaxation effects of NS extract are shown by suppressing influx of extracellular Ca2+ through the production of NO and eNOS.
본 연구에서는 갈조류에 속하는 짝잎모자반을 용매별로 추출하여 인체 위암 및 결장암세포에 대한 증식 억제 및 지질 과산화물 생성 억제효과에 대해 검토하고자 하였다. Acetone/methylene chloride 추출물(A+M) 및 methanol 추출물(MeOH)을 인체 위암세포에 처리했을 때 농도 의존적으로 암세포 증식을 억제하였고(P<0.05), MeOH 추출물의 경우 인체 결장암 세포에 비해 위암세포에 대한 증식 억제효과가 높았다. 분획물들인 hexane, BuOH, 85% MeOH, water 분획물을 5 mg/ml의 농도로 인체 위암 및 결장암세포에 처리했을 때 암세포의 성장을 크게 억제시켰으며(P<0.05) 위암세포와 비교해 볼 때 결장암 세포에서 보다 높은 암세포 증식 억제효과를 보였다. A+M 추출물 및 MeOH 추출물과 각 분획물들을 10mg/ml의 농도로 HT-1080 섬유육종 세포에 처리하였을 때, 지질 과산화물의 생성을 억제시키는 활성을 나타내었다(p<0.05). A+M 추출물과 MeOH 추출물 처리군은 blank군과 control군과 비교하였을 때, 측정 시간 120분 동안 계속적으로 높은 세포내 지질 과산화물 생성 억제 능력을 나타내었으며(p<0.05), BuOH 및 hexane 분획물들을 처리한 경우에서는 A+M 추출물과 MeOH 추출물 처리군들보다는 다소 낮은 활성을 나타내지만, control군에 비해 지질 과산화물의 증가율이 현저히 낮았음을 관찰할 수 있다(p<0.05). 이상의 결과로부터 짝잎모자반의 추출물 및 각 분회물들은 인체 암세포의 증식을 크게 억제하였으며 지질 과산화물 생성을 억제시켜 우수한 산화 방지 효과가 있음을 확인할 수가 있었다.
This study is conducted to investigate vasorelaxant effect of Corni Fructus(CF) on rabbit carotid artery. To determine vasorelaxant effect of CF on rabbit carotid artery, arterial sections with intact or removed endothelium were used in this organ bath study. After being contracted by phenylephrine(PE), arterial sections were treated with CF extract in a dose-dependent manner. To identity its mechanism, the contracted arterial sections by PE were pretreated with indomethacin(IM), tetraethylammonium chloride(TEA), Nω-nitro-L-arginine(L-NNA) or methylene blue(MB) and 1.0 ㎎/㎖ CF extract. We also studied to confirm the effect on influx of extracellular calcium chloride(Ca2+) of the CF extract in rabbit carotid artery. To measure the cytotoxicity of the CF extract, cell viability of human umbilical vein endothelial cell(HUVEC) was measured by MTT assay. Generation of nitric oxide(NO) was also measured by Griess reagent. The arterial sections with intact endothelium were relaxed significantly by CF extract, but this effect was inhibited in the arterial sections with damaged endothelium. The vasorelaxant effect was inhibited significantly when arterial sections were pretreated with IM, TEA, L-NNA, MB. In Ca2+-free krebs solution, increasing of arterial contraction by Ca2+ was also inhibited by CF significantly. The treatment of CF extract increased NO concentration in HUVEC. This study suggested that the vasorelaxant effect of CF extract would be related with endothelium derived relaxing factor(EDRF) such as NO, prostacyclin(PGI2), endothelium derived hyperpolarization factor(EDHF).
Clove extract by methanol increased expression of the tyrosinase gene on B16 mouse melanoma cells containing tyrosinase promoter. $10{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$ of the extract showed expression rate of the tyrosinase gene about 138% and 245%, respectively, compared with control. At $500{\mu}g/mL$, expression rate of the extract was impossible to measurement by high cytotoxicity. The solvent fraction of methylene chloride also exhibited highly expression rate as methanol extract. However, the solvent fractions of butyl alcohol and water showed repressive effect on expression of tyrosinase gene at $500{\mu}g/mL$. In MTT assay, cell survival rate of the extract exhibited similar to expression rate of tyrosinase gene. That is, $10{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$ of the extract showed the cell survival rate about 128% and 187%, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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