• 약학회지
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• 제30권1호
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• pp.31-41
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• 1986

Sarcolemmal membrane fraction from canine ventricle was isolated from the discarded pellet after the first homogenization in the isolation procedure of sarcoplasmic reticulum (Method 1) and the protein yield, purity, and sidedness of this preparation were compared to those of sarcolemmal fraction prepared by method of Lee et al. (Method 2) and a slight modification of original protocol of Jones et al. (Method 3). Method 1 differed from Method 2 essentially only in that vigorous homogenization was carried out by omnimixer and homogenization medium containing 30mM Tris-maleate was used in the first step. The sarcolemmal fraction was enriched from 45 to 50 and 29-fold in [$^3H$] ouabain, [$^3H$] DHA, [$^3H$] QNB binding and $Na^+$, $K^+$-ATPase activity, respectively, compared to homogenate. Total $Na^+$, $K^+$-ATPase activity of highly sarcolemma enriched fraction was 144.6$\pm$16.4$\mu\textrm{mol}$ Pi/mg protein/hr, which was about 85%, of total ATPase activity, and the yield of the preparation was 15.7 mg protein per 100g of starting ventricular tissue. The sarcolemmal preparation supported $^{45}Ca^{2+}$-uptake in the presence of ATP but this uptake was not dependent on oxalate. Sarcolemmal $Na^+$, $K^+$-ATPase activity and detectable [$^3H$] ouabain binding were increased about 32% and 35%, respectively, by pretreatment of sarcolemmal fraction with optimal concentration of sodium dodecylsulfate (0.3-0.4mg/mg protein), suggesting that this preparation contained about 24% of sealed rightside-out vesicles, 26% of sealed inside-out vesicles, and 5001o of freely permeable (leaky) form. This procedure showed the highest protein yield and leaky population, compared to Method 2 and 3. On the other hand, sarcolemmal fraction prepared by Method 2 and 3 showed low value in protein yield but comtained high population of inside-out (46%) and rightside-out (49%) vesicles, respectively, compared to present procedure (Method 1). The results indicate that vigorous homogenization decreases the population of sealed sarcolemmal vesicles but increases the sarcolemmal protein yield per gram tissue and that this procedure is available for further purification of sarcolemmal fraction and for the receptor binding study of sarcolemma.

• 대한한의학회지
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• 제21권3호
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• pp.119-128
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• 2000

목적 : Rhabdomyolysis에 의해 유발된 급성 신부전시 나타나는 신장세뇨관 세포에서 물질이동의 저해가 단삼 추출액에 의해 방지될 수 있는 지를 조사하였다. 방법 : 토끼에 50％ glycerol을 10ml/kg씩 대퇴근육내 주사한 후 뇨와 혈액을 채취하여 신기능을 측정하고, 신피질 절편을 분리하여 실험하였다. 결과： 토끼에 50％ glycerol을 10ml/kg씩 대퇴근육내 주사한 결과 사구체여과율의 감소와 Na 배설분율의 증가가 나타남으로서 glycerol 주입이 rhabdomyolysis에 의해 급성신부전이 유발되었음을 보였다. Glycerol을 주사하기 전 7일 동안 단삼 추출액 (0.05%)을 0.3 g/kg씩 경구 투여한 결과 glycerol에 의해 유발된 사구체여파율의 감소와 Na 배설분율의 증가가 유의하게 방지되었다. glycerol만을 주사한 동물에서는 포도당과 인산의 요배설분율이 각각 현저하게 증가하였으나, 이러한 증가는 단삼 추출액에 의해 억제되었다. 급성신부전이 유발된 신장피질에서 분리한 brush-border membrane vescicles (BBMV)에서 포도당과 인산의 이동은 정상 신장과 비교하여 유의한 감소가 나타나고, microsomal fraction에서 측정한 Na＋-K+-ATPase 활성도 억제되었다. 이러한 억제현상은 단삼 추출액을 전처치한 결과 방지되었다. 급성신부전이 유발된 신장피질 절편에서 유기 음이온인 P-aminohippurate 이동과 유기 양이온인 tetraethylammonium의 이동이 억제되었고, 이러한 변화는 단삼 추출액에 의해 방지되었다. Rhabdomyolysis에 의해 유발된 포도당과 인산의 배설분율의 증가는 항산화제로 잘 알려진 DPPD 전처치로 방지되었다. 결론 ： Rhabdomyolysis에 의한 급성신부전의 유발 과정에 반응성 산소기가 중요한 역할을 할 가능성을 보이고 있고, 단삼 추출액 전처치는 Rhabdomyolysis에 의한 급성 신부전시 나타나는 근위세뇨관에서 물질의 재흡수 장애를 방지하고 있다. 단삼 추출액의 방지 효과는 항산화작용에 기인할 것으로 사료된다.

• 생명과학회지
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• 제15권1호
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• pp.80-86
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• 2005

생후 7주령 흰쥐를 대상으로 저강도집단, 중강도집단, 고강도집단, 통제집단으로 분리하여 8주 동안 트레드밀 운동을 실시한 후 심장을 적출하여 조직의 세포기질을 분리하고 전기영동을 실시하여 세포기질 LDH 동위효소의 분포양상을 확인하였고, 활성을 측정하였다. 또한 미토콘드리아를 순수분리한 뒤 분리된 미토콘드리아를 외막 내막 막간물질, 매트릭스로 각각 분리하여 각 분획을 전기영동을 실시하고 효소활성을 측정하였다. 운동 강도에 따른 장기간의 지구성훈련으로 심장조직의 세포기질 LDH 동위효소 활성은 운동집단과 비 운동집단에서 모든 LDH 동위효소의 활성을 나타냈다. 세포기질 LDH 동위효소의 운동 강도에 따른 활성변화는 모든 동위효소가 운동강도의 증가에 따라 증가하는 결과를 나타냈으며 모든 강도에서 $AB_3$ 동위효소의 활성이 가장 크게 나타났다. 심장조직 미토콘드리아 각 분획에서 운동 강도에 따른 LDH 등위효소의 분포와 활성은 외막의 경우 다른 분획에 비하여 동위효소의 분포 및 활성이 매우 약하게 나타났다. 운동강도가 증가하면서 모든 분획의 동위효소가 $B_4$쪽으로 활성이 강해지는 현상을 보이며, 외막에서 내막, 매트릭스로 이동하면서 각 분획에 LDH 동위효소의 분포도 많아지고 활성도 또한 증가하는 현상을 나타냈다.

• Journal of Plant Biology
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• 제35권2호
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• pp.117-123
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• 1992

암배양을 통한 노쇠중인 밀 제1엽에서 지질의 과산화반응과 불용성 잎단백질의조성 및 엽록체 틸라코이드 막단백질 조성의 변화에 대한 BA의 효과가 조사되었다. 성숙한 밀 제1엽을 잘라내어 4일간의 암배양을 통한 노쇠유도실험에서 $10^{-5}\;M$ Benzyladenine(BA)은 노쇠중인 밀잎에서 엽록소 함량 및 수용성과 불용성 단백질 함량의 감소를 크게 억제시켰다. 특히, 단배질 함량 감소에 대한 BA의 억제효과는 수용성 보다는 불용성 단백질에 있어서 더욱 현저하였다. 또한, BA로 처리된 잎에서 지질의 과산화물인 MDA 함량의 증가가 억제되었다. 불용성 단백질에 대한 SDS-전기영동 결과 양적으로 현저한 57, 26 및 12 KD 단백질이 다른 소량의 단백질 무리와 함께 분리되었다. 대조구 잎에서의 불용성단백질 조성의 변화는 72시간의 암배양동안 57 KD와 12 KD 단백질이 현저하게 분해 소실되었으나 26 KD 단백질은 비교적 분해가 덜 일어났으며 BA 처리시 이들 단백질의 소실이 크게 억제되었다. 엽록체 틸라코이드막 단백질 조성의 경우, 각각 CF의 $\alpha,\;\beta$ subunits인 59 KD 단백질과 57 KD 단백질 및 LHCP 단백질인 26 KD 단백질을 포함하는 20개 정도의 단백질이 SDS-전기영동상에서 분리되었다. 72시간의 암배양 동안 대조구 엽록체에서 이들 단백질들이 급속히 분해 소실되었으나 BA로 처리된 엽록체의 경우 이들 단백질의 분해가 정량적으로 크게 억제되었다. 위의 결과들은 BA가 노쇠중인 밀잎에서 막지질의 과산화반응 억제를 통해 막단백질의 손실을 지연시키며 그로 인하여 엽록체 틸라코이드막을 포함한 세포막이 유지될 수 있음을 나타내었다.

• 멤브레인
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• 제29권1호
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• pp.51-60
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• 2019

분리막 소재의 투과도와 선택도 사이의 trade-off 관계로 인해 여전히 많은 연구가 필요하다. 특히 고분자 분리막에 무기물 나노입자가 들어가 있을 때, 기체투과 거동의 학문적 이해는 여전히 부족하다. 따라서 본 연구에서는 분리막 소재로 가장 많이 사용되는 PDMS에 2~5 nm의 기공을 가지고 있으며 직경이 약 5 nm 크기의 aluminosilicate hollow nanoparticles인 allophane을 이용하여 복합매질 분리막을 제조하여 기체투과특성을 연구하였다. 대표적인 분리막 소재인 PDMS에 친수성 allophane, 그리고 나노입자에 undecylenic acid로 표면을 개질한 allophane을 막 내부에 고르게 분산시켜 함량 별로 복합매질 분리막을 제조하였다. 나노입자가 분산된 혼합매질 분리막 내에서 기체의 투과 특성을 파악하고, 이에 따른 기체투과 거동과 나노입자가 가지고 있는 기공의 역할을 평가하고자 하였다. 표면개질된 allophane을 첨가함에 따라 기체 투과도와 산소/질소 그리고 이산화탄소/메탄의 선택도가 동시에 점진적으로 향상되는 결과를 얻었다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제18권5호
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• pp.332-335
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• 1995

The angiogenic activity of Aloe vera (Aloe baradensis), known as a good healing plant, was investigated. We have extracted and fractionated dichloromethane extract (G1M1D1) and methanol soluble fraction of dichloromethane extract (G1M1D1M1) which contain low-molecular weight substances of Aloe vera gel. G1M1D1 and G1D1M1 fractions induced a radially arranged, spoke-sheel-like vasculature in chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) assay. The angiogenic activity was dose-dependent and the angiogenic pattern in the CAM assay. The angiogenic activity was dose-dependent and the angiogenic pattern in the CAM assay was very similar to that of phorbol 12-myristate-13-acetate (PMA) used as a positive control. The modified CAM assay, e simple and accurate quantitating method, was used to quntitate the angiogenic activity of G1D1M1 fraction. Application of G1M1D1M1 fraction ($100\mug/egg$) resulted in much more intense angiogenesis than in control while slightly less intense angiogenesis than in PMA (100 ng/egg).

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제33권3호
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• pp.378-386
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• 2023

The CYP707A family genes encoding ABA 8'-hydroxylase catabolize abscisic acid (ABA), a plant stress hormone that plays an important role in stress condition, such as drought, heat, cold and salinity. Phaseic acid (PA) is a catabolic product of ABA. Recent studies have shown that PA is important for the physiological functions in plants. It is also a neuroprotective molecule that protects against ischemic brain injury in mice. To obtain enzymes for the PA production, four CaCYP707A genes (CaCYP707A1, CaCYP707A2, CaCYP707A3 and CaCYP707A4) were isolated from hot pepper. They were heterologously expressed in Escherichia coli. Among them, CaCYP707A2 showed significantly higher expression levels in both the membrane fraction and the soluble fraction. Preferred redox partners were investigated to improve the efficiency of CaCYP707A2's catalytic reaction, and NADPH-cytochrome P450 reductase (CPR) from hot pepper (CaCPR) was preferred over other redox partners (i.e., rat CPR and ferredoxin reductase/ferredoxin). The production of 8'-hydroxy ABA and PA by ABA hydroxylation activity was confirmed in CaCYP707A2 from both membrane and soluble fractions. Therefore, CaCYP707A2 is the first identified plant CYP protein that is expressed a soluble form in cytosolic fraction having stable activity. Taken together, we propose a new CYP707A protein with industrial applications for PA production without additional modifications in E. coli heterologous expression.

• 한국막학회:학술대회논문집
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• 한국막학회 1997년도 추계 총회 및 학술발표회
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• pp.69-70
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• 1997

Polyimides and related polymers, when synthesized from aromatic monomers, have generally rigid chain structures resulting in a low gas permeability. The rigidity of polymer chains reduces the segmental motion of chains and works as a good barrier against gas transport. To overcome the limit of use as materials of gas separation membranes due to low gas permeability, block copolymers with the incorporation of flexible segments like siloxane linkage and ether linkage have been studied. These block copolymers have microphase-separated structures composed of microdomains of flexible poly(dimethylsiloxane) or polyether segments and of rigid polyimides segments. In case of rigid-flexible block copolymers, the characteristics of both phases for gas permeation are of great difference. The permeation of gas molecules occurs favorably through microdomains of flexible segments, whereas those of rigid segments hinder the permeation of gas molecules. Accordingly the increase of content of flexible segments in a rigid polymer matrix will increase the gas permeability of the membrane linearly. However, this prediction does not satisfy enough many experimental results and in particular the drastic increase of the permeability is observed in a certain volume fraction. It was proposed that the gas transport mechanism is dominated by diffusion rather than gas solubility in a certain content of flexible phase if solution-diffusion mechanism is adopted. However, the transition from solubility-dependent to diffusion-dependent cannot be explained by the understanding of mechanism itself. Therefore, we consider an effective chemical path which permeable phase can form in a microheterogenous medium, and percolation concept is introduced to describe the permeability transition at near threshold where for the first time a percolation path occurs. The volume fraction of both phases is defined as V$_{\alpha}$ and V$_{\beta}$ in block copolymers, and the volume of $\beta$ phase in the threshold forming geometrically a traversing channel is defined as V$_{\betac}$. The formation mechanism of shortest chemical channel is schematically depicted in Fig. 1.

• 상하수도학회지
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• 제22권1호
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• pp.79-86
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• 2008

In Korea, most of the drinking water treatment relied upon the availability of the surface water, of which the raw water quality varied significantly by season and location. Therefore, the comparison of two operation modes (Pressurized type and Submerged type membrane system) must be estimated before the long-term establishment of two systems. In this study, two pilot-scale microfiltration systems with the capacity of $50m^3/day$ were installed and operated in two different modes, and the applicability of the system was determined based on the results such as the TMP (Trans-Membrane Pressure) and flux. For quantitatively comparing the two systems, a new concept, DRF (Differential Resistance Fraction) was introduced. The accumulated sum of the permeate after each cycle of chemical cleaning was also used as a tool for the system comparison.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제13권4호
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• pp.325-329
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• 1990

Synaptosomal plasma membrane vesicles (SPMV) were isolated from fresh bovine cerebral cortex by several well-known procedures, and the best procedures was selected by enzymatic and morphological standards. The SPMV isolated by the modified procedure of Smith and Loh showed the highest purity. The specific activities of Na, K-ATPase, acetylcholinesterase and 5'-nucleotidase were about 5, 6-fold, 2, 5-fold and 3, 3-fold, respectively, enriched in the plasma membrane fraction as compared to those of the crude homogenate. Electron microscpic examination also showed that the membranes were in vesicular form.