• 대한화장품학회지
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• 제32권1호
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• pp.23-28
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• 2006

본 연구는 택사의 화장품 원료로서의 특성을 알아보기 위하여 화장품의 기능들인 항산화, 미백, 세포 손상 회복 및 항염증과 관련된 다양한 실험을 실시하였다. 30, 70, 100% MeOH 용매로 추출한 택사 추출물들은 DPPH법으로 실시한 free radical scavenging assay에서 좋은 활성을 보여주었고, tyrosinase 활성 억제 시험에서도 0.5% 이상의 농도에서 농도 의존적인 활성을 보여주었다. Human fibroblast를 사용한 proliferation assay (MTT assay)에서 각 용매 추출물들은 별다른 효과를 보여주지 못했고 0.05% 이하의 농도에서는 세포 독성으로부터 안전하다는 것을 알 수 있었다. Bl6 melanocyte를 사용한 melanin 생성 억제시험에서 각 용매별 추출물은 독성으로부터 안전한 0.05% 이하의 농도에서 melanin 생성을 40% 이상 억제하는 높은 활성을 보여주었다. 이후 우리는 택사 추출물의 MPLC분리 분획을 실시하여 세 가지 분획을 얻었으며 이들을 대상으로 세포 손상 회복시험과 melanin생성 억제 시험, 염증인자 생성 억제 시험을 실시하였다. 그 결과 분획물들 중 3번 분획물이 세포 손상 회복을 30% 이상 올려주는 좋은 결과를 보여주었고, melanin 생성 억제 시험과 COX-2 생성억제에서도 주목할만한 결과를 보여주었다.

• 약학회지
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• 제56권6호
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• pp.395-400
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• 2012

To investigate the possibility of development as a whitening agent using arctigenin, we measured DPPH assay, NBT/XO assay, intracellular ROS scavenging assay, tyrosinase assay and MSH-induced melanin production in B16 melanoma cells. Arctigenin dose-dependently had anti-oxidant activity in DPPH, NBT/XO and intracellular ROS assay. Although arctigenin did not inhibit purified tyrosinase activity, it dose-dependently inhibited tyrosinase activity and melanin production in B16 melanoma cells stimulated by $1{\mu}M$ ${\alpha}$-MSH. In particular, arctigenin at a concentration $100{\mu}M$ inhibited ${\alpha}$-MSH-stimulated tyrosinase activity and melanin production by $50.9{\pm}2.9%$ and $69.0{\pm}6.5%$ respectively. And typical tyrosinase inhibitor, arbutin, inhibited $57.7{\pm}2.9%$ and $65.1{\pm}5.0%$ respectively. Such an similar inhibitory effect of arctigenin and arbutin in B16 melanoma cells may be due to the inhibition of MSH signal pathway rather than the direct inhibition of tyrosinase. Therefore, these results suggest that arctigenin may be useful for the development as whitening agents.

• 생명과학회지
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• 제28권7호
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• pp.802-810
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• 2018

노화란 나이가 들면서 생기는 몸의 변화로 검은 머리가 흰 머리로 변하는 백발화, 과산화 지질과 단백질로 구성되어 생성되는 검버섯, 주름 등으로 나타난다. 멜라닌은 tyrosine에서 DOPA를 거쳐 산화 중합반응에 의해 생성되는 고분자 물질로 인체 내에 존재하는 머리카락 및 피부 색을 결정한다. 이러한 멜라닌은 melanocyte에서 합성되며, 활성산소에 의해 과도하게 생성되면 노화를 일으킨다는 연구가 보고되고 있다. 본 연구의 목적은 항산화 효과 및 멜라닌 합성에 대한 바나나 껍질 추출물(MPEE)의 직접적인 효과를 밝히는 것이다. MPEE는 DPPH radical scavenging assay와 reducing power assay를 수행한 결과, 두 실험 모두 양성대조군인 vitamin C와 비슷한 항산화 활성을 나타내었다. 세포 실험에 앞서 세포 독성을 알아보기 위해 B16F1 세포에서 MTT assay를 수행하였다. MPEE는 $32{\mu}g/ml$ 이하의 농도에서 세포독성이 없는 것으로 나타났다. 또한, MPEE는 invitro에서 tyrosinase 활성과 DOPA-oxidation 뿐만 아니라 살아있는 세포에서 멜라닌 합성을 증가시켰다. 더욱이, $H_2O_2$로 세포를 노화시켜 L-DOPA 실험을 수행한 결과, MPEE는 멜라닌 합성을 증가시켰다. 단백질 수준의 발현을 위한 Western blot 분석을 수행한 결과, TRP-1, TPR-2와 SOD-2의 발현 수준은 MPEE의 존재 하에서 증가되었다. 이상의 결과는 MPEE가 항산화 소재로 멜라닌 합성을 촉진시킨다는 것을 암시하고 있다.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제18권2호
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• pp.152-158
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• 2010

Melanin concentrating hormone is a neuropeptide highly expressed in the brain that regulates several physiological functions mediated by receptors in the G-protein coupled receptor family, especially plays an important role in the complex regulation of energy balance and body weight mediated by the melanin concentrating hormone receptor subtype 1 (MCH1). Compelling pharmacological evidence implicating MCH1 signaling in the regulation of food intake and energy expenditure has generated a great deal of interest by pharmaceutical companies as MCH1 antagonists may have potential therapeutic benefit in the treatment of obesity and metabolic syndrome. Although fluorescence-based calcium mobilization assay platform has been one of the most widely accepted tools for receptor research and drug discovery, fluorescence interference and shallow assay window limit their application in high throughput screening and have led to a growing interest in alternative, luminescence-based technologies. Herein, a luminescence-based functional assay system for the MCH1 receptor was developed and validated with the mitochondrial targeted aequorin. Aequorin based functional assay system for MCH1 presented excellent Z' factor (0.8983) and high signal-to-noise ratio (141.9). The nonpeptide MCH1 receptor antagonist, SNAP 7941 and GSK 803430, exhibited $IC_{50}$ values of 0.62 ${\pm}$ 0.11 and 12.29 ${\pm}$ 2.31 nM with excellent correlation coefficient. These results suggest that the aequorin based assay system for MCH1 is a strong alternative to the traditional GPCR related tools such as radioligand binding experiments and fluorescence functional determinations for the compound screening and receptor research.

• 생명과학회지
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• 제28권5호
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• pp.532-539
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• 2018

백모 발생은 연령이 증가함에 따라 모낭에 있는 melanocyte 수가 감소됨과 동시에 세포활성이 저하되고 동시에 과산화수소($H_2O_2$)가 축적되어 melanin 합성이 감소되어 진행된다. 본 연구의 목적은 흑미 주정추출물인 Black oryzasativa ethanolic extract (BLEE)가 백모에서 흑모로 전환되는데 관련되어 있는 melanin 합성에 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 하였다. 본 연구에서 사용된 BLEE는 DPPH radical scavenging assay 및 환원력 실험에서 $64{\mu}g/ml$에서 항산화 효과가 있는 것으로 나타났으며, tyrosinase 활성 및 melanin 생성 촉진효과는 $16{\mu}g/ml$ 이상에서 효과가 나타났다. DCF fluorescence assay에서 세포내 $H_2O_2$를 소거하는 효과가 있는 것으로 나타났고, $H_2O_2$를 처리한 세포에서 melanin 생성 촉진효과가 있는 것으로 나타났다. 그러나 Western blot 분석에서는 catalase의 발현을 감소시키는 것으로 나타났으며 melanin 생성에 관여하는 tyrosinase, TRP-1, TRP-2, 효소 및 MITF 전사인자의 발현촉진에는 영향이 없는 것으로 나타났다. 그러므로 BLEE의 melanin 생성 촉진효과는 tyrosinase 활성 증가와 세포내 $H_2O_2$의 생성을 감소시켜 melanin 생성을 촉진시키는 것으로 나타났다. 결론적으로 BLEE는 melanin 생성을 촉진시키는데 있어서 중요한 역할을 하고 있는 것으로 확인되었으며, 본 연구에서 개발된 BLEE는 흑모성장과 연관이 있는 melanin생성 촉진과 관련된 모발화장품 개발분야에서 하나의 잠재적인 기능성 소재로 응용 될 수 있다는 것을 시사하고 있다.

• 생약학회지
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• 제52권1호
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• pp.13-18
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• 2021

This study was performed to clarify the whitening effects of anthricin on the B16F10 cell line. In order to elucidate the whitening effects of anthricin on the B16F10 cell line, cell viability, messenger ribonucleic acid (mRNA) expressions, tyrosinase activity assay, and melanin production assay were measured. The effects of anthricin on tyrosinase-related protein 1(TYRP1)/TYRP2/tyrosinase (TYR)/microphthalmia-associated transcription factor (MITF) mRNA expressions and melanin content were determined. Quantitative real-time RT-PCR showed that anthricin decreased the mRNA expression level of TYRP1/TYRP2/TYR/MITF genes and melanin production contents than α-MSH-treated B16F10 cells. The tyrosinase activity assay revealed that anthricin decreased the melanin production on the B16F10 cells. These data show that anthricin increases the whitening effects on the B16F10 cells; thus, anthricin is a potent ingredient for skin whitening. Thus, further research on the mechanism of action of anthricin for the development of not only cosmetics, but also healthy food and medicine should be investigated.

• 생명과학회지
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• 제24권5호
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• pp.485-490
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• 2014

백복령(Poria cocas)은 전통적으로 민간에서 피부미백에 효과가 있다고 보고되어 있다. 지금까지 melanin 합성에 대한 백복령의 직접적인 효과는 과학적으로 잘 연구되어 있지 않다. 따라서 멜라닌 합성에 대한 백복령 주정 추출물(PCEE)의 직접적인 효과를 밝히기 위해, 쥐의 B16F1 세포를 이용하여 DOPA synthesis assay, tyrosinase activity assay, Western blotting for melanogenic proteins [tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP)-1 and TRP-2]를 수행하였다. 본 연구에서 PCEE가 3,4-dihydroxyindole-2-carboxylic acid (DOPA) 합성을 차단함으로써 농도 의존적으로 melanin형성을 억제한다는 것이 밝혀졌다. 비록 tyrosinase의 활성은 영향을 받지 않았지만 TRP-1 과 TRP-2의 단백질 발현 수준은 PCEE에 의해 조절되었다. 따라서 이러한 결과는 PCEE가 미백 효능을 가지고 있어 미백 화장품 개발을 위해 이용될 수 있다는 것을 시사하고 있다.

• The Plant Pathology Journal
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• 제16권3호
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• pp.125-129
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• 2000

A rapid and efficient assay to determine melanin biosynthesis inhibition of Magnaporthe grisea, a causal agent of the rice blast, by chemicals was developed. Wells in 24-well plates were loaded with spore suspension of the fungus and three known melanin biosynthesis inhibitors of KC10017, tricyclazole, and carpropamid. Subsequent color changes of mycelia and culture media in the wells were observed 7 days after incubation. The wells treated with KC10017 (an inhibitor of polyketide synthesis step and/or pentaketide cyclization step) became colorless, whereas tricyclazole (an inhibitor of 1, 3, 8-trihydroxynaphthalene reductase) or carpropamid (an inhibitor of scytalone dehydratase)-treated wells exhibited red color. They did not show any inhibitory effect on fungal growth. The inhibition of reaction steps prior to 1, 3, 6, 8-tetrahydroxynaphthalene formation was easily determined by colorless medium and mycelia. However, it was impossible to distinguish between inhibition of reduction steps and inhibition of dehydration steps by colors of the cultures. It was accomplished through HPLC analysis of the melanin biosynthesis-involving pentaketide metabolites accumulated by the inhibitors. Through screening of a number of synthetic chemicals using the in vitro assay, we could find a novel chemical group of melanin biosynthesis inhibitor.

• KSBB Journal
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• 제25권5호
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• pp.478-482
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• 2010

죽여 추출물의 미백 효과를 확인하기 위하여 용매와 추출방법을 달리한 6가지의 추출물을 얻어 tyrosinase 활성 억제시험을 하였다. 그 결과 메탄올로 추출한 죽여 추출물에서 tyrosinase 활성 억제 효과가 가장 우수한 것을 확인 하였다. 세포 수준에서 죽여 추출물의 melanin 생성 억제 효과를 알아보기 위해서 B16 melanoma 세포를 이용하여 MTT assay를 실시하였고, 50 ppm의 농도 까지는 세포 독성이 나타나지 않은 것을 확인하였다. 죽여 추출물에 의한 세포 내 melanin 합성 저해 효과를 측정하기 위해 melanin contents assay를 하였고, 10 ppm 추출물을 처리한 extra cellular에서는 control 대비 68%, intra cellular에서는 74% 수준으로 melanin 합성이 저해됨을 확인하였다. 이차원전기영동을 이용하여 B16 melanoma 세포의 proteome을 분석 해 본 결과, 죽여 추출물 을 투여하지 않은 대조군에서는 171개, 추출물을 투여한 것에서는 282개의 spot을 확인하였고, 120개의 spot matching 을 확인하였다. 이 중 미백에 관련된 12개의 단백질 동향분석을 통하여, 죽여 추출물이 melanin 합성 전이나 합성 중에 관련된 메커니즘에 관련하는 것을 알 수 있었다.

• 약학회지
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• 제51권6호
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• pp.500-507
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• 2007

To investigate the possibility of development as a whitening agent using bamboo extracts (Phyllostachys nigra var. henonis), we measured DPPH assay, NBT/XO assay, intracellular ROS scavenging assay, tyrosinase assay and MSH-induced melanin production in B-16 cells. Bamboo extracts had dose-dependently anti-oxidant activity in DPPH, NBT/XO and intracellular ROS assay. Bamboo extracts appear to inhibit xanthine oxidase directly. Bamboo extracts inhibited not only purified tyrosinase activity but also inhibited tyrosinase activity and melanin production in B16 melanoma cells stimulated by $1{\mu}M\;{\alpha}$-MSH. Anti-oxidant activity and cytotoxicity of ethyl acetate fraction was more potent than those of water fraction, whereas whitening effect of water fraction was stronger than ethyl acetate fraction. Therefore, these results suggest that water fraction of bamboo extracts may be useful for the development as whitening agents reducing cytotoxicity.